綠色環保的生物學功能評估范文

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統計學處理

應用SPSS11.0統計分析軟件進行處理。各組實驗數據以百分數表示，各因子蛋白之間的比較采用兩樣本t檢驗，P<0.01表示差異具有統計學意義。

結果

1胸水細胞HE染色形態學觀察

胸水細胞經HE染色行形態學觀察。經高性能、綠色環保組織細胞保存材料固定保存的胸水細胞核漿固定充分，未見非特異性雜質；經常規95%乙醇固定的胸水細胞胞漿較少，甚至萎縮消失，細胞核有碎裂現象。結果見圖1。

2Westernblotting

經新型高性能、綠色環保組織細胞保存材料固定保存的胸腹腔積液組織細胞CK、CEA和P53的蛋白表達結果見圖2。定量測試其灰度值水平分別是91%、86%和88%，由常規固定液保存的細胞CK、CEA和P53的蛋白表達水平分別是46%、38%和31%，兩種保存方法相比具有顯著性差異（P<0.05）。

討論

若胸腹腔積液標本不能立即送檢，需加少許防腐劑，以防止細胞自溶。某些胸腹腔積液內含有大量纖維蛋白、粘液蛋白、纖維素、組織凝血活酶等各種凝血因子，極易形成凝塊，嚴重影響檢驗結果的準確性。因此，對這些病例進行胸腹腔積液穿刺抽液時，應預先在標本器皿內加1/10量的3.8%枸櫞酸鈉或0.1ml肝素，以防止其發生凝固，但加入抗凝劑后對細胞形態有一定影響。為了改善組織細胞保存液的性能，克服其缺點，我們創新性應用獨特技術工藝，開發研制了新型高性能、綠色環保組織細胞保存材料。此材料將乙醇：冰醋酸：丙酮：鏈激酶按3∶1∶1∶0.5比例配制，胸腹腔積液經處理后，組織細胞成分按比重沉積于底層，纖維蛋白、粘液蛋白、纖維素及紅細胞等雜質經洗脫液洗脫掉。我們進一步應用熒光定量PCR和Westernblotting技術，從mRNA和蛋白水平檢測此組織細胞保存材料的生物學性能。

研究結果顯示，與常規保存液相比，新型高性能、綠色環保組織細胞保存材料較好的固定保存了胸腹腔積液組織細胞的抗原性，其CK、CEA和P53的表達水平明顯高于經常規保存液處理組。目前廣泛應用的薄層液基細胞技術在制作胸腹腔積液細胞涂片時，總體采樣量增加、讀片面積縮小、背景清晰，利于降低漏診率和誤診率，提高了與組織學診斷的符合率。但是，由于方法原理限制，這類技術無法對送檢標本的細胞進行全面處理，導致被檢標本信息失，是其最大不足。我們前期的研究表明，收集胸腹腔積液時加入高性能、綠色環保組織細胞保存材料，可避免細胞自溶，最大限度去除纖維蛋白、粘液、紅細胞和各種雜質；經離心、沉淀、制片，可獲得高質量的細胞涂片。

傳統制片經巴氏染色顯示細胞分布均勻，形態完整；免疫組化檢測顯示涂片背景清晰，抗原染色特異。剩余組織細胞還可用于其他分子生物學指標檢測。經高性能、綠色環保組織細胞保存材料處理的胸腹腔積液細胞，性能優越，對于保證后期制片質量、較好保存組織細胞抗原性、提高診斷效率至關重要。

作者：李笑萬里燕耿艦白曉燕單位：南方醫科大學南方醫院急診科病理科廣東省腎臟病研究所