縮泉丸石油醚部位縮尿的藥理作用范文

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[摘要]目的:考察縮泉丸石油醚部位"縮尿"藥理作用。方法:通過預實驗篩選合格的SD大鼠30只分為模型組、全粉組、醇水雙提組、石油醚部位組和非石油醚部位組，每組6只，各組按3g/kg體積灌胃給藥1周，模型組給予等體積的蒸餾水，末次給藥前動物禁食不禁水18h，給藥1h后按50ml/kg灌胃生理鹽水，記錄首次排尿時間、6h內每小時排泄率和總排泄率;利用生物機能實驗系統記錄縮泉丸石油醚部位對離體豚鼠膀胱肌張力的影響。結果:水負荷實驗結果表明，與模型組相比，醇水雙提組、石油醚部位組均能顯著延長首次排尿時間，石油醚部位組能顯著降低總排泄率;離體豚鼠膀胱肌張力實驗結果表明，石油醚部位組能夠顯著降低ACH激動的豚鼠膀胱逼尿肌的張力和振幅。結論:推斷縮泉丸石油醚部位為其"縮尿"藥效部位。

[關鍵詞]縮泉丸;石油醚部位;縮尿;尿量;膀胱逼尿肌

"縮泉丸"始載于《婦人良方》，由益智仁、山藥和烏藥組成，功效為補腎縮尿，常用于腎虛所致的小便頻數、夜間遺尿等。課題組前期通過縮泉丸君藥益智仁對水負荷多尿模型和腎陽虛模型尿量和首次排尿時間的研究發現其主要藥效部位為石油醚部位;且以小鼠水負荷多尿模型實驗的尿量為指標，通過譜效關系法對縮泉丸縮尿作用的物質基礎做了初步研究，灰關聯度結果表明，與縮尿作用關聯較大的峰集中在極性比較小的部位。在此基礎上，本實驗通過在體大鼠水負荷多尿模型實驗對藥效部位進行篩選，同時運用離體肌張力實驗對縮泉丸縮尿作用部位進行驗證，研究縮泉丸"縮尿"藥效物質基礎，為縮泉丸的臨床應用提供參考。

1材料

1．1試驗

藥物益智仁為姜科山姜屬植物益智AlpiniaoxyphyllaMiq．的干燥成熟果實(批號:20150312)，烏藥為樟科植物烏藥Linderaaggregata(Sims)Kosterm．的干燥塊根(批號:20150314)，山藥為薯蕷科植物薯蕷DioscoreaoppositaThunb．的干燥根莖(批號:20150305)，購于荷花池藥材市場，經成都中醫藥大學生藥教研室盧先明教授鑒定均符合中國藥典2015年版(一部)收載品種?？s泉丸全粉:將鹽炙益智仁與其余2味藥材粉碎過8號篩，按藥典規定1∶1∶1混合為縮泉丸炙品，臨用時用0．5%CMC-Na配制成縮泉丸炙品(0．3g/ml)的混懸液。醇水雙提液:將粉碎過篩后的縮泉丸全粉用8倍量95%乙醇回流提取2次，每次1h，過濾，濾液合并，減壓濃縮，備用;藥渣加水煎煮二次，每次1h，濾過，濾液合并，減壓濃縮。合并兩次濃縮液，配制成含生藥0．3g/ml濃度的藥液。石油醚部位:按縮泉丸全粉項下處理后，分別粉碎過1號篩，用8倍量95%乙醇回流提取2次，每次1h，過濾，濾液合并，減壓濃縮，備用;藥渣加水煎煮二次，每次1h，濾液合并，減壓濃縮。合并兩次濃縮液。濃縮液用石油醚(60～90℃)萃取至上層無色，所得石油醚部位減壓回收后于水浴(60℃以下)揮至無醚味。加入2%吐溫將樣品配制成含生藥0．3g/ml濃度的藥液乳劑，每100ml藥液加鹽0．02g。非石油醚部位:用石油醚萃取后剩余的藥液稀釋為含生藥0．3g/ml濃度的藥液。鹽溶液:稱取0．2g鹽溶于100ml蒸餾水;吐溫溶液:稱取吐溫-802g，溶于100ml蒸餾水。

1．2動物

清潔級SD雄性大鼠，體重(220±30)g，動物許可證號SCXK(川)2013-24;清潔級豚鼠，雌雄不拘，體重(370±30)g，合格證號SCXK(川)2015-030，由成都達碩生物科技有限公司提供。

1．3試劑

氯化乙酰膽堿(上海源葉生物科技有限公司，批號:201503)。

1．4儀器

RE-52A旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠);BL-420S型生物機能實驗系統、JH-2型肌張力傳感器、HV-4型離體組織器官恒溫灌流系統(成都泰盟科技有限公司)。

1．5方法

1．5．1水負荷多尿模型造模方法及尿量收集清潔級SD大鼠，購回后適應性飼養1周。實驗前18h禁食不禁水，仿Aston法對動物進行篩選，即按體重灌胃生理鹽水22ml/kg，使實驗動物體內水平衡。收集2h尿液，凡尿量超過40%水負荷者為合格。取篩選合格的大鼠30只，按尿量、體重搭配分成模型組、全粉組、醇水雙提組、石油醚部位組和非石油醚部位組5組，每組6只動物。各組按3g/kg體積灌胃給藥1周，模型組給予等體積的蒸餾水，末次給藥前動物禁食不禁水18h，給藥1h后按50ml/kg灌胃生理鹽水，擠盡膀胱余尿，置于大鼠代謝籠中記錄首次排尿時間與6h內每小時尿量，并計算6h內每小時排泄率和總排泄率。每小時排泄率(%)=每小總尿量/水負荷量×100%總排泄率(%)=6h總尿量/水負荷量×100%1．5．2離體豚鼠膀胱肌條制備和實驗準備猛擊豚鼠頭部致昏，快速取出膀胱，并用低溫營養液漂洗干凈，存放于通有95%O2+5%CO2混合氣體的低溫營養液中，備用。從三角區下橫切，將膀胱主體部分沿一側面縱向切開，沿肌纖維走向切取2條縱行肌條(8mm×3mm)。將肌條安置在盛有30ml、37℃的Krebs液平滑肌槽中，持續通以95%O2+5%CO2混合氣體。用4號手術線系好肌條，肌條的一端固定在肌槽底部的不銹鋼彎鉤上，另一端與肌張力傳感器連接，傳感器連接生物機能實驗系統記錄肌條收縮時的平均張力和頻率。給予肌條負荷1g張力，在37℃的Krebs營養液中溫育30min，待肌條自發活動平穩后開始實驗，記錄2min正常收縮曲線［11～13］。1．5．2．1對正常豚鼠離體膀胱逼尿肌活動的影響將實驗動物分為4組(4只/組):正常組、吐溫溶液組、石油醚部位組和鹽溶液組。石油醚部位組和鹽溶液組加藥時采用累計加藥法，加藥間隔為1min，累積濃度分別為50、100、200μl。待豚鼠膀胱肌條自發活動平穩，記錄2min正常收縮曲線。正常組不加任何藥物，其余組分別給予相對應的藥液，記錄不同給藥劑量1min的收縮曲線，以給藥前后膀胱肌條收縮的平均張力、振幅計算變化百分率。張力變化百分率(%)=(給藥后張力平均值－給藥前張力平均值)÷給藥前張力平均值×100%振幅變化百分率(%)=(給藥后振幅－給藥前振幅)÷給藥前振幅×100%振幅變化=最大張力－最小張力1．5．2．2對激動劑作用的豚鼠膀胱逼尿肌活動的影響根據前期實驗基礎，縮泉丸對M受體有一定的作用，所以實驗選擇氯化乙酰膽堿(ACH，M受體興奮劑，濃度1．0×10-5mol/L)作為膀胱肌條平滑肌興奮劑，再通過考察縮泉丸石油醚提取物對ACH引起的豚鼠膀胱逼尿肌興奮的抑制作用，以驗證縮泉丸石油醚部位的藥理作用。ACH+石油醚部位:待離體膀胱逼尿肌自發活動平穩后，加入10μmol/L的ACH后1min，加入石油醚部位混懸液;ACH:待離體膀胱逼尿肌自發活動平穩后，加入10μmol/L的ACH后，不加任何藥物，記錄5min收縮曲線。ACH+吐溫溶液:待離體膀胱逼尿肌自發活動平穩后，加入10μmol/L的ACH后1min，加入吐溫溶液;ACH:待離體膀胱逼尿肌自發活動平穩后，加入10μmol/L的ACH后1min，不加任何藥物，記錄5min收縮曲線。ACH+鹽溶液:待離體膀胱逼尿肌自發活動平穩后，加入10μmol/L的ACH后1min，加入鹽溶液;ACH+N陰性對照:待離體膀胱逼尿肌自發活動平穩后，加入10μmol/L的ACH后1min，不加任何藥物，記錄5min收縮曲線。

2結果

2．1對水負荷多尿模型大鼠尿量的影響

結果與模型組相比，全粉組、醇水雙提組、石油醚部位組均能顯著延長首次排尿時間，石油醚部位組能顯著降低6h總排泄率。醇水雙提組、石油醚部位及非石油醚部位組能顯著降低0～1h時段尿量，醇水雙提組能提高1～2h時段尿量，其余時段無顯著性差別

2．2對離體豚鼠膀胱逼尿肌的影響

2．2．1對正常豚鼠離體腸肌活動的影響結果與正常組相比，給吐溫組、鹽溶液組和石油醚部位組張力和振幅變化無顯著差異，表明助溶劑吐溫、鹽溶液和石油醚部位對正常豚鼠膀胱逼尿肌無作用2．2．2對ACH激動的豚鼠離體腸肌活動的影響加入ACH激動劑后，與正常組、吐溫與鹽溶液張力變化與振幅變化無顯著性差異。表明助溶劑吐溫與鹽溶液對ACH激動的豚鼠膀胱逼尿肌無作用，石油醚部位組能夠顯著降低ACH激動的豚鼠膀胱逼尿肌的張力和振幅3討論縮泉丸具有補腎縮尿的功效，臨床常用于治療小兒遺尿、夜尿癥、尿失禁、尿頻、尿道綜合征等。研究表明，縮泉丸可使大鼠尿中Na+、Cl-排出減少，尿K+排出增加，影響下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸;增加血中血管緊張素、腎素、醛固酮水平，影響腎素-血管緊張素-醛固酮系統;增加腎陽虛大鼠水通道蛋白2的表達，增加水的重吸收，濃縮尿液等調節機體水液代謝而減少尿量。同時，縮泉丸能通過抑制M受體，抑制儲尿期膀胱逼尿肌的收縮力，延長排尿周期。本實驗通過對大鼠水負荷多尿模型尿量的影響篩選縮泉丸藥效部位，同時利用藥物對離體豚鼠膀胱肌條的影響，驗證縮泉丸石油醚部位的藥理作用。通過水負荷多尿模型大鼠尿量的影響實驗結果表明，縮泉丸石油醚部位能減少6h總尿量，說明縮泉丸石油醚部位具有“縮尿”的功能。能延長首次排尿時間，降低0～1h時排尿量，說明縮泉丸石油醚部位能調節膀胱逼尿肌的收縮舒張，延長排尿周期。離體豚鼠膀胱逼尿肌的影響實驗結果表明，吐溫與鹽溶液對正常和ACH激動的豚鼠膀胱逼尿肌均無抑制作用，說明溶劑與輔料鹽溶液對膀胱逼尿肌無影響，而縮泉丸石油醚部位能降低ACH激動的豚鼠膀胱逼尿肌的張力和振幅，說明縮泉丸石油醚部位對ACH引起的逼尿肌興奮有一定的抑制作用，且縮泉丸石油醚部位對膀胱運動抑制作用的靶點在M受體，但其具體的機制還需要進一步的深入研究。

參考文獻

1國家藥典委員會．中國藥典，一部．化學工業出版社，2015∶1705

2湯曉娟，袁艿君，杜家津，等．運用縮泉丸加減治療夜尿的臨床經驗．江西中醫藥大學學報，2017;29(3)∶24～26

3武進華．縮泉膠囊聯合醋酸去氨加壓素治療兒童原發性遺尿效果觀察．現代中西醫結合雜志，2017;26(8)∶867～869

4高改宏．縮泉丸配以菖蒲、遠志治療小兒遺尿．內蒙古中醫藥，2016;35(5)∶40～41

5吳珊珊，胡昌江，潘新，等．益智仁鹽炙前后對腎陽虛多尿大鼠AQP-2與AVPR-V2表達的影響．中國醫院藥學雜志，2013;19(11)∶261～263

6李文兵，胡昌江，吳珊珊，等．益智仁鹽炙對水負荷多尿模型大鼠縮尿作用的影響．中國實驗方劑學，2013;19(11)∶261～263

7李文兵，胡昌江，吳珊珊，等．益智仁鹽炙前后對腎陽虛多尿大鼠腎臟改善作用研究．中成藥，2012;34(9)∶1767～1769

8吳珊珊，李夢琪，鄭凱旋，等．益智仁鹽炙有效部位中圓柚酮大鼠在體腸吸收．中藥藥理與臨床，2016;32(05)∶65-68

9李夢琪，吳珊珊，龔曉猛，等．益智仁鹽炙前后分別組成縮泉丸的縮尿部位指紋圖譜比較．中國實驗方劑學雜志，2017;23(04)∶16～19

10魏偉，吳希美，李元建．藥理實驗方法學．人民衛生出版社，第4版，2010∶1223

11任鈞國，王建業，李軍梅，等．前列舒通膠囊對大鼠膀胱收縮功能的影響．中成藥，2014;36(10)∶2181～2183

12王占慶，王金萍，許景峰，等．硝酸異山梨酯對大鼠膀胱逼尿肌的舒張作用．中國臨床藥理學與治療學，2011;16(11)∶1248～1251

13曾俊偉，余梅，駱亞莉，等．大黃對豚鼠離體膀胱逼尿肌條收縮活動影響的實驗研究．中藥藥理與臨床，2005;21(1)∶27～29

14操紅纓，吳清和，黃萍，等．縮泉丸對腎陽虛多尿大鼠尿BUN、Cr、Na+、K+和Cl-離子濃度的影響，中醫藥臨床雜志，2009;21(2)∶117～118

15李淑雯，胡律江，吳清和，等．縮泉丸對腎虛多尿大鼠下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸的影響，中國實驗方劑學雜志，2011;17(16)∶125～127

16操紅纓，吳清和，黃萍，等．縮泉丸對腎陽虛多尿大鼠腎臟AQP-2mRNA與AVPR-V2mRNA表達的影響，中藥材，2009;32(6)∶926～928

17吳珊珊，李夢琪，龔曉猛，等．益智仁鹽制前后組成縮泉丸對下丘腦-垂體-腎上腺皮質系統與β3-AR、M3R表達的比較，中國醫院藥學雜志，2017;37(13)∶1221～1223

作者：吳珊珊 何席呈 殷 海 胡 麟 李 瑋 胡昌江 單位：貴陽中醫學院，貴陽