探索濾紙在病理白片保存中的應用范文

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在日常病理工作中，通常需要切取大量白片用于免疫組化等相關研究，但傳統玻璃白片易碎、運輸不方便，導致保存不理想，而且白片制作時間過久會導致部分抗原發生衰弱降低，影響實驗結果，本文經實驗發現濾紙可以作為儲存白片的媒介，后期能方便快速的轉移到黏附載玻片上，同時能很好的保存白片抗原，現介紹如下。

1材料與方法

1．1標本隨機選取定位于細胞核、細胞膜、細胞質的免疫指標各三項進行監測，以Ki67、p16、MUM1、HER2、CD10、CD99、CK7、NapsinA、Arg1作為監測指標，根據監測指標選取相應的陽性標本各10例，其中MUM1、CD99和Arg1選擇標本為弱陽性標本。

1．2材料及儀器黏附載玻片、濾紙、玻片儲存盒、密封袋、Leica切片機、Roche全自動免疫組化染色機。

1．3試劑Ki67一抗購自DAKO公司，HER2、p16一抗購自羅氏公司，CD10、CK7、NapsinA、CD99、MUM1一抗購自福州邁新公司，Arg1一抗購自北京中杉金橋公司。

1．4方法（1）將Ki67、p16、MUM1、HER2、CD10、CD99、CK7、NapsinA、Arg1陽性標本連續切片2張，其中1張直接行免疫組化染色作為對照組，余1張用濾紙制作白片后放入密封袋中室溫存放，儲存1個月后行免疫組化染色，并與對照組比較。（2）濾紙白片制作及后期轉移方法：將濾紙裁剪成玻片大小，切取白片后放入漂片儀中，用濾紙撈取白片瀝干水分后放在干凈的紗布上，待其充分晾干后，放入密封袋中擠掉空氣儲存。使用時，將濾紙白片取出，將黏附白片的一面朝上放入漂片儀中，放置約15s后，用鑷子將濾紙斜放入水中，此時白片即可自然脫落，然后用黏附載玻片正常撈片即可。

2結果

染色后，隨機選取兩名診斷醫師，觀察對照組與濾紙組相對應的5個不同區域并進行染色結果對比，結果顯示：濾紙儲存白片的染色效果與對照組比較基本一致，陽性標本抗原性保存較好，弱陽性標本抗原性也保存良好。

3討論

病理組織蠟塊屬于病歷資料，一般由醫院保管［1］，如若需要進一步研究一般由病理科提供白片，但白片在室溫中存放過久，組織切片上的抗原會發生衰弱［2］，對結果造成較大影響，其原因可能與白片接觸空氣氧化等因素有關，雖然有的病理科將白片浸入融化的石蠟以保存抗原，但此法導致切片黏附的石蠟太多太厚，脫蠟易不足，且若石蠟質量不好、雜質太多易附著在組織上影響染色結果。另外根據陳杰偉等［3］報道，隨著時間的推移，玻片黏附力呈下降趨勢，極易出現脫片問題，影響染色結果，因此有效保護白片的抗原性及完整性是必要的。本文采用的是普通濾紙，質地菲薄，經水浸透后晾干不變形，可以很好的作為白片載體，由于其材質本身的親水性，對石蠟制作的白片黏附性很低，方便后期的轉移。將濾紙白片儲存在密封袋中，可以更好的隔絕空氣等不良因素，以便更好的保存組織抗原。濾紙僅僅是作為白片的中間媒介，使用時將白片重新轉移到黏附載玻片上，方便各實驗室選擇適合自己的玻片，降低脫片幾率。與傳統玻璃白片相比，濾紙白片具有質量輕和體積小的優點，這意味著在同樣大小的儲存盒中，可以儲存更多的白片，還可以避免玻璃白片因材質導致的運輸易碎等問題，具有很大的優勢。病理技術標準化日益成為國際和國內病理學的發展趨勢，隨著醫學的發展，對免疫組化染色結果的可靠性要求也越來越高［4］。免疫組化在判斷腫瘤組織起源、分類及良、惡性腫瘤的鑒別方面發揮著非常重要的作用［5］，是病理診斷中最常見的“武器”，因此保證病理白片的抗原質量對保證染色結果的準確性至關重要。本文使用濾紙作為白片儲存的媒介，方法簡單快捷，可用密封袋真空保存，抗原性保存好，對弱陽性抗原也有較好的保存效果，成本低廉，非常適合白片的暫時保存。

參考文獻：

［1］陳輝，余波，章如松，等．病理會診常見問題與對策［J］．診斷病理學雜志，2017，24（1）：79－80．

［2］BancroftJD，GambleM．組織學技術的理論與實踐［M］．6版．周小鴿，劉勇，譯．北京：北京大學醫學出版社，2010：414．

［3］陳杰偉，劉君，盧佳斌，等．Leica、Dako和Roche的免疫組化自動化染色平臺應用體會［J］．臨床與實驗病理學雜志，2017，33（4）：465－467．

［4］劉勇，楊海玉．國際特設專家委員會建議：診斷免疫組化陽性對照標準化［J］．臨床與實驗病理學雜志，2016，32（1）：1－3．

［5］王璐．不同方式進行的EDTA抗原熱修復對免疫組化結果的影響［J］．診斷病理學雜志，2017，24（2）：143－144

作者：付海洋 李宏 李玉軍 付廣明 時維平 張翔雁 史海磊 戚慧陽