酸乳桿菌的生物學(xué)論文范文

本站小編為你精心準備了酸乳桿菌的生物學(xué)論文參考范文，愿這些范文能點燃您思維的火花，激發(fā)您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

1方法

1.1生長曲線的測定嗜酸乳桿菌AP117經(jīng)活化后,以5%的接種量接種到MRS液體培養(yǎng)基中,30益靜置培養(yǎng)24h,每隔2h取樣,稀釋涂布MRS固體培養(yǎng)基平板,培養(yǎng)20~24h后數(shù)活菌數(shù),每毫升的細菌菌落數(shù)以對數(shù)值表示。

1.2耐酸能力的測定將嗜酸乳桿菌AP117經(jīng)MRS液體培養(yǎng)基活化后,按5%接種量接種于MRS液體培養(yǎng)基,30益培養(yǎng)16h備用。用0.1mol/L的HCl分別調(diào)節(jié)MRS液體培養(yǎng)基pH為1.5、2.0、3.0、4.0和4.5。取16hAP117培養(yǎng)液,按5%接種量接種于不同pH的液體培養(yǎng)基中,30益培養(yǎng)2h,采用傾注平板法,以MRS固體培養(yǎng)基作為計數(shù)培養(yǎng)基,測定培養(yǎng)液的活菌數(shù),平行測定3次,取平均值,以剛接種時的活菌數(shù)為對照,計算菌株在不同酸性條件下處理2h后的存活率。

1.3耐膽鹽能力的測定將嗜酸乳桿菌AP117經(jīng)MRS液體培養(yǎng)基活化后,按5%接種量接種于MRS液體培養(yǎng)基,30益培養(yǎng)16h備用。用豬膽鹽分別調(diào)節(jié)MRS液體培養(yǎng)基,使膽鹽含量分別為0.1%、0.5%、1.0%、1.5%和2.0%。取16h培養(yǎng)液按5%接種量接種于不同膽鹽含量的液體培養(yǎng)基中,30益培養(yǎng)2h,采用傾注平板法,以MRS固體培養(yǎng)基作為計數(shù)培養(yǎng)基,測定培養(yǎng)液的活菌數(shù),平行測定3次,取平均值,以剛接種時的活菌數(shù)為對照,計算在不同膽鹽條件下處理2h后的菌株存活率。

2結(jié)果與討論

2.1嗜酸乳桿菌AP117的生長動態(tài)曲線嗜酸乳桿菌AP117在溫度30益,靜置培養(yǎng)24h,其活菌數(shù)的對數(shù)值隨時間變化關(guān)系如圖1。由圖1看出培養(yǎng)6h后活菌濃度達到105cfu/mL,之后進入對數(shù)生長期,14~20h為穩(wěn)定期,活菌濃度超過1010cfu/mL。

2.2嗜酸乳桿菌AP117的耐酸性乳酸菌可以利用的耐酸性機制有許多種,目前沒有統(tǒng)一定論,大體上可以分成8類:質(zhì)子泵、蛋白質(zhì)修復(fù)、DNA修復(fù)、調(diào)節(jié)因子、細胞密度的改變、細胞膜的改變、產(chǎn)生堿和代謝方式的改變,其耐酸性機制因菌株不同而有差異。不同的菌株耐酸性不同。采用MRS液體培養(yǎng)基和0.1mol/L的HCl溶液模擬胃酸環(huán)境(pH為1.5~4.5),測定菌株AP117在不同pH條件處理2h后的存活率,結(jié)果見圖2。在pH為4.0和4.5條件下,菌株存活率均較高,達到97%以上,活菌數(shù)在1010cfu/mL以上;在pH為2.0條件下,菌株的存活率仍為79.8%,表現(xiàn)出極強的耐酸性;而在pH為1.5條件下,菌株的活菌數(shù)下降較快,降至105cfu/mL,存活率僅為48%左右,說明pH為1.5對嗜酸乳桿菌有較強的抑制作用。表明嗜酸乳桿菌AP117完全可能適應(yīng)胃內(nèi)環(huán)境,是比較理想的耐酸性較強的益生菌菌株。

2.3嗜酸乳桿菌AP117的耐膽鹽能力采用豬膽鹽分別調(diào)節(jié)MRS液體培養(yǎng)基,使膽鹽質(zhì)量分數(shù)分別為0.1%、0.5%、1.0%、1.5%和2.0%(下同)。測定菌株AP117在不同膽鹽濃度條件處理2h后的存活率,結(jié)果見圖3．圖3中數(shù)據(jù)表明在0.1%膽鹽的MRS液體培養(yǎng)基中放置2h后,菌株AP117的存活率為100%左右,能夠很好的存活;膽鹽質(zhì)量分數(shù)0.5%條件下,菌株的存活率仍高達82.48%,說明0.5%膽鹽濃度對嗜酸乳桿菌AP117的生長影響不大;繼續(xù)增加膽鹽質(zhì)量分數(shù),菌株的存活率顯著降低。趙瑞香等[14]研究發(fā)現(xiàn)嗜酸乳桿菌能夠有效降低血清及培養(yǎng)介質(zhì)中的膽固醇水平,但其降低膽固醇的機理未確定。嗜酸乳桿菌對膽鹽的耐性可能與菌體細胞的膽鹽水解酶活力有關(guān)[15]。高濃度的膽鹽對菌體細胞有一定的毒害,在膽鹽水解酶的作用下膽鹽由結(jié)合態(tài)變?yōu)槊摻Y(jié)合態(tài)膽鹽,后者溶解度降低,對菌體細胞的傷害減小。

2.4嗜酸乳桿菌AP117代謝產(chǎn)物的抑菌特性采用雙層瓊脂牛津杯法測定菌株AP117對兩種指示菌的抑菌效果,觀察抑菌圈,測定抑菌圈直徑,結(jié)果如圖4所示。菌株AP117的代謝產(chǎn)物對兩種指示菌的抑菌圈明顯可見,直徑均在10mm以上,尤其對大腸桿菌抑菌圈直徑達到12.5mm,表明嗜酸乳桿菌AP117的代謝產(chǎn)物對大腸桿菌的拮抗作用更大些。大腸桿菌和金黃色葡萄球菌會導(dǎo)致人類和動物發(fā)生細菌性食物中毒和其它感染癥。嗜酸乳桿菌代謝產(chǎn)物對這些致病菌的拮抗能力較強,可以降低食物中毒的發(fā)病率,保證食品的安全性。

3結(jié)論

動物消化道中存在胃酸,腸道存在膽汁鹽,胃酸和膽汁鹽都具有抗菌性,能否抵抗較強的胃酸環(huán)境和較高濃度的腸道膽汁鹽環(huán)境是益生菌在消化道中發(fā)揮有益作用的一項重要指標。通過實驗結(jié)果表明嗜酸乳桿菌AP117有強耐酸性和耐膽鹽性,對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌具有強的抑菌作用,作為食品或飼料添加劑用菌株將會有很好的前景。

作者：于海峰李文靖宋俊梅單位：齊魯工業(yè)大學(xué)山東省微生物工程重點實驗室