細(xì)胞生物學(xué)論文范文

前言：我們精心挑選了數(shù)篇優(yōu)質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)論文文章，供您閱讀參考。期待這些文章能為您帶來啟發(fā)，助您在寫作的道路上更上一層樓。

第1篇

RT-PCR檢測耐藥相關(guān)基因MDR1、BCL2L1、LRP、PRKCA的表達(dá)取對數(shù)生長期細(xì)胞，TRIzol試劑提取細(xì)胞總RNA，反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA，SYBYGreen方法進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)。引物設(shè)計(jì)由Invitrogen公司合成，見表1。PCR反應(yīng)體系：cDNA1μl，2×SYBRGreenPCRMastermix12μl，引物F/R（上下游引物的終濃度各為15pmol/μl）各0.3μl，DEPC水11.4μl，共25μl。PCR循環(huán)設(shè)置：50℃2min95℃10min（95℃15s60℃1min）×40個(gè)循環(huán)（生成擴(kuò)增曲線）95℃15s60℃15s95℃15s（生成溶解曲線）。SDS2.2軟件分析處理數(shù)據(jù)，管家基因校正目的基因的表達(dá)，得到相對定量結(jié)果。1.6耐藥細(xì)胞的保存耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX30分別凍存于含0、10、30nmol/L紫杉醇藥物的凍存液里。于凍存后1、3、6月分別復(fù)蘇細(xì)胞，觀察復(fù)蘇情況，MTT法檢測IC50。1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對有關(guān)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)（independentsamplet-test）、單因素方差分析（OnewayANOVA），P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2、結(jié)果

2.1耐藥細(xì)胞的建立

SKOV3經(jīng)300μg/ml大劑量的紫杉醇作用2h后,大部分細(xì)胞死亡漂浮，剩余細(xì)胞腫脹，伸出樹枝狀突起呈蜘蛛狀，胞質(zhì)見空泡形成、顆粒增多。少量存活的細(xì)胞克隆生長，恢復(fù)生長至對數(shù)期消化傳代，再進(jìn)行下一次沖擊；SKOV3經(jīng)10~30nmol/L小劑量的紫杉醇作用24h，約50%的細(xì)胞死亡，細(xì)胞體積增大，形態(tài)不規(guī)則，胞質(zhì)內(nèi)顆粒增多，貼壁性變?nèi)酰o藥24~72h內(nèi)最明顯，96~120h后逐漸恢復(fù)原狀。經(jīng)兩種誘導(dǎo)方法獲得的耐藥細(xì)胞系，分別命名為SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30。

2.2耐藥細(xì)胞的生物特性

2.2.1耐藥指數(shù)MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，耐藥細(xì)胞及其敏感細(xì)胞的IC50值及耐藥指數(shù)，可見小劑量濃度遞增誘導(dǎo)的耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX30耐藥性較強(qiáng)，見表2。2.2.2平板克隆形成實(shí)驗(yàn)在無藥物作用時(shí)，SKOV3敏感細(xì)胞較兩種耐藥細(xì)胞系的克隆形成能力強(qiáng)，見圖1A的d組，SKOV3敏感細(xì)胞的克隆形成數(shù)為（934±16.37），SKOV3/TAX300的克隆形成數(shù)為（440±13.75）,SKOV3/TAX30的克隆形成數(shù)為（579±9.50）。與敏感細(xì)胞SKOV3相比，兩種耐藥細(xì)胞克隆形成數(shù)少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均=0.000），見圖1B。而在相同濃度紫杉醇作用下，耐藥細(xì)胞形成的克隆明顯多于敏感細(xì)胞。在紫杉醇濃度為5nM時(shí)，SKOV3/TAX30可形成（1206±9.50）個(gè)克隆，SKOV3/TAX300可形成（870±32.30）個(gè)克隆，而SKOV3形成的克隆數(shù)僅（202±6.08），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均=0.000）；當(dāng)紫杉醇濃度進(jìn)一步升高為50nM和500nM時(shí)，SKOV3/TAX30和SKOV3/TAX300形成的克隆數(shù)仍明顯高于敏感細(xì)胞SKOV3。紫杉醇濃度為50nM時(shí)，SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX300細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.013）,SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX30細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）；紫杉醇濃度為500nmol/L時(shí)，SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.009、0.0001），見圖1B。2.2.3生長曲線倍增時(shí)間的差異SKOV3敏感細(xì)胞和兩種耐藥細(xì)胞系在相同條件下培養(yǎng)7天，細(xì)胞增殖產(chǎn)生一定的差異。耐藥細(xì)胞的生長較敏感細(xì)胞減慢，生長曲線的斜率減小，見圖2。同時(shí)，根據(jù)生長曲線計(jì)算出SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞的倍增時(shí)間分別為28.90h、24.0h，與敏感細(xì)胞的倍增時(shí)間20.84h相比也有所延長。

2.3耐藥相關(guān)基因

MDR1、BCL2L1、LRP、PRKCA在各細(xì)胞中的表達(dá)MDR1、BCL2L1、LRP、PRKCAmRNA在SKOV3、SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞中的相對表達(dá)豐度見圖3A、3B。兩種耐藥細(xì)胞中，MDR1的表達(dá)明顯增高，提示SKOV3/TAX300、SKOV3/TAX30對紫杉醇的耐藥與MDR1高表達(dá)有關(guān)。SKOV3/TAX300細(xì)胞中PRKCA、LRP的表達(dá)均高于SKOV3細(xì)胞，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.016，P=0.005），BCL2L1的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.815）。而SKOV3/TAX30細(xì)胞的PRKCA、LRP的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.154，P=0.206）。BCL2L1的表達(dá)低于敏感細(xì)胞（P=0.001），見圖3B。以上數(shù)據(jù)表明不同誘導(dǎo)方式導(dǎo)致耐藥細(xì)胞發(fā)生不同生物學(xué)變化，可能存在不同的耐藥機(jī)制。

2.4耐藥細(xì)胞的保存

耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX30分別凍存在含有0、10、30nM紫杉醇的凍存液中，于凍存后1、3、6月復(fù)蘇，檢測IC50，見表3。1、3月后檢測結(jié)果提示，在3種藥物濃度條件下的細(xì)胞IC50沒有明顯區(qū)別，但凍存6月后，無藥凍存組的耐藥細(xì)胞與兩種加藥凍存組的細(xì)胞比較，其IC50明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。同一個(gè)藥物濃度條件下，無藥凍存組的耐藥細(xì)胞在凍存6月時(shí)，出現(xiàn)耐藥性下降，而兩種加藥凍存組細(xì)胞在6月的凍存過程中，細(xì)胞IC50雖然出現(xiàn)輕度下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3、討論

3.1耐藥細(xì)胞的建立

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：增加給藥劑量、適當(dāng)延長無藥間歇期，可能延緩細(xì)胞的耐藥性。由于大劑量沖擊誘導(dǎo)與臨床治療模式相似，臨床上體內(nèi)耐藥指數(shù)≥2倍即足以導(dǎo)致化療失敗[5]，因此大劑量沖擊誘導(dǎo)產(chǎn)生的耐藥細(xì)胞雖然耐藥指數(shù)較低，也是模擬臨床耐藥的良好模型。

3.2耐藥細(xì)胞的特性

本研究的結(jié)果表明：在無藥物作用時(shí)，SKOV3細(xì)胞的集落形成能力強(qiáng)于兩種耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30，但在不同濃度紫杉醇藥物條件下，耐藥性最強(qiáng)的SKOV3/TAX30集落形成能力也最強(qiáng)，而敏感細(xì)胞SKOV3的集落形成能力最弱，此結(jié)果與MTT法檢測的耐藥性一致。紫杉醇的作用機(jī)制是促進(jìn)微管蛋白二聚體裝配成微管，抑制紡錘體形成，將細(xì)胞阻斷于G2/M期，細(xì)胞的有絲分裂異常或停止，使多核細(xì)胞的形成增多[6]。誘導(dǎo)的過程中耐藥細(xì)胞膨脹、形態(tài)不規(guī)則、細(xì)胞體積的增大可能與細(xì)胞群體中多核細(xì)胞的增多有關(guān)。本研究的生長曲線實(shí)驗(yàn)中，SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30的倍增時(shí)間分別為28.9、24.0h，與敏感細(xì)胞SKOV3的倍增時(shí)間20.84h相比有明顯延長，顯示耐紫杉醇的卵巢癌細(xì)胞生長速度減慢。細(xì)胞周期的阻滯，除導(dǎo)致一些細(xì)胞周期特異性藥物失效外，腫瘤細(xì)胞處于相對靜止?fàn)顟B(tài)，易對化療藥物產(chǎn)生耐受。

3.3耐藥相關(guān)基因的檢測

卵巢癌紫杉醇耐藥機(jī)制的研究中，多藥耐藥（multidrugresistance，MDR）一直是熱點(diǎn)。多藥耐藥是指對一種藥物具有耐藥性的同時(shí)，也對其他結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制完全不同的化療藥物產(chǎn)生交叉耐受的一種現(xiàn)象。多藥耐藥的產(chǎn)生是一個(gè)多因素的過程，主要包括：（1）細(xì)胞內(nèi)有效藥物濃度的降低；（2）細(xì)胞內(nèi)藥物活性的改變；（3）凋亡的抑制；（4）腫瘤細(xì)胞微環(huán)境改變化療敏感度。P-gp是多藥耐藥基因MDR1編碼的相對分子質(zhì)量為17kD的一種跨膜糖蛋白，其功能是使細(xì)胞內(nèi)藥物濃度降低，藥物的作用減弱或喪失，細(xì)胞由此獲得耐藥性。與大多數(shù)其他化療藥物的多藥耐藥機(jī)制相似，紫杉醇作為P-gp的作用底物之一，其耐藥機(jī)制與MDR1基因擴(kuò)增導(dǎo)致的P-gP高表達(dá)密切相關(guān)[7-8]。肺耐藥相關(guān)蛋白LRP是在多藥耐藥的肺癌細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)的與MDR相關(guān)的非糖蛋白，相對分子質(zhì)量為110kD，能阻止藥物通過核孔進(jìn)入細(xì)胞核，避免其作用于核內(nèi)靶點(diǎn)，藥物運(yùn)送到胞質(zhì)的囊泡中，再通過胞吐作用將藥物排出體外，從而發(fā)生紫杉類藥物耐藥[9-10]。凋亡抑制基因也參于紫杉醇耐藥。BCL2L1基因，全稱為BCL-2樣1基因（BCL-2-like1）,編碼蛋白屬于BCL-2蛋白家族，BCL-2蛋白家族通過抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致耐藥性[11-12]。PRKCA基因?yàn)榈鞍准っ窩α（proteinkinaseCalpha），也被稱為PKCA、PRKACA、KPCA、AAG6。細(xì)胞過度增殖和抗細(xì)胞凋亡機(jī)制障礙都可導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展和耐藥現(xiàn)象發(fā)生[13]。另外PKC的作用是使底物蛋白磷酸化而活化，p-gp是PKC的作用底物，當(dāng)其表達(dá)增加或活性增強(qiáng)時(shí)，可使大量的P-gp磷酸化而活化，從而產(chǎn)生耐藥性。本研究結(jié)果提示。SKOV3/TAX300細(xì)胞PRKCA、LRP的表達(dá)均略高于敏感細(xì)胞。但SKOV3/TAX30細(xì)胞的PRKCA、LRP的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BCL2L1在SKOV3/TAX30細(xì)胞的表達(dá)低于敏感細(xì)胞，但SKOV3/TAX300細(xì)胞中BCL2L1的表達(dá)略高于敏感細(xì)胞，結(jié)果提示不同方式誘導(dǎo)的耐藥細(xì)胞，可能存在不同的耐藥機(jī)制。

3.4耐藥細(xì)胞的保存

第2篇

1．1組織塊貼壁法分離培養(yǎng)hUC-MSCs臍帶取自正常分娩的新生兒(征得其父母同意)。首先用含雙抗的磷酸鹽緩沖液(PBS)浸洗臍帶3次，去除雜物;用無菌的手術(shù)剪刀將臍帶剪成3～4cm的節(jié)段，再沿長度方向剪開，以暴露臍帶膠質(zhì)部分，去除血管;置于含雙抗的PBS中清洗3次，去除血污，再剪成約0．5cm3的組織塊，以膠質(zhì)部分貼于基底平鋪于24孔板中，每孔2～3塊，置于37℃、體積分?jǐn)?shù)5%CO2培養(yǎng)箱孵育1～2h;待組織塊自然粘附于皿底部后加入含雙抗、FBS的低糖DMEM培養(yǎng)基，繼續(xù)置于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，每3d更換一次培養(yǎng)基，待觀察到有小三角形或梭形細(xì)胞從組織中鋪展出時(shí)，取出組織塊。整個(gè)分離過程注意無菌操作。待細(xì)胞生長至70%～80%匯合時(shí)，即可傳代。利用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)。取第5代細(xì)胞，采用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)鑒定hUC-MSCs的表面標(biāo)記物CD44。

1．2肝細(xì)胞標(biāo)志基因的檢測按照總RNA提取試劑盒的操作說明分別提取hUC-MSCs和人肝癌細(xì)胞HepG2的總RNA，用RNase-FreeDNaseⅠ去除基因組，最后檢測RNA的濃度和純度，立即進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA或保存于－80℃?zhèn)溆谩２捎肞rime-ScriptTMⅡHighFidelityRT-PCR試劑盒反轉(zhuǎn)錄2μgRNA得cDNA，取2μL用于PCR。根據(jù)GenBank提供的人肝細(xì)胞標(biāo)志基因序列，使用PrimerPremier5．0軟件設(shè)計(jì)引物，引物序列和產(chǎn)物大小見表1。GAPDH為內(nèi)參對照。PCR反應(yīng)條件:94℃預(yù)變性5min;94℃變性30s，56℃退火45s，72℃延伸30s，30個(gè)循環(huán);最后72℃延伸5min。PCR產(chǎn)物用20g/L的瓊脂糖凝膠電泳，在凝膠分析系統(tǒng)下拍照。

1．3PAS糖原染色按照PAS染色試劑盒的說明書操作，對第5代hUC-MSCs和HepG2進(jìn)行糖原染色，在倒置相差顯微鏡下觀察并照相。

2結(jié)果

2．1hUC-MSCs的分離、培養(yǎng)、傳代及鑒定組織塊貼壁培養(yǎng)3～4d時(shí)，可觀察到組織塊間隙鋪展出小三角形或長梭形的細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)至7d左右，可觀察到局部細(xì)胞呈集落生長，此時(shí)，在無菌條件下取出組織塊，更換新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)1周左右，細(xì)胞可達(dá)80%～90%匯合，即可傳代。用胰酶/EDTA消化后細(xì)胞呈亮而圓的單個(gè)分散狀，以1∶3的比例進(jìn)行傳代，約4h貼壁，2d后迅速生長。倒置相差顯微鏡下可觀察到細(xì)胞較大，輪廓清楚，內(nèi)部有清晰的應(yīng)力纖維，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯，呈典型的成纖維細(xì)胞樣形態(tài)(圖1A);持續(xù)培養(yǎng)大約2周時(shí)，細(xì)胞基本達(dá)到完全匯合，形態(tài)發(fā)生一定的變化，胞質(zhì)變得狹窄，內(nèi)部的應(yīng)力纖維也不明顯，呈平行排列或漩渦生長(圖1B)。連續(xù)多次傳代，細(xì)胞保持穩(wěn)定的、相對均一的成纖維細(xì)胞樣形態(tài)以及較強(qiáng)的增殖能力。經(jīng)鑒定分離培養(yǎng)的細(xì)胞CD44呈陽性表達(dá)，且具有良好的均質(zhì)性。

2．2肝細(xì)胞標(biāo)志基因的表達(dá)以HepG2作為陽性對照，用RT-PCR檢測hUC-MSCs的肝細(xì)胞標(biāo)志基因的表達(dá)情況，結(jié)果見圖2，hUC-MSCs表達(dá)ALB、CK18、G6P、GLUL和MET，不表達(dá)TAT。

2．3PAS糖原染色結(jié)果對hUC-MSCs和HepG2進(jìn)行PAS糖原染色，染色結(jié)果顯示兩種細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中均有紫色顆粒物形成，即均呈糖原陽性反應(yīng)(圖3)。

3討論

MSCs能分泌多種細(xì)胞因子和生長因子，具有直接或間接的抗炎及抗纖維化作用，可抑制肝細(xì)胞的死亡和纖維化;還可通過其分泌物抑制肝細(xì)胞的凋亡、刺激肝細(xì)胞再生、為受損肝細(xì)胞提供營養(yǎng)支持等。MSCs還具有低免疫原性及免疫抑制力，適用于進(jìn)行同種異體移植，在移植后可遷移、歸巢至受損的組織，發(fā)揮治療作用。因此，MSCs在肝臟疾病的細(xì)胞移植治療中具有廣闊的應(yīng)用前景。研究發(fā)現(xiàn)，相較不同來源的MSCs，臍帶來源的MSCs不僅具有干細(xì)胞的特性，而且來源豐富、取材方便、增殖能力較強(qiáng)、無倫理法律限制，還具有較低的免疫原性和分化程度，從而成為一個(gè)非常有吸引力的移植治療肝病的細(xì)胞來源。

作者采用組織塊貼壁培養(yǎng)法從臍帶基質(zhì)中分離獲得hUC-MSCs，與酶消化法和流式細(xì)胞儀或免疫磁珠分選法相比，該分離方法操作簡單，消耗低，易于控制。分離培養(yǎng)的hUC-MSCs呈典型的成纖維細(xì)胞樣形態(tài)，具有MSCs的表型特征，均質(zhì)性良好，且在體外長期培養(yǎng)中能保持穩(wěn)定狀態(tài)。進(jìn)一步的RT-PCR結(jié)果顯示，培養(yǎng)的hUC-MSCs同時(shí)表達(dá)成熟肝細(xì)胞的標(biāo)志基因ALB、CK18、G6P、GLUL和MET，而不表達(dá)TAT，與Campard等的研究結(jié)果一致，提示hUC-MSCs可能具有肝細(xì)胞的一些相關(guān)功能，如合成白蛋白、合成糖原及解毒功能等;PAS糖原染色結(jié)果則證明hUC-MSCs具有糖原合成和儲(chǔ)存能力。

第3篇

 

經(jīng)濟(jì)的迅猛發(fā)展帶動(dòng)科技的日新月異，網(wǎng)絡(luò)技術(shù)與通信技術(shù)發(fā)展迅速，微信、微博等交流媒介成為大眾知識共享的傳播平臺，而微課作為教學(xué)中的創(chuàng)新也備受關(guān)注，作為對傳統(tǒng)教學(xué)模式的顛覆，其更注重教學(xué)效率的提升與教學(xué)質(zhì)量的理想化。伴隨移動(dòng)學(xué)習(xí)時(shí)代的到來，微課使得當(dāng)前學(xué)校教育及社會(huì)教育都發(fā)生了顯著的變化。但是我們應(yīng)該看到，時(shí)代催生的網(wǎng)絡(luò)視頻也帶有某種弊端性，難以真實(shí)有效地滿足各個(gè)層面的學(xué)習(xí)需求[1]。焦建利教授提出：傳統(tǒng)的課堂實(shí)錄視頻資源已經(jīng)難以實(shí)現(xiàn)互聯(lián)網(wǎng)時(shí)代人們注意力模式的匹配，因此傳統(tǒng)的教學(xué)方式也很難滿足師生教與學(xué)的需求。

 

加上網(wǎng)速及寬帶的硬性限制，教學(xué)資源周轉(zhuǎn)率低，優(yōu)秀教育教學(xué)資源被無形浪費(fèi)。基于這樣的背景，微課誕生，吸取了傳統(tǒng)教學(xué)視頻的弊端教訓(xùn)，更注重主題的突出明確，更具有針對性與服務(wù)性，在內(nèi)容設(shè)置上也趨于短小精悍，實(shí)現(xiàn)了自由補(bǔ)充與延伸[2]。對于生物細(xì)胞學(xué)科教學(xué)來說，實(shí)驗(yàn)是教學(xué)的關(guān)鍵，在教學(xué)中發(fā)揮著重要的作用。不可否認(rèn)的是生物學(xué)作為生命科學(xué)的前沿學(xué)科之一，無論是實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法還是理論知識闡述都實(shí)現(xiàn)了深度的提升與廣度的延伸，逐漸實(shí)現(xiàn)與遺傳學(xué)、分子生物學(xué)及發(fā)育生物學(xué)的學(xué)科融合，逐漸在生命科學(xué)研究領(lǐng)域占據(jù)主導(dǎo)[3]。因此，實(shí)現(xiàn)微課與細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的結(jié)合，對學(xué)生創(chuàng)新能力與獨(dú)立思考能力的培養(yǎng)逐漸成為生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)關(guān)注的焦點(diǎn)，成為細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的要?jiǎng)?wù)。

一、微課簡述

 

1.微課的起源。微課最早由美國愛荷華大學(xué)LeRoy A. McGrew教授提出，初衷是針對化學(xué)課程總結(jié)的60秒概述，設(shè)置了三大主體部分，分別為總體介紹、解釋說明及舉例分析。后來英國學(xué)者T.P.Kee在此基礎(chǔ)上提出了一分鐘演講，所謂的一分鐘演講就是突出演講的精練傳神，要求具有縝密的邏輯結(jié)構(gòu)及真實(shí)生動(dòng)的案例闡述。在經(jīng)過上述兩個(gè)階段的發(fā)展后，微課由美國新墨西哥州圣湖安學(xué)院大衛(wèi).m.彭羅斯提出并創(chuàng)建實(shí)施。其包括15到30秒的介紹及結(jié)論，服務(wù)與上文的關(guān)鍵概念導(dǎo)引。然后錄制上述內(nèi)容并限制時(shí)間為3分鐘內(nèi)，在微課程指引下提出書面作業(yè)要求，學(xué)會(huì)借助課外閱讀或者實(shí)踐活動(dòng)完成關(guān)鍵知識的學(xué)習(xí)。目前最具代表性的當(dāng)屬Educause的微課理念，不是指微觀學(xué)習(xí)中的微內(nèi)容，而是以建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論為支撐的在線教學(xué)或格式化教學(xué)中的教學(xué)實(shí)際。

 

2.我國微課發(fā)展現(xiàn)狀。我國微課依然是新興事物，起步晚，發(fā)展相對緩慢，目前涉及領(lǐng)域也有部分處于空白。基于微課的發(fā)展現(xiàn)狀，當(dāng)前學(xué)術(shù)界也未就微課理念達(dá)成共識。學(xué)者焦建利[4]認(rèn)為，微課是對某一知識點(diǎn)的集中闡釋，主要特點(diǎn)就是短小精悍，在線教學(xué)視頻是其主要表現(xiàn)形式。學(xué)者祝智庭[5]則認(rèn)為微課應(yīng)該就某個(gè)教學(xué)主題展開延伸，組織精細(xì)化的課堂教學(xué)設(shè)計(jì)，時(shí)間限度最好控制在10分鐘以內(nèi)。而學(xué)者胡鐵生[6]則認(rèn)為微課程注重的是視頻的微小，因此在針對單一學(xué)科或者單一知識點(diǎn)組織教學(xué)時(shí)應(yīng)注重教學(xué)情景的融入，突出在線學(xué)習(xí)與自由學(xué)習(xí)。這一概念也逐漸被大眾所認(rèn)可。資源建設(shè)方面，我國微課也尚未成型，目前的應(yīng)用研究還相對零散，評價(jià)模式也有待完善。實(shí)現(xiàn)微課程的規(guī)范化發(fā)展還有很長的路要走。

 

二、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)存在的問題

 

1.內(nèi)容更新緩慢，亟待加強(qiáng)。我國的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)一直處于教學(xué)滯后階段，僅僅作為理論教學(xué)的補(bǔ)充或者教學(xué)附屬而開設(shè)，缺乏關(guān)注上必然影響教學(xué)的創(chuàng)新與跟進(jìn)，加上該實(shí)驗(yàn)教學(xué)項(xiàng)目單一化趨勢嚴(yán)重，時(shí)代氣息不足，技術(shù)手段及知識的綜合運(yùn)用十分缺乏，內(nèi)容更新十分滯后。

 

2.教學(xué)方式單一化，學(xué)生自主性不足。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本流程就是提前由教師準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)試劑，學(xué)生在教師的示范引導(dǎo)下按部就班地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，整個(gè)操作過程趨于程式化、簡單化。學(xué)生不僅無法在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段有所參與，更挫傷了學(xué)生創(chuàng)新與研究的積極性。

 

3.教學(xué)方法貧乏，缺乏對學(xué)生創(chuàng)新能力培養(yǎng)的關(guān)注。傳統(tǒng)的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)受有限的教學(xué)時(shí)間的限制，因此實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與要求也大多提前限定，教師單純地演示講解，學(xué)生被動(dòng)地參與學(xué)習(xí)，雙方互動(dòng)交流不足，教師也無法引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新。

 

4.教學(xué)技術(shù)陳舊，現(xiàn)代教育技術(shù)參與較少。細(xì)胞生物學(xué)作為生物教學(xué)的前沿學(xué)科，理應(yīng)注重教學(xué)的創(chuàng)新，特別是積極加入現(xiàn)代教育技術(shù)的創(chuàng)新元素，以信息技術(shù)為核心推動(dòng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)。但是我國細(xì)胞生物學(xué)的教學(xué)現(xiàn)狀卻是現(xiàn)代教育技術(shù)十分欠缺，傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)維度單一化趨勢嚴(yán)重。

 

三、微課在細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中如何應(yīng)用

 

1.微課的特性和優(yōu)勢，傳統(tǒng)多媒體教學(xué)的弊端：伴隨多媒體技術(shù)的迅猛發(fā)展及教學(xué)融入，部分教師開始嘗試運(yùn)用多媒體輔助教學(xué)，但是當(dāng)代大學(xué)生自由散漫的個(gè)性也成為多媒體輔助教學(xué)實(shí)施的制約因素，學(xué)生難以集中精力聽取教師講課，精品的視頻資源難以得到高效率的運(yùn)用。應(yīng)用于課后學(xué)習(xí)的視頻資料也難以受到學(xué)生的關(guān)注與重視，多數(shù)處于閑置。微課則突破了視頻教學(xué)的局限，具有普通視頻教學(xué)資源不具備的教學(xué)優(yōu)勢。首先，其教學(xué)內(nèi)容濃縮，教學(xué)時(shí)間較短，借助移動(dòng)端操作更為便捷，學(xué)生學(xué)習(xí)積極性顯著提升。其次，其教學(xué)主題十分明確，學(xué)生能夠迅速找到自己感興趣的點(diǎn)，從而獲得啟發(fā)教育或者延伸學(xué)習(xí)。最后，微課視頻的教學(xué)容量相對較小，符合學(xué)生的接受能力，學(xué)生更積極主動(dòng)地參與到微課學(xué)習(xí)中去。

 

2.細(xì)胞生物學(xué)微課設(shè)計(jì)，把握10分鐘原則：注意力10分鐘。10分鐘內(nèi)有明確的教學(xué)目標(biāo)，內(nèi)容短小，集中說明一個(gè)問題的小課程。微課設(shè)計(jì)ADDIE模型：A，分析;D，設(shè)計(jì);D制作;I應(yīng)用;E，評價(jià)。通常來說，微課設(shè)計(jì)要想保證自身的完整性必須具備6個(gè)基本環(huán)節(jié)，分別為教學(xué)主題的明確、前段分析、微課基礎(chǔ)知識點(diǎn)的切割與劃分、微課資源要素的重點(diǎn)設(shè)計(jì)、微課視頻錄制及后期加工處理、微課的最終終端輸出與展現(xiàn)。6個(gè)環(huán)節(jié)緊緊相扣，推動(dòng)微課的高效開展。

 

四、微課引入實(shí)驗(yàn)教學(xué)的意義與應(yīng)用前景

 

微課具有廣闊的教育應(yīng)用前景。2011年，手機(jī)將取代個(gè)人電腦成為個(gè)人信息中心。學(xué)生自帶設(shè)備BYOD，包括個(gè)人電腦、手機(jī)、上網(wǎng)本、平板等越來越普遍化。這為微課的實(shí)施提供了必備的硬件前提。調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，84.44%的被調(diào)查者認(rèn)可微視頻在微課教學(xué)中的核心地位與作用，并且70%以上的人認(rèn)為配套的教學(xué)設(shè)計(jì)與課件也是不可忽視的部分。縱觀當(dāng)前的教育改革，多數(shù)一線教師已經(jīng)充分認(rèn)識到微課教學(xué)的魅力與優(yōu)勢，開始在課堂教學(xué)中嘗試微課教學(xué)。其中范福蘭等人在基于交互式微視頻教學(xué)資源教學(xué)應(yīng)用效果的調(diào)查顯示，70.5%的學(xué)生認(rèn)為交互式微視頻資源能夠激發(fā)他們對課程學(xué)習(xí)的興趣，單一的圖文及音視頻資源則受關(guān)注度一般，這也從側(cè)面說明隨著流媒體技術(shù)的發(fā)展成熟，微視頻的教學(xué)前景將是廣闊而光明的。

 

五、一些值得思考的問題

 

1.有關(guān)微課適用性，微課程在全國范圍內(nèi)展開，帶來教學(xué)思想、教學(xué)模式的重大轉(zhuǎn)變，各個(gè)領(lǐng)域、各種培訓(xùn)、不同學(xué)科對于微課程應(yīng)用的嘗試存在“泛用”、“濫用”現(xiàn)象。微課程適用于哪些領(lǐng)域、哪些課程、哪些內(nèi)容以及熒光怎樣設(shè)計(jì)、怎樣制作、怎樣使用才是最科學(xué)合理的成為今后科學(xué)研究的新課題。

 

2.細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)微課應(yīng)用存在問題，我國針對該專業(yè)的微課理論研究及實(shí)踐演練依然不足，多數(shù)高校在微課開展實(shí)施的過程中存在建多用少的資源浪費(fèi)現(xiàn)象。因此必須將微課作為校本研修資源，對其加強(qiáng)引導(dǎo)宣傳，讓教師認(rèn)可微視頻教學(xué)的優(yōu)勢并拓展專業(yè)發(fā)展的新途徑。此外微課程應(yīng)奠定創(chuàng)新型教學(xué)模式的資源基礎(chǔ)，以期為學(xué)生提供更實(shí)用的教學(xué)資源，做好教學(xué)輔助。當(dāng)然微課作為新興教學(xué)理念，應(yīng)該在移動(dòng)學(xué)習(xí)與泛在學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)教學(xué)需求與教學(xué)實(shí)踐的同步發(fā)展，最大限度提升微課程的開展利用率。

 

六、總結(jié)

 

微課作為新興的教學(xué)模式理應(yīng)受到關(guān)注，了解微課的本質(zhì)內(nèi)涵，在梳理其優(yōu)勢與缺陷基礎(chǔ)上綜合當(dāng)前的運(yùn)用實(shí)際，科學(xué)預(yù)測并規(guī)劃后期發(fā)展，實(shí)現(xiàn)微課在設(shè)計(jì)開發(fā)與應(yīng)用上的創(chuàng)新完善。本文就微課教學(xué)的幾點(diǎn)問題進(jìn)行了歸納分析，以期為微課教學(xué)的拓展應(yīng)用提供有效思路，讓微課的魅力更多地展現(xiàn)出來，服務(wù)于高校教學(xué)。