綠色環(huán)保的生物學(xué)功能評估范文

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統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理。各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以百分?jǐn)?shù)表示，各因子蛋白之間的比較采用兩樣本t檢驗(yàn)，P<0.01表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1胸水細(xì)胞HE染色形態(tài)學(xué)觀察

胸水細(xì)胞經(jīng)HE染色行形態(tài)學(xué)觀察。經(jīng)高性能、綠色環(huán)保組織細(xì)胞保存材料固定保存的胸水細(xì)胞核漿固定充分，未見非特異性雜質(zhì)；經(jīng)常規(guī)95%乙醇固定的胸水細(xì)胞胞漿較少，甚至萎縮消失，細(xì)胞核有碎裂現(xiàn)象。結(jié)果見圖1。

2Westernblotting

經(jīng)新型高性能、綠色環(huán)保組織細(xì)胞保存材料固定保存的胸腹腔積液組織細(xì)胞CK、CEA和P53的蛋白表達(dá)結(jié)果見圖2。定量測試其灰度值水平分別是91%、86%和88%，由常規(guī)固定液保存的細(xì)胞CK、CEA和P53的蛋白表達(dá)水平分別是46%、38%和31%，兩種保存方法相比具有顯著性差異（P<0.05）。

討論

若胸腹腔積液標(biāo)本不能立即送檢，需加少許防腐劑，以防止細(xì)胞自溶。某些胸腹腔積液內(nèi)含有大量纖維蛋白、粘液蛋白、纖維素、組織凝血活酶等各種凝血因子，極易形成凝塊，嚴(yán)重影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，對這些病例進(jìn)行胸腹腔積液穿刺抽液時(shí)，應(yīng)預(yù)先在標(biāo)本器皿內(nèi)加1/10量的3.8%枸櫞酸鈉或0.1ml肝素，以防止其發(fā)生凝固，但加入抗凝劑后對細(xì)胞形態(tài)有一定影響。為了改善組織細(xì)胞保存液的性能，克服其缺點(diǎn)，我們創(chuàng)新性應(yīng)用獨(dú)特技術(shù)工藝，開發(fā)研制了新型高性能、綠色環(huán)保組織細(xì)胞保存材料。此材料將乙醇：冰醋酸：丙酮：鏈激酶按3∶1∶1∶0.5比例配制，胸腹腔積液經(jīng)處理后，組織細(xì)胞成分按比重沉積于底層，纖維蛋白、粘液蛋白、纖維素及紅細(xì)胞等雜質(zhì)經(jīng)洗脫液洗脫掉。我們進(jìn)一步應(yīng)用熒光定量PCR和Westernblotting技術(shù)，從mRNA和蛋白水平檢測此組織細(xì)胞保存材料的生物學(xué)性能。

研究結(jié)果顯示，與常規(guī)保存液相比，新型高性能、綠色環(huán)保組織細(xì)胞保存材料較好的固定保存了胸腹腔積液組織細(xì)胞的抗原性，其CK、CEA和P53的表達(dá)水平明顯高于經(jīng)常規(guī)保存液處理組。目前廣泛應(yīng)用的薄層液基細(xì)胞技術(shù)在制作胸腹腔積液細(xì)胞涂片時(shí)，總體采樣量增加、讀片面積縮小、背景清晰，利于降低漏診率和誤診率，提高了與組織學(xué)診斷的符合率。但是，由于方法原理限制，這類技術(shù)無法對送檢標(biāo)本的細(xì)胞進(jìn)行全面處理，導(dǎo)致被檢標(biāo)本信息失，是其最大不足。我們前期的研究表明，收集胸腹腔積液時(shí)加入高性能、綠色環(huán)保組織細(xì)胞保存材料，可避免細(xì)胞自溶，最大限度去除纖維蛋白、粘液、紅細(xì)胞和各種雜質(zhì)；經(jīng)離心、沉淀、制片，可獲得高質(zhì)量的細(xì)胞涂片。

傳統(tǒng)制片經(jīng)巴氏染色顯示細(xì)胞分布均勻，形態(tài)完整；免疫組化檢測顯示涂片背景清晰，抗原染色特異。剩余組織細(xì)胞還可用于其他分子生物學(xué)指標(biāo)檢測。經(jīng)高性能、綠色環(huán)保組織細(xì)胞保存材料處理的胸腹腔積液細(xì)胞，性能優(yōu)越，對于保證后期制片質(zhì)量、較好保存組織細(xì)胞抗原性、提高診斷效率至關(guān)重要。

作者：李笑萬里燕耿艦白曉燕單位：南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院急診科病理科廣東省腎臟病研究所