小鼠鎮靜催眠的實驗研究范文

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《陜西中醫雜志》2015年第五期

1實驗方法

1．1實驗分組與給藥：實驗動物小鼠，雌雄各半，隨機分成6組，每組20只，3個給藥組灌胃給予延齡草溶液（低劑量13．4g／kg、中劑量20g／kg和高劑量30g／kg）、陽性對照組給予地西泮分散液（劑量為70mg／kg）和中藥對照組給予酸棗仁溶液（劑量為20g／kg）、陰性對照組給予相同容量的生理鹽水。

1．2直接睡眠實驗：各組動物分組和給藥處理方法同“1．4．1”項，連續灌胃7d，觀察各組小鼠的睡眠發生率、鎮靜率。以小鼠發生靜臥15s或以上時間的現象來判斷藥物有鎮靜效果，以翻正反射消失（即將小鼠置于背臥位時，1min內不能翻正）為判斷指標，表示小鼠進入睡眠狀態。實驗應在安靜、通風、室溫的環境下進行［7］。鎮靜率＝靜臥小鼠數／實驗動物數×100％；入睡率＝入睡小鼠數／實驗動物數×100％。

1．3對小鼠自主活動的影響：實驗前首先要篩選出各組小鼠的自主活動次數無顯著性差異，即選擇5min內自主活動數在120次以上的正常小鼠，并將符合條件的小鼠隨機分配到各實驗組，各組動物分組與給藥處理同“

1．1”項，末次灌胃給藥50min后，將小鼠依次放入記錄儀中，適應環境5min后，記錄5min內的自主活動次數。實驗在安靜、通風的環境中進行［7－8］。

1．4與閾下劑量戊巴比妥鈉協同鎮靜作用實驗：實驗動物分組和給藥處理方法同“1．4．1”項，連續灌胃7d，最后一次灌胃50min后，各組小鼠腹腔注射劑量為30mg／kg的戊巴比妥鈉（經預實驗測得的，90％～100％的小鼠發生翻正反射不消失的最大劑量），記錄小鼠30min內鎮靜率、入睡百分率，判斷方法同1．4．2。同時記錄入睡動物的睡眠時間（以翻正反射消失至恢復這段時間為動物睡眠時間）。實驗在安靜、通風、室溫環境下進行［7－8］。

1．5與閾上劑量戊巴比妥鈉協同催眠作用實驗：實驗動物分組和給藥處理方法同“1．4．1”項，連續灌胃7d，最后一次灌胃50min后，各組小鼠腹腔注射劑量為40mg／kg的戊巴比妥鈉（經預實驗測得的，100％的小鼠發生翻正反射消失的最小劑量），判斷方法同1．4．4，記錄動物睡眠潛伏期和睡眠時間。實驗在安靜、通風、室溫環境下進行［7－8］。

1．6統計學方法：對睡眠時間、睡眠潛伏期等計量資料以均數±標準差（珚x±s）表示，組內采用方差分析，組間比較均采用兩樣本均數的t檢驗；對睡眠延長率、入睡率等計數資料采用χ2檢驗。

2實驗結果

2．1直接睡眠實驗結果直接睡眠實驗結果見表1，表明延齡草給藥組與陽性對照組均有明顯的鎮靜作用，但無睡眠現象發生，入睡率均為0，各組間無明顯差異。

2．2對小鼠自主活動的影響實驗結果如表2所示，延齡草各給藥組具有顯著的鎮靜作用。與陰性對照組相比，低劑量與中劑量給藥組可顯著減少小鼠的自主活動能力（P＜0．05），高劑量藥物組可極顯著減少小鼠的自主活動能力（P＜0．01），鎮靜催眠效果與酸棗仁組相當。

2．3延齡草提取液與閾下劑量戊巴比妥鈉協同鎮靜作用的實驗結果由表3可見，與陰性對照生理鹽水組相比，各給藥組、中藥酸棗仁組、陽性對照地西泮組均顯著增加小鼠的入睡百分率，顯著縮短小鼠的睡眠潛伏期，且均能顯著延長睡眠時間，說明各組受試藥物有協同戊巴比妥鈉鎮靜作用。與陽性對照地西泮相比，低劑量組的藥效弱于對照組，且有顯著性意義（P＜0．05），高劑量給藥組、中藥酸棗仁組與地西泮組藥效相近。

2．4延齡草提取液與閾上劑量戊巴比妥鈉協同催眠作用的實驗結果由表4可見，各給藥組、中藥酸棗仁組、陽性對照地西泮組對閾上劑量戊巴比妥鈉的催眠作用表現出協同作用，可縮短小鼠睡眠潛伏期，延長睡眠時間，且隨著劑量的增加，小鼠睡眠潛伏期縮短、睡眠時間延長。

3討論

睡眠是人正常的生理現象，能使機體復原、整合和鞏固記憶環節，睡眠質量問題直接影響著人的身心健康、正常的生活和工作。臨床上多采用巴比妥類和苯二氮卓類藥物進行治療，長期服用會產生許多副作用，如焦慮、幻覺、恐懼、妄想及驚厥等。中醫學認為引起失眠主要有情志失常、過勞過逸、飲食不節及病后體虛等病因。在中醫辨證論治思想指導下應用中藥治療失眠癥，如應用天麻、酸棗仁、知母等單味或復方，具有鎮靜、催眠、抗眩暈、腦保護等作用［9］，同時中藥可減少鎮靜催眠藥副作用及成癮性。陜西產延齡草是“太白七藥”之一，又名芋兒七、獅兒七。本實驗通過不同劑量延齡草提取液對小鼠自主活動能力測定實驗、對閾下劑量及閾上劑量戊巴比妥鈉鎮靜催眠作用的協同效果實驗與研究，發現延齡草提取液有抑制小鼠自主活動的能力，對戊巴比妥鈉的鎮靜催眠作用有協同功效，表現出明顯的鎮靜睡眠藥理作用。后續研究中我們將對其鎮靜催眠作用與腦保護方面的主要藥效物質基礎進行研究，探討其物效關系，同時促進對該藥材的開發利用。

作者：孫艷平汪興軍張彥單位：西安醫學院