兒童急性淋巴細胞白血病染色體分析范文

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摘要：

目的對兒童急性淋巴細胞白血病（ALL）中的染色體核型及融合基因進行分析。方法應用骨髓染色體標本及FISH方法對38例兒童ALL患者做染色體核型分析及融合基因檢測。結果38例檢測患兒中發現染色體異常核型7例；融合基因檢測陽性者12例，其中7例是TEL/AML1陽性。結論細胞遺傳學聯合融合基因檢測有助于兒童ALL的診斷及預后判斷分析。

關鍵詞：

急性淋巴細胞白血??；染色體；融合基因

急性淋巴細胞白血?。ˋLL）是兒童時期常見的惡性腫瘤之一。染色體異常與白血病的發生及預后密切相關。WHO分型以來，對染色體的改變和融合基因的表達越發重視。本文對我院2011年9月至2014年12月收治的38例ALL兒童的染色體核型及融合基因檢測結果總結分析，以期為兒童急性淋巴細白血病的診斷、治療及預后判定提供幫助。

1資料與方法

1.1研究對象河北省兒童醫院2011年9月至2014年12月確診為ALL的患者38例，所有病例均符合張之南主編的血液病診斷及療效標準[1]，其中女性8例，男性30例，年齡分布為1歲8個月～11歲。

1.2標本采集及實驗方法

1.2.1染色體標本來自骨髓，肝素抗凝，選擇髂后上棘為穿刺點，嚴格消毒，抽取骨髓0.2～0.4ml，應用24～48h短期培養法制備染色體，收集有絲分裂中期細胞，G顯帶，直接鏡下分析核型，每例至少分析50個分裂相，核型異常參照《人類細胞遺傳學國際命名體制》[2]進行描述。

1.2.2應用FISH方法檢測融合基因BCR/ABL、E2A/PBX1，用配有DAPI/FITC/TRITC三色激發塊的OlympusBX51顯微鏡檢測雜交信號，并采用顯微照相機進行照相。

2結果

2.1染色體及融合基因檢測結果38例病例中，染色體核型檢查，失敗2例，正常核型29例，異常核型7例；融合基因檢測顯示陽性12例。

2.2異常的核型及其融合基因結果如下表1：在上表中，融合基因陽性合并染色體核型異常2例，其余的10例融合基因陽性的結果分別為：TEL/AML1陽性7例，相應染色體結果中有2例無分裂相，5例染色體結果正常；E2A/PBX1陽性1例，其染色體結果均正常；BCR/ABL（210）陽性2例，其染色體結果均正常。

3討論

隨著近年來治療水平的不斷提高，白血病患者總體無病存活率（DFS）可達80%左右，但仍有部分兒童ALL臨床療效很差。目前，對于兒童ALL患者，染色體異常與診斷和預后的聯系已經得到了比較廣泛的認可，染色體核型檢查結合融合基因的檢測有助于臨床判斷ALL的危險度分級，也是合理用藥的基礎。本組試驗中，染色體核型異常聯合融合基因陽性共計檢出15例，占患者總數的40%，染色體核型異常者中數量異常者占42%，融合基因檢測中BCR/ABL陽性占患者總數7.8%，E2A/PBX1陽性占患者總數的5%，這與其他文獻中大致相當或略高[3-5]。腫瘤和白血病研究組B（CALGB）8811研究及9111研究，通過分析大量ALL患者的不良預后因素與生存關系認為，不良試驗室特征如BCR-ABL陽性或費城染色體（Ph）陽性等是重要的預后不利因素。這是由于9q34斷裂，其脫落的部分易位到22q11，由此形成的異常22號染色體。9號染色體長臂遠端的ABL原癌基因易位至22號染色體的BCR基因斷裂點，在分子水平上形成BCR-ABL融合基因，它包括多個功能區域，具有復雜的生物學活性，例如：持續增強的酪氨酸激酶活性，影響細胞增殖、分化和凋亡等的信號轉導；抑制細胞凋亡；改變細胞的黏附特性，導致過多未成熟的細胞釋放到外周血；削弱細胞對生長因子的依賴性，引起細胞的過度增殖等[6]。在本試驗中發現3例BCR/ABL陽性陽性，給予常規劑量化療，預后不佳，緩解期較短，這與文獻報道相符。

另外本試驗發現2例E2A/PBX1陽性的患兒，經采用研究提示的強烈化療方案[7]，預后得以改善，表明染色體分析在兒童ALL的診療中有著重要的指導意義。研究表明，除BCR/ABL融合基因外，TEL-AML1融合基因也是ALL兒童常見的預后判斷指標。在染色體結構畸變中，t（12；21）（p13；q22）是兒童ALL最常見的染色體易位，t（12；21）所形成的融合基因TEL/AML1，在其中，TEL失去Ets結構域，AML1幾乎保持完整，TEL-AML1融合基因造成TEL功能的喪失并抑制AML1的轉錄活性，從而影響造血細胞歸巢和抑制造血干/祖細胞分化成熟。TEL/AML1多見于兒童前B-ALL，而T-ALL較B-ALL更易復發，TEL/AML1一般可作為ALL一個獨立的預后好的因素，有此融合基因出現可明顯提高ALL的緩解率[8]。本文的7例TEL/AML1陽性患兒均為前B-ALL，在治療過程中發現，在開始化療的第29天骨髓涂片檢測結果均有所緩解，且早期復發率低，亦與文獻報道相符。另外，對比本試驗中染色體核型以及融合基因的檢測結果，融合基因檢測對兒童ALL患者染色體畸變更為敏感，但其無法檢測出染色體數量異常及缺失等情況，因此染色體核型聯合融合基因檢測可以更有效的檢出兒童ALL患者的染色體畸變，從而有助于患者的臨床治療和預后判斷。

作者：王青霞 劉征燕 馬琳 安會波 單位：河北省兒童醫院病理科