馬尾松原花青素對鏈脲佐菌素誘導糖尿病大鼠血糖水平范文

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【摘要】目的觀察馬尾松原花青素（OPC）對糖尿病（DM）大鼠血糖的影響。方法采用一次性大劑量（50mg/kg）注射鏈脲佐菌素（STZ）建立糖尿病大鼠模型；陽性對照組按30mg/（kg·d）劑量灌胃鹽酸二甲雙胍，實驗組分別按50、500mg/（kg·d）劑量灌胃OPC，模型組和正常對照組則灌胃等容積生理鹽水，連續4周，測定各組動物血清血糖（FBG）和脂質過氧化物（LPO）含量。結果鹽酸二甲雙胍對STZ糖尿病大鼠療效不明顯，OPC給藥組糖尿病大鼠的血糖和脂質過氧化物水平得到明顯控制，OPC高、低劑量治療后與模型組以及自身治療前比較，FBG均有顯著下降（P＜0.05或P<0.01），其中40%的DM大鼠FBG值恢復正常，LPO含量明顯降低（P<0.001或P<0.01）。結論OPC具有降低糖尿病大鼠血糖和脂質過氧化物水平的作用。

【關鍵詞】低聚原花青素；鏈脲佐菌素；糖尿病；血糖；脂質過氧化物

【Abstract】ObjectiveObservingtheeffectofOPConreducingbloodglucoseindiabeticrats.MethodsThediabeticanimalmodelswerereproducedbystreptozotocin（50mg/kg）abdominalcavityinjection.Thepositivecontrolgroupweretreatedwithmetforminhydrochloride（MH）,［30mg/（kg·d）］,theothertwotreatmentgroupsweretreatedwitholigomericproanthocyanidin［50、500mg/（kg·d）respectively］,themodelcontrolandblankgroupweretreatedwithNSwater.After4weeks,theirbloodsamplesweredrawn,bloodsugarandlipidperoxideweredetected.ResultsThebloodsugarandlipidperoxidedidnotchangedistinctlyinthetreatmentgroupswithMH,Tocomparebeforeandaftertreatment,theplasmicglucoselevelandcontentofserumlipidperoxidedeclineddistinctlyintwotreatmentgroups（P＜0.05orP＜0.01）and40percentofthemodelsofdiabeticratswerereduced.ConclusionOligomericproanIhocyanidinhasaneffectofdecreasetheplasmicglucoseandlipidperoxidelevelofdiabetesrats.

【Keywords】oligomericproanthocyanidin;streptozotocin;diabetes;bloodglucose

已有相當證據表明糖尿病及其并發癥的發生、發展過程與氧化應激增強密切相關［1，2］。馬尾松原花青素（oligomericproanthocyanidin，OPC）是從馬尾松樹皮中提取出來的一類多酚化合物，具有極強的抗氧化活性，是一種很好的自由基清除劑和脂質過氧化抑制劑［3，4］。一次性大劑量注射鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）可致β細胞壞死而無胰島炎，制成無炎性1型糖尿病模型，成模后即出現多飲、多尿和多食表現，其癥狀體征與臨床病人比較相似［5］。本文建立STZ大鼠糖尿病模型，觀察馬尾松OPC對DM病理模型血糖水平的影響，為預防和治療糖尿病的OPC藥物開發和臨床應用提供依據。

1材料與方法

1.1實驗材料

1.1.1主要試劑馬尾松原花青素（OPC）：桂林萊因生物科技股份有限公司（含量98%）；鏈脲佐菌素（STZ）：美國Sigma公司；鹽酸二甲雙胍片：浙江國光生物制藥有限公司；血糖（FBG）試劑盒、脂質過氧化物（LPO）試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供；檸檬酸、檸檬酸鈉等試劑均為分析純。

1.1.2實驗動物健康雌性SD大鼠，體重320～330g，購自中國科學院上海實驗動物中心提供，生產許可證號：SCXK（滬）2003-0003；使用許可證號：ZYXK（浙）2003-0003。

1.2實驗方法

1.2.1動物模型（DM）制備參照文獻方法［5］，用0.1mol/L、pH4.2的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液配制成0.5％的溶液，一次性腹腔注射STZ（50mg/kg）的方法復制大鼠糖尿病模型，72h（禁食12h）后測定FBG，FBG大于11.1mmol/L者可確定為糖尿病模型大鼠。

1.2.2分組與給藥造模前隨機分出10只大鼠作為正常對照組，造模后確定的DM模型大鼠隨機分為模型對照組、陽性對照組（鹽酸二甲雙胍）、OPC高劑量給藥組、OPC低劑量給藥組，每組12只。高劑量組按每日500mg/kg給藥，低劑量組按每日50mg/kg給藥，模型對照組和正常組每日灌等容量蒸餾水。陽性對照組按每日30mg/kg給藥，均于上午灌胃1次，連續治療4周。

1.3指標測定各組大鼠取血前禁食12h，分別斷尾取血，供測定血清FBG、LPO；血糖測定采用葡萄糖氧化酶法，LPO測定采用TBA法，均按試劑盒說明操作。

1.4統計學處理各組實驗數據以均數±標準差表示，應用SPSS11．5統計分析軟件進行組

間均數差異的F檢驗，每兩組間均數比較采用q檢驗。P<0.05為差異有顯著性。

2結果

2.1大鼠血清FBG變化檢測結果表明，模型組動物FBG在整個實驗過程中一直處于升高趨勢，且與正常組差異具有非常顯著性（P<0.001）；陽性對照組治療前后，FBG與模型組相同（P＞0.05），與正常組差異有非常顯著性（P＜0.001），治療后FBG較治療前高（P＜0.01），表明鹽酸二甲雙胍對治療1型糖尿病療效不明顯；OPC高、低劑量治療后與模型組以及自身治療前比較，FBG均有顯著下降（P＜0.05或P<0.01），表明OPC具有對抗高血糖、阻止DM大鼠血糖進一步升高的作用，其中以高劑量組OPC作用更明顯。高、低劑量給藥后，總體雖尚未恢復到正常組水平（P<0.001），但對糖尿病大鼠具有一定的降血糖作用，見表1。從表1可以看出，高劑量治療組FBG平均值的標準差很大，這主要是由于該組數據之間的偏差很大，其中有40%的DM大鼠FBG值恢復正常，為5.68±0.19mmol/L。這一結果提示，高劑量的馬尾松原花青素能有效抵抗氧化應激，防治糖尿病。表1OPC對大鼠血清FBG的影響注：與正常組比較，**P＜0.001；與模型組比較，△P＞0.05，△△P＜0.01；與治療前比較，#P＜0.05,##P＜0.01

2.2血清LPO變化實驗結果見表2。模型對照組與正常組相比，血清LPO含量明顯升高（P<0.001），高、低給藥劑量組與模型對照組以及自身治療前比較，LPO含量明顯降低（P<0.001或P<0.01），表明高、低給藥劑量均具有較理想的抑制脂質過氧化反應降低血清LPO的作用。陽性對照組與模型組相比，差異無顯著性。表2OPC對大鼠血清LPO水平的影響注：與正常組比較，**P＜0.001，*P＜0.01；與模型組比較，△P＞0.05，△△P＜0.01；與治療前比較，#P＞0.05,##P＜0.01

3討論

鏈脲佐菌素通過自由基損傷β細胞，使β細胞功能受損，胰島素合成減少，引發糖尿病［6］。本研究顯示OPC具有顯著降低糖尿病大鼠血糖，干預DM發展的作用，以高劑量作用更為顯著，其中有40%的DM大鼠FBG值恢復正常。OPC的作用可能與其強大抗氧化能力有關，能夠有效對抗活性氧自由基引起的β細胞毒性的作用、修復胰腺組織氧化損傷作用［7］。

從目前臨床所用的降糖藥物來看，各種西藥都有一定的局限性和肝腎功能損害、胃腸道反應等不良反應，而抗糖尿病中成藥的應用也存在著藥物組分、含量不明、療效緩慢等問題，馬尾松OPC是從天然植物中提取，具有高效、低毒、高生物利用率的特點，隨著世界“回歸自然”熱潮的形成，OPC有望成為一種新的安全的糖尿病預防和臨床治療藥物。

【參考文獻】

1段有金．氧自由基與糖尿病．日本醫學介紹，1999，20（7）：331-332.

2郭婷，逢鍵粱，王曉波．氧自由基與胰島素依賴型糖尿病發病機制．國外醫學·生理、病理科學與臨床分冊，1999，19（4）：320-321.

3吳春，陸海燕，代麗君，等．原花青素的抗氧化活性研究．哈爾濱商業大學學報（自然科學版），2005，21（4）：457-460.

4劉葉玲．原花青素的藥理學研究進展．現代醫藥衛生，2006，22（15）：2321-2322.

5黃琛，顧志峰，曹曉蕾，等．Ⅰ型糖尿病大鼠模型建立及穩定性研究．現代檢驗醫學雜志，2007，22（3）：49-51.

6張均田.現代藥理學實驗方法.北京：北京醫科大學、中國協和醫科大學聯合出版社,1998,981-988.

7劉艷妮，沈新南，黃玥，等．葡萄籽原花青素對糖尿病鼠抗氧化能力影響．中國公共衛生，2006，22（8）：992-993．