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[摘要]目的探究膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的價(jià)值與應(yīng)用。方法從2018年1月—2019年1月該院收治的相關(guān)疾病患者進(jìn)行隨機(jī)抽取,共600例患者進(jìn)行研究,使用膠體金免疫結(jié)合分為GICA(金免疫層析試驗(yàn))和GIFA(金免疫滲濾試驗(yàn)),通過(guò)不同的疾病類(lèi)型選擇不同類(lèi)型試驗(yàn),在幾種不同類(lèi)型的疾病(細(xì)菌性疾病,真菌性疾病,病毒疾病等)中使用膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn),分析其在不同類(lèi)型疾病中的檢驗(yàn)結(jié)果以及檢測(cè)準(zhǔn)確性。結(jié)果膠體金免疫檢測(cè)的兩種病毒性疾病(柯薩奇病毒和流行性出血抗體)靈敏度分別為96.37%和98.15%,檢測(cè)符合率為95.0%和96.5%,檢測(cè)準(zhǔn)確率高。該試驗(yàn)檢測(cè)寄生蟲(chóng)疾病靈敏度略高于滲透法,靈敏度分別為98.00%和100.0%,但兩種檢測(cè)方法間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)在該次檢測(cè)的疾病中靈敏度均高于95%(除梅毒,靈敏度78%),特異性多為60%~70%,靈敏度檢測(cè)效果好。結(jié)論膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中對(duì)各類(lèi)疾病的檢驗(yàn)有明顯的效果,可以給部分疾病的診斷提供重要信息,提供更加有效的治療方案。但該試驗(yàn)特異性較低,有待改進(jìn)。
[關(guān)鍵詞]膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn);檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);應(yīng)用
膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)是固相標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù),用于檢測(cè)疾病,其檢驗(yàn)的基礎(chǔ)是酶免疫結(jié)合試驗(yàn),這種技術(shù)的優(yōu)勢(shì)較為明顯,比如操作簡(jiǎn)便、得出結(jié)果的時(shí)間較短等優(yōu)點(diǎn),在檢測(cè)過(guò)程中不需任何的儀器設(shè)備進(jìn)行輔助,短短幾分鐘就可以測(cè)定出結(jié)果,在臨床醫(yī)學(xué)中,這是應(yīng)用相對(duì)廣泛的一種疾病檢測(cè)技術(shù)[1]。為了探究膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用價(jià)值,將該項(xiàng)技術(shù)在不同的疾病檢驗(yàn)中進(jìn)行應(yīng)用,研究其在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的可行性[2]。從2018年1月—2019年1月該院收治的共600例患者進(jìn)行隨機(jī)抽取患者進(jìn)行研究,現(xiàn)報(bào)道如下。
1對(duì)象與方法
1.1研究對(duì)象
選取病毒性、細(xì)菌性及寄生蟲(chóng)疾病案例進(jìn)行檢測(cè),選取結(jié)果從中隨機(jī)抽取病例進(jìn)行檢測(cè),共600例患者。1.2方法膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)技術(shù)主要根據(jù)以下流程進(jìn)行疾病檢測(cè)的檢測(cè):把微孔濾膜作為檢測(cè)的載體,并且把已知的抗體或者抗原進(jìn)行包被,然后把需要檢測(cè)的標(biāo)本按順序依次加入微孔濾膜中,由于濾膜的毛細(xì)管作用,濾膜上所包被的抗體或者抗原就會(huì)待測(cè)標(biāo)本中的抗體或抗原進(jìn)行充分的結(jié)合,最后,經(jīng)過(guò)膠體金結(jié)合物以達(dá)到檢測(cè)標(biāo)本的目的[3-5]。通過(guò)不同的檢驗(yàn)裝置可以把膠體金免疫結(jié)合分為GICA(金免疫層析試驗(yàn))和GIFA(金免疫滲濾試驗(yàn))。
1.3評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)
觀察各類(lèi)疾病檢測(cè)的靈敏度以及特異性,通過(guò)數(shù)據(jù)體現(xiàn)使用檢測(cè)方法的好壞。
2結(jié)果
2.1膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)對(duì)病毒性疾病的檢驗(yàn)結(jié)果
2.1.1柯薩奇病毒的檢測(cè)柯薩奇病毒可以誘發(fā)許多種類(lèi)的疾病,為了能夠?qū)焖俚臋z測(cè)柯薩奇病毒因而研制了IgM抗體膠體金免疫層析診斷試紙條,該次試驗(yàn)檢測(cè)了84份血清樣本,把逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)作為評(píng)判的標(biāo)準(zhǔn),膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)的特異性為67.16%,靈敏度為96.37%。見(jiàn)表1。
2.1.2流行性出血熱抗體的檢測(cè)在流行性出血熱抗體的膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)中,選取94份流行性出血熱患者的血清作為樣本,使用膠體金免疫試劑盒進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果陽(yáng)性94份,檢測(cè)靈敏度為98.15%,見(jiàn)表1;接著對(duì)健康人的血清54份,54份血清檢測(cè)結(jié)果全部為陰性;膠體金免疫試劑盒檢測(cè)乙肝、鉤體病以及其他出血性疾病共230份血清,檢測(cè)結(jié)果全部為陰性[6-8]。對(duì)腎綜合癥出血熱患者的50份血清進(jìn)行檢測(cè),該疾病由漢坦病毒引起,使用膠體金免疫滲透法對(duì)抗?jié)h坦病毒IgM抗體,18份病程在3d之內(nèi),有16份表現(xiàn)為陽(yáng)性,剩下的32份病程在4d以及4d以上全部表現(xiàn)為陽(yáng)性[9]。
2.1.3艾滋病抗體的檢測(cè)該次試驗(yàn)對(duì)18家申報(bào)注冊(cè)艾滋病抗體快速檢測(cè)試劑進(jìn)行檢測(cè),對(duì)強(qiáng)陽(yáng)性的400份樣本檢測(cè)靈敏度都是100%;對(duì)340份健康血樣的檢測(cè)中,特異性在96.56%~100.00%,在300份高危人群的血樣檢測(cè)中,所有試劑的靈敏度在73.53%~95.06%該范圍內(nèi),2家特異性為較低,分別為56.73%和58.65%,其余的檢測(cè)基本都在94.89%以上。
2.2膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)對(duì)寄生蟲(chóng)病的檢驗(yàn)結(jié)果
關(guān)于寄生蟲(chóng)疾病主要檢測(cè)的是血吸蟲(chóng),用快速免疫金滲濾法進(jìn)行血吸蟲(chóng)抗體的檢測(cè),檢測(cè)總靈敏度為97.35%,慢性血吸蟲(chóng)患者靈敏度為97.73%,急性靈敏度為99.80%,晚期患者的靈敏度為91.50%,血吸蟲(chóng)非流行區(qū)的病人痊愈特異性為95.90%,流行區(qū)內(nèi)的病人痊愈特異性相對(duì)較低,為82.8%[10]。快速免疫金滲濾法檢測(cè)的靈敏度、特異性和診斷效率與膠體金SEA-dipstick方法十分相似。膠體金SEA-dipstick方法對(duì)于慢性血吸蟲(chóng)患者靈敏度為98.0%,急性患者靈敏度100.0%,見(jiàn)表2。
2.3膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)對(duì)細(xì)菌性疾病的檢驗(yàn)結(jié)果
2.3.1金黃色葡萄球菌的檢測(cè)在金黃色葡萄球菌的檢測(cè)中主要采用快速免疫金滲濾法,檢測(cè)的最低下限為3.2×106~6.0×106cfu/mL[11]。該次檢驗(yàn)檢測(cè)的20株不產(chǎn)毒素的金黃色葡萄球菌和15株大腸埃希菌,兩種菌體均有一株產(chǎn)生了交叉反應(yīng),10株沙門(mén)菌和志賀菌,6株腐生菌和鏈球菌都沒(méi)有發(fā)生交叉反應(yīng),見(jiàn)表3。
2.3.2沙門(mén)菌的檢測(cè)沙門(mén)菌的檢測(cè)主要采用抗原吸收法,在封閉環(huán)境下,讓抗沙門(mén)菌與其他的腸道桿菌發(fā)生交叉反應(yīng),并把標(biāo)記膠體金溶膠制作成探針狀,接著使用多膜復(fù)合的方法把其制作為免疫層析條,制作出來(lái)的免疫層析條的靈敏度為11.8×106cfu/mL,檢測(cè)108-1011cfu/mL的菌懸液發(fā)現(xiàn)并沒(méi)有出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)[12-13],見(jiàn)表3。
2.3.3鼠疫耶爾森菌的檢測(cè)鼠疫耶爾森菌的檢測(cè)使用快速免疫金滲濾法,鼠疫耶爾森菌具有良好的特性,和小腸結(jié)腸耶氏菌在密閉環(huán)境下不會(huì)發(fā)生交叉反應(yīng),檢測(cè)出的最低檢出限為2.3×105cfu/mL,使用免疫層析法檢測(cè)出的鼠疫耶爾森菌靈敏度為1.2×105cfu/mL。見(jiàn)表3。
2.4膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)對(duì)其他微生物疾病的檢驗(yàn)結(jié)果
在針對(duì)梅毒的檢測(cè)試驗(yàn)中,我國(guó)的膠體金試劑盒檢測(cè)的梅毒臨床病例靈敏度為73.4%,高于日本富士公司的TPPA試劑和美國(guó)的梅毒螺旋體特異性抗體膠體金法。該次檢驗(yàn)中,使用膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)對(duì)紅斑狼瘡患者、孕婦以及其他正常體檢人群的血清進(jìn)行檢測(cè),其中,紅斑狼瘡患者血清有58例、孕婦血清有30名、正常體檢人群血清有20名,檢測(cè)結(jié)果均為陰性。
3結(jié)論
膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的應(yīng)用比較廣泛,對(duì)于病毒性疾病、細(xì)菌性疾病以及寄生蟲(chóng)類(lèi)疾病都有較好的效果,柯薩奇病毒、艾滋病抗體以及流行性出血熱抗體的檢測(cè)中靈敏度都較高,兩者的檢測(cè)靈敏度分別為96.37%和98.15%,但特異性百分比只有67.16%,在病毒性疾病的檢測(cè)中特異性需要進(jìn)一步的改善。在寄生蟲(chóng)類(lèi)疾病中,該實(shí)驗(yàn)對(duì)于急性血吸蟲(chóng)患者的靈敏度檢測(cè)相對(duì)較高,慢性患者其次,晚期患者最低,但檢測(cè)靈敏度均高于95.00%,有較好的檢測(cè)結(jié)果;在梅毒的檢測(cè)中,靈敏度僅有73.40%,低于其他疾病靈敏度,但我國(guó)的膠體金試劑盒與日本富士公司的TPPA試劑和美國(guó)的梅毒螺旋體特異性抗體膠體金法相比,靈敏度都較高。研究表明,膠體金免疫檢測(cè)血清心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白的符合率為95.09%,與該實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)結(jié)果相符,除此,該試驗(yàn)還可用于結(jié)核抗體、破傷風(fēng)抗體、風(fēng)疹抗體、結(jié)核抗體、結(jié)核抗體、流感病毒、衣原體以及登革熱抗體等的檢測(cè),膠體金膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)同時(shí)還具備操作簡(jiǎn)便、得到結(jié)果快速、不需與其它貴重儀器設(shè)備配合使用等優(yōu)點(diǎn),因此,膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用可以加以推廣,這對(duì)于患者在疾病的預(yù)防、檢測(cè)以及醫(yī)生進(jìn)行治療方面都有積極的作用。綜上所述,膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)是一種新興的具有較好檢測(cè)效果的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法,比傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法更加利于操作、速度更快。但是該方法還具一定的局限性,靈敏度與檢出率也需要繼續(xù)完善,更好地確保膠體金免疫結(jié)合試驗(yàn)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果。
[參考文獻(xiàn)]
[1]鄭惠心.應(yīng)用CLSIEP12-A2評(píng)價(jià)免疫-化學(xué)雙聯(lián)法檢測(cè)糞便隱血試驗(yàn)準(zhǔn)確度[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2017,38(8):1132-1134.
[2]趙亮,魯旭,肖虎,等.應(yīng)用EP10-A2對(duì)膠體金免疫層析法測(cè)胃蛋白酶原Ⅰ進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2017,38(5):622-624.
[4]許鵬展.免疫膠體金技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用與進(jìn)展[J].醫(yī)療裝備,2017,30(8):202-203.
[5]李景蘭.膠體金免疫層析法在ELISA檢出HBsAg陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢中的應(yīng)用研究[J].河南醫(yī)學(xué)研究,2017,26(13):2421-2422.
[6]張捷,楊磊,田茵,等.應(yīng)用于病毒檢測(cè)的膠體金免疫層析技術(shù)研究進(jìn)展[J].中國(guó)科技成果,2017,18(4):45-47.
[8]孫宇,王茹,顧李霖,等.應(yīng)用CLSIEP12-A2評(píng)價(jià)免疫-化學(xué)雙聯(lián)法檢測(cè)糞便隱血試驗(yàn)準(zhǔn)確度[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2017,38(8):1132-1134.
[9]李金麗.膠體金免疫層析法快速檢測(cè)B族鏈球菌的臨床評(píng)估[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2017,32(8):747-748.
[10]崔勝金,肖利佳,鄭文斌,等.珠海麗珠乙型肝炎酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒性能評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2017,38(22):3190-3193.
[12]蔡瑞英,王小慧,馬聰,等.極端環(huán)境條件對(duì)膠體金免疫層析產(chǎn)品的影響評(píng)估[J].軍事醫(yī)學(xué),2017,41(9):758-761.
[13]劉鍵,王艷麗,趙勇,等.免疫磁珠酶催化新技術(shù)在H7N9流感病毒高靈敏檢測(cè)中的應(yīng)用[J].轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)電子雜志,2017,4(4):52-54.
作者:張志宏 趙梅 謝斌 單位:山東省滕州市中心人民醫(yī)院檢驗(yàn)科