新生兒巨細胞病毒感染的臨床檢測探究范文
本站小編為你精心準備了新生兒巨細胞病毒感染的臨床檢測探究參考范文，愿這些范文能點燃您思維的火花，激發您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。
摘要：目的探討實時熒光定量聚合酶鏈反應（PCR）法檢測新生兒巨細胞病毒（CMV）在不同標本類型中的陽性檢出率。方法選取2015年1月至2016年6月該院收治的662例疑似感染CMV的新生兒作為研究對象，根據收集標本類型的不同分為尿液組（337例）、血液組（325例）。參照CMV檢測的標本要求采集標本后，按照達安基因人CMV核酸定量檢測試劑盒（PCR－熒光法）說明書進行檢測。結果檢測結果顯示，新生兒CMV感染的總陽性率為7．40％，不同標本類型CMV陽性檢出率存在差異，其中尿液陽性檢出率為8．9％，而血液陽性檢出率則為5．85％。新生兒尿液和血液CMV陽性感染拷貝數分布呈偏態分布，數據集中在103～105，幾何均數分別為3．19×104、4．75×103，兩者比較差異有統計學意義（P＝0．0246）。結論臨床檢測新生兒CMV感染，尿液標本優于血液標本檢測，其陽性檢出率更高，可更好地指導臨床醫生用藥。
關鍵詞：新生兒；巨細胞病毒感染；實時熒光定量聚合酶鏈反應；陽性率
巨細胞病毒（CMV）是新生兒產后感染最常見的病原微生物之一，可導致新生兒出現黃疸、耳聾、智力障礙等癥狀，嚴重威脅新生兒的身心健康［1］。因CMV感染通常呈無癥狀的感染，隱密性較強，早期確診CMV對新生兒的治療顯得尤為重要［2－4］。本研究選取本院收治的662例疑似感染CMV的新生兒作為研究對象，對其進行CMV核酸檢測分析，現報道如下。
1資料與方法
1．1一般資料
回顧性研究2015年1月至2016年6月來本院就診疑似感染CMV的新生兒患者662例。年齡0～120d，中位年齡76d。根據新生兒的患病情況，收集其尿液或血液標本，進行后續的核酸定量檢測。根據收集標本類型的不同分為尿液組（337例）、血液組（325例）。
1．2儀器與試劑
CMVDNA定量檢測試劑為廣州達安基因股份有限公司人CMV核酸定量檢測試劑盒（PCR－熒光法），所用擴增儀器為ABI7500實時熒光定量PCR儀（美國LifeTechnologies）。
1．3方法
嚴格按照說明書操作和PCR實驗條件具體要求。PCR擴增儀擴增，根據CMV不同拷貝數的標準品（1．0×104、1．0×105、1．0×106、1．0×107）、陰性質控品及待檢樣本的擴增曲線，觀察得出結果。
1．4統計學處理
采用GraphpadPrism軟件進行統計分析，CMVDNA平均拷貝數采用幾何均數（G＝nx1槡x2……xn）計算所得組間比較采用U檢驗。計數資料以百分數表示，采用χ2檢驗，以P＜0．05為差異有統計學意義。
2結果
2．1CMVDNAPCR擴增檢測結果4個標準品（1．0×104、1．0×105、1．0×106、1．0×107）、代表性陽性樣品（DNA拷貝數5．2×105。
2．2新生兒不同標本CMV陽性檢出率以CMVDNA拷貝數≥1×103判讀為陽性，結果發現，662例新生兒檢出CMV49例，陽性檢出率為7．40％，其中尿液標本陽性檢出率為8．9％（30／337），血液標本陽性檢出率為5．85％（19／325）。
2．3新生兒CMV陽性感染標本的拷貝數分布兩組新生兒CMV陽性感染標本的拷貝數分布均呈右偏態分布，數據大多集中在103～105，尤以103～104段的人數最多。尿液組和血液組陽性標本CMV拷貝數的幾何均數分別為3．19×104、4．75×103，兩組間差異有統計學意義（P＝0．0246）。
3討論
CMV是新生兒產后感染最常見的病原微生物之一，可在尿液、血液等廣泛傳播［5］。PCR擴增檢測是診斷CMV的標準方法之一［6］。然而在臨床檢測中CMV的檢出率始終不高。本研究擬采集新生兒尿液、血液等不同來源標本，采用實時熒光定量PCR檢測尿液、血液樣本中CMV的DNA拷貝數，探索最佳的標本選擇途徑，從而提高新生兒CMV的正確檢出率。CMV最容易侵犯的部位是腎臟、肝膽系統的管道上皮細胞，在腎小管上皮細胞內大量復制后經尿液排出，因此尿液中CMVDNA拷貝數較高［7］。沈丹等［8］在確診或高度懷疑為CMV性肝炎的兒童患者中，應用實時熒光定量PCR方法，檢測患者血清、外周血單個核細胞及3次混合尿3種標本CMVDNA的水平，結果發現尿液標本的CMV檢出率最高，定量檢測結果最高。鐘瑞芬等［9］采用實時熒光定量PCR和IgM抗體化學發光法兩種方法分別檢測新生兒尿液和血液中的CMV，結果發現尿液標本檢測結果與上述結果類似。本研究采用新生兒尿液和血液標本，發現尿液CMV檢出率較血液高，且拷貝數的幾何均數為3．19×104，顯著高于血液中CMV的拷貝數（4．75×103）一個數量級。由于新生兒的特殊性，尿液較血液更易于采集，有利于后續治療連續采集、檢測。因此，尿液是新生兒檢測CMVDNA的最佳標本選擇。早期使用更昔洛韋對免疫能力較強的新生兒進行抗CMV病毒治療，可在很大程度上減輕癥狀、降低病死率。前期研究結果顯示，CMV在感染機體后通常呈潛伏期感染，90％以上的新生兒先天性感染無任何臨床癥狀［10］。與此同時，CMVDNA檢測是確診新生兒感染CMV的最可靠方法。因此CMVDNA檢測結果的假陰性會極大地延誤新生兒患者的治療時機。本研究發現，尿液標本中CMV的陽性檢出率較血液標本高，且其平均拷貝數也較血液標本高出一個數量級，可在一定程度上降低CMV檢出假陰性的發生，進而有效地對臨床是否采取抗病毒治療給予指導意見。綜上所述，新生兒CMV感染的陽性檢出率與標本的采集途徑存在一定的相關性，尿液是新生兒CMVDNA檢測的最佳標本。采用尿液檢測新生兒CMV的感染狀況，對于臨床指導CMV的抗病毒治療，提高新生兒CMV感染的預后有很好的積極意義。
參考文獻
［1］許玲芬，孫梅，毛志芹，等．嬰兒巨細胞病毒肝炎臨床分析及更昔洛韋療效評價［J］．中國實用兒科雜志，2002，17（8）：472－474．
［2］鄧慧玲，謝燕，符佳，等．尿巨細胞病毒－DNA定量動態監測在嬰兒巨細胞病毒肝炎診治中的臨床意義［J］．現代醫藥衛生，2011，27（14）：2128－2129．
作者：張美娜；趙虎；李仁哲；唐敏英；吳琳；詹世淮；王慶華；譚建明 單位：福州總醫院泌尿外科
