婦科病理學(xué)護(hù)理改革與實(shí)踐范文

本站小編為你精心準(zhǔn)備了婦科病理學(xué)護(hù)理改革與實(shí)踐參考范文，愿這些范文能點(diǎn)燃您思維的火花，激發(fā)您的寫(xiě)作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

本文作者：于月新李巨陳佳樊寶劍顏宇博單位：解放軍第二0二醫(yī)院婦產(chǎn)科沈陽(yáng)

附件扭轉(zhuǎn)(adnexaltorsion，AT)是婦科常見(jiàn)急腹癥之一。以往常規(guī)治療是行急診手術(shù)切除附件以防卵巢靜脈血栓脫落、缺血再灌注(IR)損傷、卵巢壞死等。但卵巢扭轉(zhuǎn)患者常以未成年或生育期女性居多[1]，而且扭轉(zhuǎn)的卵巢病變往往為良性，甚至扭轉(zhuǎn)的卵巢本身并無(wú)病變[2]，使首選手術(shù)切除扭轉(zhuǎn)附件的治療原則受到置疑。蒂扭轉(zhuǎn)發(fā)生后，卵巢靜脈和動(dòng)脈血流依次受阻[3]，進(jìn)而導(dǎo)致卵巢組織發(fā)生充血、水腫和缺血性損傷，如不及時(shí)診治可造成卵巢不可逆轉(zhuǎn)的壞死、破裂及感染等嚴(yán)重并發(fā)癥。及時(shí)判斷附件扭轉(zhuǎn)后卵巢的活力對(duì)成功保留卵巢至關(guān)重要。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立兔附件扭轉(zhuǎn)模型研究附件扭轉(zhuǎn)后卵巢早期病理學(xué)改變，探討不同扭轉(zhuǎn)時(shí)間對(duì)卵巢的組織學(xué)和一氧化氮合成酶(iNOS)影響。材料和方法

1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組雌性成年日本大耳白兔40只，8-12月齡，體質(zhì)量2.5-3.0kg，由沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[合格證號(hào)：SCXK(軍)2007-001]。采用隨機(jī)數(shù)字法分為2組，實(shí)驗(yàn)組(n=32)和對(duì)照組(假手術(shù)組，n=8)，實(shí)驗(yàn)組再按隨機(jī)排列表法隨機(jī)分成附件扭轉(zhuǎn)后24、48、72、96h4組，每個(gè)時(shí)相點(diǎn)8只。本研究遵循國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例及國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理實(shí)施細(xì)則，符合國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要求及動(dòng)物倫理學(xué)要求。所有動(dòng)物采用籠中獨(dú)立飼養(yǎng)方法，自由飲食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

2實(shí)驗(yàn)器材及試劑顯微鏡(型號(hào)OLYMPUSBX51TF)，離心機(jī)(HERAEUSPico17，Thermo公司)，紫外分光光度計(jì)(UV-1700Pharmaspec，Shimadzu公司)，恒溫水浴(HH-2型，江蘇金松科技儀器廠)。手術(shù)剪2把，血管鉗4把，持針器1把，5×12圓針1枚，8×20三角針1枚，4號(hào)縫線，彎頭鑷1把，刀片1把。氯胺酮。羊抗兔iNOS多克隆抗體(一抗)、即用型SABC試劑盒(包括正常封閉血清、生物素化二抗、SABC、抗原修復(fù)液、復(fù)合修復(fù)液)及DAB染色液等購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。

3模型制作雌性成年日本大耳白兔稱重后氯胺酮40mg/kg肌肉注射，待四肢松軟、睫毛反射消失后將其仰臥固定于手術(shù)臺(tái)。腹部備皮后予安爾碘消毒，鋪巾。取下腹部正中切口長(zhǎng)約6cm，逐層切開(kāi)入腹腔，暴露雙側(cè)子宮和輸卵管、卵巢，觀察并記錄其大小及顏色。將實(shí)驗(yàn)組兔的左側(cè)附件按順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)3周，將之固定于左側(cè)腹壁。假手術(shù)組僅開(kāi)腹后提拉出左側(cè)附件至切口，再放回原處關(guān)腹。實(shí)驗(yàn)組分別于扭轉(zhuǎn)24、48、72、96h后開(kāi)腹拆除縫線，將扭轉(zhuǎn)的卵巢和輸卵管松解并復(fù)位，觀察卵巢血運(yùn)的恢復(fù)情況，摘除雙側(cè)卵巢；假手術(shù)組96h后取雙側(cè)卵巢。

4附件扭轉(zhuǎn)后卵巢組織形態(tài)學(xué)觀察將卵巢組織浸泡于10%甲醛溶液中，乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟浸透、包埋，切片機(jī)連續(xù)切片，厚度為4μm，蘇木精2伊紅(HE)染色，光鏡下觀察組織形態(tài)學(xué)變化。Olympus光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)選擇5個(gè)視野觀察病理組織學(xué)切片檢測(cè)卵巢組織水腫、充血、出血、壞死程度。參考Diskensoy等[4]標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)分(表1)。其中0分為無(wú)損傷，1分為輕度損傷，2分為中度損傷，3分為重度損傷(壞死)。

5卵巢iNOS表達(dá)和指標(biāo)檢測(cè)取摘除之左側(cè)余1/2卵巢，固定后石蠟切片，檢測(cè)iNOS的表達(dá)。iNOS表達(dá)的結(jié)果判定(采用雙盲法閱片)：iNOS以胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒作為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)；結(jié)合染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)分級(jí)，每一切片隨機(jī)用顯微鏡選取3個(gè)視野(×100)，在高倍鏡(×400)選取100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞所占百分?jǐn)?shù)。<10%為0分，10%-25%為1分，26%-50%為2分，>51%為3分。按著色程度計(jì)分:基本未著色、染色與背景相似者為0分；著色淺、略高于背景者為1分；中度著色、明顯高于背景者為2分；強(qiáng)染、著色深棕者為3分。兩項(xiàng)合并0-1分為陰性(-)，2分為陽(yáng)性(+)，>3分為強(qiáng)陽(yáng)性(++)。

6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用-x±s分析，分類(lèi)資料采用χ2檢驗(yàn)。病理評(píng)分比較采用Kruskal-WallisH秩和檢驗(yàn)，多個(gè)獨(dú)立樣本間的多重比較采用擴(kuò)展的t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1模型一般狀態(tài)40只兔均存活，對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組左卵巢扭轉(zhuǎn)24、48、72、96h后各組肛溫、心率、呼吸頻率兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2卵巢組織肉眼所見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組各時(shí)相點(diǎn)兔二次開(kāi)腹后，可見(jiàn)腹腔內(nèi)程度不等粘連，子宮及右附件未見(jiàn)明顯異常，左側(cè)卵巢及輸卵管呈程度不等的水腫、充血、出血、紫色或黑色，并隨著時(shí)相點(diǎn)的推移而加重。實(shí)驗(yàn)組缺血24h后5只(5/8)兔卵巢及輸卵管呈淺紅色，2只(2/8)呈深紅色，1只(1/8)呈藍(lán)黑色；缺血48h組有2只(2/8)卵巢及輸卵管呈淺紅色，3只(3/8)呈深紅色，3只(3/8)呈藍(lán)黑色；而缺血72h組6只(6/8)呈藍(lán)黑色。而對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組右側(cè)卵巢未見(jiàn)明顯異常。

3病理形態(tài)學(xué)改變實(shí)驗(yàn)組兔左卵巢扭轉(zhuǎn)24h后卵巢細(xì)胞間隙增寬，輕度充血水腫，少量中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)(圖1C)。48h后炎性細(xì)胞浸潤(rùn)加重，細(xì)胞水腫充血明顯，72h后見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)胞腫脹變性，結(jié)構(gòu)損壞和局灶性壞死(圖1D)；96h見(jiàn)重度水腫，濁腫、破裂。彌漫性細(xì)胞壞死，細(xì)胞濁腫退變、崩解，結(jié)構(gòu)模糊(圖F)。假手術(shù)組及右側(cè)卵巢標(biāo)本(圖1A、B)細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整、清晰，未見(jiàn)壞死。

4卵巢組織病理評(píng)分實(shí)驗(yàn)組左側(cè)卵巢vs右側(cè)卵巢24h(5.23±1.20)vs(0.65±0.51)，P<0.05；48h(7.81±1.29)vs(0.59±0.42)，P<0.01；72h(7.49±1.43)vs(0.67±0.61)，P<0.01；96h(8.37±1.19)vs(0.73±0.61)，P<0.01。而假手術(shù)組左側(cè)卵巢與實(shí)驗(yàn)組右側(cè)卵巢相比無(wú)明顯變化(P>0.05)。

5iNOS在兔卵巢組織中的表達(dá)實(shí)驗(yàn)組卵巢均有iNOS程度不等表達(dá)，隨時(shí)間進(jìn)展，72h組表達(dá)達(dá)高峰，96h下降。見(jiàn)表2。

討論

附件扭轉(zhuǎn)(AT)是婦科急診手術(shù)第五大常見(jiàn)病因，發(fā)病率為2.7%[5]。附件扭轉(zhuǎn)多發(fā)生于青春期女孩及育齡婦女，且扭轉(zhuǎn)的卵巢病變往往為良性，甚至扭轉(zhuǎn)的卵巢本身并無(wú)病變，手術(shù)切除造成器官及相應(yīng)功能損失是令人遺憾的。附件扭轉(zhuǎn)對(duì)卵巢形態(tài)學(xué)影響，AT發(fā)生后卵巢靜脈內(nèi)血液回流首先受阻，卵巢靜脈內(nèi)易形成血栓。有研究表明附件缺血-出血性的藍(lán)黑色外觀是靜脈、淋巴瘀滯的結(jié)果而不是壞疽[3]，扭轉(zhuǎn)附件的顏色、大小、水腫程度通常并不能反映卵巢組織真實(shí)的損傷情況，因此附件扭轉(zhuǎn)后如何判斷卵巢是否能夠有效保留一直是人們研究的焦點(diǎn)。有研究表明[6-7]卵巢充血是繼靜脈瘀滯后造成

附件缺血壞死外觀的第二個(gè)原因。本實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)組顯示附件扭轉(zhuǎn)發(fā)生后卵巢的顏色與各自缺血時(shí)間呈逐漸遞增關(guān)系，72h損傷達(dá)高峰，組織病理學(xué)評(píng)分最高。而假手術(shù)組及右側(cè)卵巢標(biāo)本細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整、清晰，僅個(gè)別見(jiàn)輕度水腫及少量炎性反應(yīng)，卵巢隨著扭轉(zhuǎn)時(shí)間延長(zhǎng)光鏡下見(jiàn)組織內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)損壞和局灶性壞死增多，表明附件扭轉(zhuǎn)后卵巢的形態(tài)學(xué)改變具有時(shí)間依從性。

iNOS蛋白在組織中的表達(dá)，一氧化氮(nitricoxide，NO)作為第二信使和神經(jīng)遞質(zhì)，是細(xì)胞間信息傳遞的主要調(diào)節(jié)因子，也是介導(dǎo)細(xì)胞免疫和細(xì)胞毒性反應(yīng)的主要物質(zhì)，參與機(jī)體多種生理和病理過(guò)程。內(nèi)源性一氧化氮是由一氧化氮合成酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)催化L-精氨酸胍基末端上的氮氧化而成。人體內(nèi)有3種不同形式的同工酶即神經(jīng)型NOS(nNOS)、內(nèi)皮型NOS(eNOS)和誘導(dǎo)型NOS(iNOS)，誘導(dǎo)型NOS(iNOS)在創(chuàng)傷、休克等病理狀態(tài)下表達(dá)明顯增高，以致NO過(guò)量生成，可與超氧陰離子反應(yīng)生成更具氧化活性的過(guò)氧亞硝酸鹽，加劇組織灌注障礙和損傷。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)卵巢扭轉(zhuǎn)發(fā)生時(shí)iNOS蛋白在組織中的表達(dá)水平呈顯著性升高，AT組卵巢均有iNOS程度不等表達(dá)，隨時(shí)間進(jìn)展，72h組表達(dá)達(dá)高峰，96h下降。這表明兔附件扭轉(zhuǎn)后造成卵巢缺血，卵巢組織產(chǎn)生了脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，因此導(dǎo)致了氧化性損傷，其變化與扭轉(zhuǎn)時(shí)間有關(guān)，且與扭轉(zhuǎn)后卵巢局部病理組織變化一致。綜合兔附件扭轉(zhuǎn)后卵巢的肉眼所見(jiàn)、病理組織學(xué)觀察和iNOS在兔卵巢組織中的表達(dá)初步認(rèn)為附件扭轉(zhuǎn)72h后卵巢發(fā)生不可逆改變、再灌注損傷加劇，是臨床處理附件扭轉(zhuǎn)并保留卵巢的時(shí)間臨界點(diǎn)。