兒童菌血癥細菌分離與耐藥性研究范文
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蠟樣芽孢桿菌隸屬于需氧芽孢桿菌屬，主要通過污染食品引起食物中毒，還可引起膿毒癥、心內膜炎、創傷部位和肺部感染等疾病[1]。為了解兒童感染病原體中蠟樣芽孢桿菌的感染情況及耐藥性特點，現對我院兒科和新生兒科血液標本中的蠟樣芽孢桿菌的分離及耐藥狀況進行分析，并報告如下。
1材料與方法
1．1標本收集
收集2006年1月—2010年3月兒科和新生兒科門診及住院菌血癥患兒血液中分離的61例蠟樣芽孢桿菌標本。標本收集嚴格按照標準收集方法進行，每個患兒均在科室的配藥室以嚴格的無菌操作采取血液標本，以排除空氣等環境中蠟樣芽孢桿菌的污染干擾。采集患兒靜脈血1～3ml，立即注入雙向血培養瓶，瓶口向上，將血培養瓶置于35℃溫箱孵育，每日顛倒均勻至少2次。
1．2材料
藥敏紙片、雙向血培養瓶、羊血購自康泰生物科技有限公司，哥倫比亞瓊脂、API50CH試驗條、0．85％生理鹽水培養基與API50CHB／E培養基購自法國梅里埃公司。
1．3陽性標本的選擇
嚴格執行臨床確認制度，每份陽性標本的患兒均有急性發熱、白細胞及中性粒細胞明顯增高等表現，臨床診斷為菌血癥，并根據血培養檢查藥敏報告選擇相應抗生素且均治愈[2]。
1．4菌種鑒定與藥敏測試
嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》對送檢標本進行分離培養，選取在哥倫比亞血瓊脂培養基上生長良好的可疑菌落，采用API50CH試驗條進行細菌鑒定。藥敏試驗以K-B法測定所有菌株對相應抗菌藥物的耐藥性，觀察時間和結果評價依據CLSI2006年版本的標準[3]。
2結果
2．1培養結果
在哥倫比亞血瓊脂培養基上菌落融合成一片，不透明，灰白色，表面粗糙，邊緣不整齊似毛玻璃狀，呈β溶血。形態為革蘭陽性大桿菌，芽孢呈卵圓形，不突出菌體，菌體兩端較平整。生化反應符合蠟樣芽孢桿菌生物學特性。
2．2蠟樣芽孢桿菌在血液標本中的分布特征
從2006年1月—2010年3月本院在各種臨床標本中共分離蠟樣芽孢桿菌247例，其中血液標本檢出83株（占33．6％），兒童菌血癥患者血液標本檢出61例，占血液標本檢出率的73．5％，其中人工喂養的新生兒49例，占80．3％。同期門診及住院菌血癥患兒中共分離出病原菌1297例，其中蠟樣芽孢桿菌61例，占4．7％。
2．3抗菌藥物體外敏感試驗結果
61株蠟樣芽孢桿菌對13種常見抗菌藥物耐藥率檢測結果顯示：抗菌藥物活性較好的前幾位是氨芐西林／舒巴坦、頭孢噻肟，氧氟沙星、呋喃妥因及阿米卡星、耐藥率分別為1．6％、9．8％、11．5％、13．1％、13．1％；耐藥率較高的是青霉素（57．4％）、氨芐西林（52．5％）、頭孢唑啉。見表1。
3討論
蠟樣芽孢桿菌在自然界分布較廣，通常存在于水、塵埃、淀粉制品、乳及乳制品、蔬菜中，并可在其中生長繁殖。蠟樣芽孢桿菌最常見的感染形式是引起食物中毒，近年來發現蠟樣芽孢桿菌還可引起胃腸外感染[4]。據文獻報道，隨著從人體其他部位標本中分離的蠟樣芽孢桿菌逐漸增多，血液標本中的分離率躍居蠟樣芽孢桿菌分布特征的第2位，并以從小兒膿毒癥患者分離為多見[5]。本組結果顯示，小兒蠟樣芽孢桿菌膿毒癥中分離率占絕大多數（73．5％），與文獻報導一致。究其原因為兒童尤其是新生兒特異性免疫及非特異性免疫功能均不成熟，抵抗力低，其腸道缺乏能拮抗蠟樣芽孢桿菌的正常菌群，加之皮膚黏膜發育不完善，易破損感染（如臍部護理不當），條件致病菌容易入侵，導致對各種病原體的易感性高，發生感染后易擴散造成菌血癥。本組蠟樣芽孢桿菌占小兒菌血癥患者病原菌分離率的4．7％，應引起臨床高度重視。
另外，本研究結果顯示，以人工喂養的新生兒蠟樣芽孢桿菌感染尤其明顯（49例，占80．3％），分析其原因有二：一方面人工喂養的小兒因為無法通過母乳獲取母體的免疫力，故較之母乳喂養的小兒免疫力更低；另一方面人工喂養的小兒須用乳及乳制品代替母乳，后者常由于食前放置時間較長、保存溫度不當或食品經加熱而殘存的芽孢得以生長繁殖而發生胃腸感染后，感染易擴散造成膿毒癥，所以蠟樣芽孢桿菌在新生兒血培養中檢出率不容忽視。從本組藥敏結果看，在臨床常用的13種抗生素的藥物敏感試驗中，抗菌藥物活性較好的是三代頭孢菌素如頭孢噻肟，耐藥率僅為9．8％，且價格適中，可以考慮為首選經驗用藥，與文獻報導一致[6]。耐藥率較高的是臨床經驗抗菌藥物青霉素類和一、二代頭孢菌素藥物如青霉素（57．4％）、氨芐西林（52．5％）、頭孢唑啉（47．5％），耐藥率均＞45％，此結果與致病菌對抗菌藥物的耐藥性變化有關[7]，提示臨床醫師不應經驗選用這些藥物，而添加抑酶劑后，可顯著提高其抗菌活性，如氨芐西林／舒巴坦的耐藥率下降為1．6％，其余的耐藥率均＜25％，整體抗菌活性較好，這與目前小兒臨床使用抗生素頻率低和兒童用藥局限性有關。
膿毒癥是兒科較常見的疾病和危重病，常迅速進展呈暴發性多器官受累，發病率及病死率均較高，臨床合理使用抗菌藥物是成功治療菌血癥的關鍵，一旦懷疑膿毒癥，必須立即進行抗生素治療，如不能及時有效的治療可危及生命。但是由于患兒的特殊生理特點，給臨床抗菌治療帶來很大困難，所以應當注意在兒科預防和及時發現蠟樣芽孢桿菌膿毒癥的感染，嚴防漏檢而貽誤治療時機。尤其應重視準確分離、鑒定菌株，測定其耐藥譜，建議根據細菌培養和藥敏試驗結果選用針對性強的抗生素，避免盲目使用抗菌藥物。
