ABO血型表現性檢測的應用范文

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《刑事技術雜志》2014年第二期

1方法

取0．3cm2血斑或唾液斑，剪碎后置于試管中；在試管中加200μL樣品稀釋液，溶解5min，震蕩混勻；檢驗前將試劑條從袋子中取出，如有冷藏保存的，必須平衡到室溫，平置于臺面上；吸取100μL待檢樣本，加入到試劑條的加樣孔中，10min后觀察結果。

2結果

72份志愿者的血斑和唾液斑經檢驗，均得出了與原先一致的血型結果。2份陳舊的已知血型的案件檢材（18年前血斑）也得到了一致的血型檢驗結果（見圖1、圖2）。

3討論

該膠體金試劑條是利用免疫組化的方法檢測abo血型表現型，該方法出結果快而且直觀。待檢樣品經樣品稀釋液浸泡溶解后，將稀釋液滴加到試劑條的加樣孔中，樣品中的A型、B型抗原與試劑條上膠體金標記的抗A、抗B抗體發生特異性結合，形成攜帶膠體金的抗原抗體復合物，在層析作用下，該復合物沿硝酸纖維素膜試紙向前移動，當移動至底物區時，抗原抗體復合物被硝酸纖維素膜上預埋的特異性底物所捕獲、富積，由于膠體金的特殊作用，在試劑條上直接顯示紅色陽性標記帶，如果是AB型血，出現A標記帶和B標記帶；A型血只有A標記帶；B型血只有B標記帶；O型血則沒有標記帶。

目前，隨著DNA技術的發展，ABO血型表現型的檢驗在很多法醫物證實驗室都已經被淘汰，這是因為案件現場中提取到的生物斑跡比較陳舊，而且還可能有污染，這些都會使血型物質降解而無法得到準確的ABO血型表現型。過去使用的血凝集試驗，針對的是5％紅細胞懸液或全血，若紅細胞懸液濃度過低，那么微弱、細小的凝集就看不到，從而造成假陰性結果。另外，針對分泌型的吸收試驗、解離試驗、混合凝集試驗等方法，通過抗血清效價的變化來判斷，所以抗血清的效價必須與檢材中所含凝集原的量相適應，否則就會造成錯誤判型，而且操作復雜、技術條件要求高，所以目前該方法也已經被淘汰。

本研究中的膠體金試劑條以及自制的樣品稀釋液可以快速、準確獲得血斑、唾液斑的ABO血型表現型，檢驗時間短，不影響后續的DNA檢驗；而且能夠適用于陳舊的生物學斑跡。因此可以適用于法庭科學中的日常檢案。

作者：郝金萍金鑫周毅尹文寧楊智單位：公安部物證鑒定中心海南省公安廳刑警總隊北京豐臺區公安司法鑒定中心天津市公安局