檢驗醫學中膠體金免疫結合試驗的應用范文
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[摘要]目的探究膠體金免疫結合試驗在檢驗醫學領域的價值與應用。方法從2018年1月—2019年1月該院收治的相關疾病患者進行隨機抽取，共600例患者進行研究，使用膠體金免疫結合分為GICA(金免疫層析試驗)和GIFA(金免疫滲濾試驗)，通過不同的疾病類型選擇不同類型試驗，在幾種不同類型的疾病（細菌性疾病，真菌性疾病，病毒疾病等）中使用膠體金免疫結合試驗，分析其在不同類型疾病中的檢驗結果以及檢測準確性。結果膠體金免疫檢測的兩種病毒性疾病（柯薩奇病毒和流行性出血抗體）靈敏度分別為96.37%和98.15%，檢測符合率為95.0%和96.5%，檢測準確率高。該試驗檢測寄生蟲疾病靈敏度略高于滲透法，靈敏度分別為98.00%和100.0%，但兩種檢測方法間差異無統計學意義（P＞0.05）；膠體金免疫結合試驗在該次檢測的疾病中靈敏度均高于95%（除梅毒，靈敏度78%），特異性多為60%~70%，靈敏度檢測效果好。結論膠體金免疫結合試驗在檢驗醫學中對各類疾病的檢驗有明顯的效果，可以給部分疾病的診斷提供重要信息，提供更加有效的治療方案。但該試驗特異性較低，有待改進。
膠體金免疫結合試驗是固相標記免疫測定技術，用于檢測疾病，其檢驗的基礎是酶免疫結合試驗，這種技術的優勢較為明顯，比如操作簡便、得出結果的時間較短等優點，在檢測過程中不需任何的儀器設備進行輔助，短短幾分鐘就可以測定出結果，在臨床醫學中，這是應用相對廣泛的一種疾病檢測技術[1]。為了探究膠體金免疫結合試驗在檢驗醫學中的應用價值，將該項技術在不同的疾病檢驗中進行應用，研究其在檢驗醫學領域的可行性[2]。從2018年1月—2019年1月該院收治的共600例患者進行隨機抽取患者進行研究，現報道如下。
1對象與方法
1.1研究對象
選取病毒性、細菌性及寄生蟲疾病案例進行檢測，選取結果從中隨機抽取病例進行檢測，共600例患者。1.2方法膠體金免疫結合試驗技術主要根據以下流程進行疾病檢測的檢測：把微孔濾膜作為檢測的載體，并且把已知的抗體或者抗原進行包被，然后把需要檢測的標本按順序依次加入微孔濾膜中，由于濾膜的毛細管作用，濾膜上所包被的抗體或者抗原就會待測標本中的抗體或抗原進行充分的結合，最后，經過膠體金結合物以達到檢測標本的目的[3-5]。通過不同的檢驗裝置可以把膠體金免疫結合分為GICA(金免疫層析試驗)和GIFA(金免疫滲濾試驗)。
1.3評判標準
觀察各類疾病檢測的靈敏度以及特異性，通過數據體現使用檢測方法的好壞。
2結果
2.1膠體金免疫結合試驗對病毒性疾病的檢驗結果
2.1.1柯薩奇病毒的檢測柯薩奇病毒可以誘發許多種類的疾病，為了能夠對快速的檢測柯薩奇病毒因而研制了IgM抗體膠體金免疫層析診斷試紙條，該次試驗檢測了84份血清樣本，把逆轉錄PCR技術作為評判的標準，膠體金免疫結合試驗的特異性為67.16%，靈敏度為96.37%。見表1。
2.1.2流行性出血熱抗體的檢測在流行性出血熱抗體的膠體金免疫結合試驗檢測中，選取94份流行性出血熱患者的血清作為樣本，使用膠體金免疫試劑盒進行檢測，結果陽性94份，檢測靈敏度為98.15%，見表1；接著對健康人的血清54份，54份血清檢測結果全部為陰性；膠體金免疫試劑盒檢測乙肝、鉤體病以及其他出血性疾病共230份血清，檢測結果全部為陰性[6-8]。對腎綜合癥出血熱患者的50份血清進行檢測，該疾病由漢坦病毒引起，使用膠體金免疫滲透法對抗漢坦病毒IgM抗體，18份病程在3d之內，有16份表現為陽性，剩下的32份病程在4d以及4d以上全部表現為陽性[9]。
2.1.3艾滋病抗體的檢測該次試驗對18家申報注冊艾滋病抗體快速檢測試劑進行檢測，對強陽性的400份樣本檢測靈敏度都是100%；對340份健康血樣的檢測中，特異性在96.56%~100.00%，在300份高危人群的血樣檢測中，所有試劑的靈敏度在73.53%~95.06%該范圍內，2家特異性為較低，分別為56.73%和58.65%，其余的檢測基本都在94.89%以上。
2.2膠體金免疫結合試驗對寄生蟲病的檢驗結果
關于寄生蟲疾病主要檢測的是血吸蟲，用快速免疫金滲濾法進行血吸蟲抗體的檢測，檢測總靈敏度為97.35%，慢性血吸蟲患者靈敏度為97.73%，急性靈敏度為99.80%，晚期患者的靈敏度為91.50%，血吸蟲非流行區的病人痊愈特異性為95.90%,流行區內的病人痊愈特異性相對較低，為82.8%[10]。快速免疫金滲濾法檢測的靈敏度、特異性和診斷效率與膠體金SEA-dipstick方法十分相似。膠體金SEA-dipstick方法對于慢性血吸蟲患者靈敏度為98.0%，急性患者靈敏度100.0%，見表2。
2.3膠體金免疫結合試驗對細菌性疾病的檢驗結果
2.3.1金黃色葡萄球菌的檢測在金黃色葡萄球菌的檢測中主要采用快速免疫金滲濾法，檢測的最低下限為3.2×106~6.0×106cfu/mL[11]。該次檢驗檢測的20株不產毒素的金黃色葡萄球菌和15株大腸埃希菌，兩種菌體均有一株產生了交叉反應，10株沙門菌和志賀菌，6株腐生菌和鏈球菌都沒有發生交叉反應，見表3。
2.3.2沙門菌的檢測沙門菌的檢測主要采用抗原吸收法，在封閉環境下，讓抗沙門菌與其他的腸道桿菌發生交叉反應，并把標記膠體金溶膠制作成探針狀，接著使用多膜復合的方法把其制作為免疫層析條，制作出來的免疫層析條的靈敏度為11.8×106cfu/mL，檢測108-1011cfu/mL的菌懸液發現并沒有出現鉤狀效應[12-13]，見表3。
2.3.3鼠疫耶爾森菌的檢測鼠疫耶爾森菌的檢測使用快速免疫金滲濾法，鼠疫耶爾森菌具有良好的特性，和小腸結腸耶氏菌在密閉環境下不會發生交叉反應，檢測出的最低檢出限為2.3×105cfu/mL，使用免疫層析法檢測出的鼠疫耶爾森菌靈敏度為1.2×105cfu/mL。見表3。
2.4膠體金免疫結合試驗對其他微生物疾病的檢驗結果
在針對梅毒的檢測試驗中，我國的膠體金試劑盒檢測的梅毒臨床病例靈敏度為73.4%，高于日本富士公司的TPPA試劑和美國的梅毒螺旋體特異性抗體膠體金法。該次檢驗中，使用膠體金免疫結合試驗對紅斑狼瘡患者、孕婦以及其他正常體檢人群的血清進行檢測，其中，紅斑狼瘡患者血清有58例、孕婦血清有30名、正常體檢人群血清有20名，檢測結果均為陰性。
3結論
膠體金免疫結合試驗在檢驗醫學的應用比較廣泛，對于病毒性疾病、細菌性疾病以及寄生蟲類疾病都有較好的效果，柯薩奇病毒、艾滋病抗體以及流行性出血熱抗體的檢測中靈敏度都較高，兩者的檢測靈敏度分別為96.37%和98.15%，但特異性百分比只有67.16%，在病毒性疾病的檢測中特異性需要進一步的改善。在寄生蟲類疾病中，該實驗對于急性血吸蟲患者的靈敏度檢測相對較高，慢性患者其次，晚期患者最低，但檢測靈敏度均高于95.00%，有較好的檢測結果；在梅毒的檢測中，靈敏度僅有73.40%，低于其他疾病靈敏度，但我國的膠體金試劑盒與日本富士公司的TPPA試劑和美國的梅毒螺旋體特異性抗體膠體金法相比，靈敏度都較高。研究表明，膠體金免疫檢測血清心臟型脂肪酸結合蛋白的符合率為95.09%，與該實驗中檢測結果相符，除此，該試驗還可用于結核抗體、破傷風抗體、風疹抗體、結核抗體、結核抗體、流感病毒、衣原體以及登革熱抗體等的檢測，膠體金膠體金免疫結合試驗同時還具備操作簡便、得到結果快速、不需與其它貴重儀器設備配合使用等優點，因此，膠體金免疫結合試驗在檢驗醫學上的應用可以加以推廣，這對于患者在疾病的預防、檢測以及醫生進行治療方面都有積極的作用。綜上所述，膠體金免疫結合試驗是一種新興的具有較好檢測效果的免疫學檢驗方法，比傳統檢驗方法更加利于操作、速度更快。但是該方法還具一定的局限性，靈敏度與檢出率也需要繼續完善，更好地確保膠體金免疫結合試驗在醫學檢驗中的應用效果。
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作者：張志宏 趙梅 謝斌 單位：山東省滕州市中心人民醫院檢驗科
