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發(fā)用類化妝品微生物檢驗(yàn)范文

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發(fā)用類化妝品微生物檢驗(yàn)

摘要:

目的:分析發(fā)用化妝品微生物檢驗(yàn)方式的適用性。方法:根據(jù)微生物限度的檢查法對7件不同品牌發(fā)用化妝品實(shí)施致病菌的檢測與菌落計(jì)數(shù),同時(shí)行方法學(xué)的驗(yàn)證。結(jié)果:傾注法下7種發(fā)用化妝品中通過1:10供試液,應(yīng)用孟加拉紅的培養(yǎng)基與含5%聚山梨酯80、0.5%卵磷脂孟加拉紅培養(yǎng)基的方法檢驗(yàn)得出,黑曲霉以及白色念珠菌回收率為0;在1∶100供試液下,應(yīng)用薄膜過濾方法,所有發(fā)用化妝品大腸埃希菌回收率都超過了70%,但是金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌回收率均在70%以下,無法徹底消除抑菌的作用。結(jié)論:在發(fā)用化妝品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí),應(yīng)盡量降低銅綠假單胞菌的試驗(yàn)結(jié)果中假陰性可能性,而糞大腸菌群與金黃色葡萄球菌檢測方法還需要改進(jìn)。

關(guān)鍵詞:

發(fā)用類化妝品;微生物檢驗(yàn);適用性

化妝品主要包含蒸發(fā)用品、洗發(fā)用品與護(hù)發(fā)用品等,其包含成分多種多樣,極易引起變質(zhì)。一些產(chǎn)家為了防止化妝品變質(zhì),常常會(huì)添加一些防腐劑,這就加大了微生物的檢驗(yàn)過程假陰性可能性。本文主要分析發(fā)用化妝品的微生物檢驗(yàn)方式的適用性,具體如下:

1材料以及方法

1.1實(shí)驗(yàn)的對象:A-去屑洗的發(fā)露、B-去屑的洗發(fā)露、C-絲質(zhì)順滑類去屑的洗發(fā)露、D-清屑舒潤與調(diào)理的洗發(fā)露、E-新活炫亮類去屑柔亮的洗發(fā)乳、F-去油凈屑的洗發(fā)露、G-蘆薈止癢滋潤的洗發(fā)露。

1.2儀器、菌株和試劑。菌株:大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉。試劑:孟加拉的紅培養(yǎng)基、聚山梨酯80以及卵磷脂吐溫-80的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基;大豆的卵磷脂與硝酸纖維的薄膜。儀器:生物的安全柜、潔凈的工作臺(tái)、生化的培養(yǎng)箱、保溫的震蕩儀、微波爐與滅菌鍋。

1.3實(shí)驗(yàn)的方法

1.3.1傾注方法。菌液組:取1毫升已配置菌液,注入到平皿之中,再加入適量培養(yǎng)基,對菌液中菌落數(shù)進(jìn)行測定。樣品的對照組:取不同的稀釋級別下(1∶10,1∶100,1∶1000)1毫升供試液注進(jìn)平皿中,然后孟加拉紅的培養(yǎng)基、卵磷脂或者是吐溫80-的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,對樣品本底菌落數(shù)進(jìn)行測定。觀察組:取不同的稀釋級別下1毫升供試液以及1毫升已配置菌液,分別放入同一個(gè)平皿中,再添加培養(yǎng)基,對菌落數(shù)進(jìn)行測定。

1.3.2薄膜的過濾法。菌液組:取1毫升已配置菌液,注入到平皿中,添加培養(yǎng)基,對菌液中菌落數(shù)進(jìn)行測定。實(shí)驗(yàn)組:取1毫升供試液,加到100毫升0.9%無菌的NaCl溶液中進(jìn)行過濾,把0.9%無菌的NaCl溶液當(dāng)做沖洗液,進(jìn)行三次沖洗,每一次100毫升,最后一次要在沖洗液中添加1毫升試驗(yàn)的菌菌液,待過濾后將濾膜取出,把濾膜的沖洗面向上貼于卵磷脂吐溫-80的營養(yǎng)瓊脂板上,對樣品本底菌落數(shù)進(jìn)行測定。樣品的對照組:取1毫升供試液,和實(shí)驗(yàn)組方法一致,不添加試驗(yàn)菌,通過薄膜過濾方法來測定本底的菌落數(shù)。

2結(jié)果

2.1傾注法下各培養(yǎng)基對于真菌的回收率影響:7中發(fā)用化妝品中通過1∶10供試液,考察了應(yīng)用孟加拉紅的培養(yǎng)基與含5%聚山梨酯80、0.5%卵磷脂孟加拉紅培養(yǎng)基方法的適用性,得出黑曲霉以及白色念珠菌回收率為0;把1∶100供試液作為最低的稀釋級,應(yīng)用孟加拉紅的培養(yǎng)基,僅有一份檢品黑曲霉的回收率達(dá)到77%,其他結(jié)果不理想。

2.2考察薄膜過濾方法對于細(xì)菌計(jì)數(shù)方法的適用性:在1∶1000供試液下,應(yīng)用薄膜過濾方法,七件發(fā)用化妝品3株試驗(yàn)的菌株回收率均超過70%,和傾注法結(jié)果比較,沒有明顯差異;在1∶100供試液下,應(yīng)用薄膜過濾方法,所有發(fā)用化妝品大腸埃希菌回收率都超過了70%,但是金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌回收率均在70%以下,無法徹底消除抑菌的作用。

3討論

從結(jié)果總可以發(fā)現(xiàn),發(fā)用化妝品對于微生物抑菌作用比較明顯,使用薄膜過濾方法,七種發(fā)用化妝品試驗(yàn)細(xì)菌菌株回收率到超過了70%,但由于操作復(fù)雜性,不建議使用。而在酵母菌與霉菌檢測過程中,把1∶10供試液以及1∶100供試液作為最低的稀釋級時(shí),全部化妝品中黑曲霉與白色念珠菌回收率都是0,但是在1∶100供試液下,通過添加5%聚山梨酯80、0.5%卵磷脂孟加拉紅培養(yǎng)基,發(fā)現(xiàn)除C-絲質(zhì)順滑去屑洗發(fā)露中黑曲霉的回收率達(dá)到52%外,其他化妝品試驗(yàn)菌株回收率到超過了相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求,而且5%聚山梨酯80、0.5%大豆卵磷脂對于試驗(yàn)菌株生長沒有影響,和朱世真[2]報(bào)道一致。

綜上所述,在發(fā)用化妝品的微生物檢驗(yàn)過程中,應(yīng)盡量降低銅綠假單胞菌的試驗(yàn)結(jié)果中假陰性可能性,而糞大腸菌群與金黃色葡萄球菌檢測方法還需要改進(jìn)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉廣楨,徐曉潔,王德利.分析我國現(xiàn)行化妝品微生物檢驗(yàn)方法存在的問題和改進(jìn)建議[J].食品與藥品,2013,14(03):24-27.

[2]朱世真,王立芳,王尊文.大腸菌群測試片在化妝品微生物檢測中的應(yīng)用[J].中國藥師,2014,15(09):79-83

作者:孫勝平 王群林 單位:湖北省漢川市疾病預(yù)防控制中心

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