P2X7受體對(duì)小鼠骨癌痛的影響范文

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《生理學(xué)報(bào)》2016年第二期

摘要：

癌痛是臨床晚期惡性腫瘤患者常見的臨床表現(xiàn)之一。其中，以肺癌、乳腺癌和前列腺癌等骨轉(zhuǎn)移引起疼痛尤為嚴(yán)重。p2x7受體是ATP門控離子通道型嘌呤能受體的一個(gè)亞型，在脊髓背角主要表達(dá)在膠質(zhì)細(xì)胞。P2X7受體激活可以促進(jìn)膠質(zhì)細(xì)胞釋放多種炎癥介質(zhì)，介導(dǎo)脊髓中樞敏化。該受體在炎癥痛及神經(jīng)病理性疼痛中的作用已多有報(bào)道，但在癌痛中的作用尚有爭議。本研究采用C57BL/6J小鼠股骨骨髓腔內(nèi)接種Lewis肺癌細(xì)胞所誘導(dǎo)的骨癌痛小鼠模型，分析對(duì)比了野生型小鼠和P2X7受體基因敲除(P2rx7/)小鼠骨癌痛的發(fā)生、發(fā)展。野生型C57BL/6J小鼠股骨骨髓腔內(nèi)接種Lewis肺癌細(xì)胞后，患側(cè)后肢分別在第7和第14天開始出現(xiàn)明顯的觸誘發(fā)痛和熱痛過敏，并呈進(jìn)行性加重；CatWalk步態(tài)分析顯示骨癌第21和28天，小鼠患側(cè)腳印面積明顯減小，站立時(shí)相持續(xù)時(shí)間縮短，舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間顯著延長；組織病理學(xué)結(jié)果顯示受累骨骨髓腔有大量腫瘤細(xì)胞浸潤，骨髓質(zhì)正常結(jié)構(gòu)消失，伴有髓質(zhì)骨和皮質(zhì)骨的破壞。與研究設(shè)計(jì)時(shí)的預(yù)期相反，P2rx7/小鼠接種瘤細(xì)胞后，患肢痛行為檢測結(jié)果與野生型小鼠相似，甚至在CatWalk步態(tài)分析檢測值變化發(fā)生的時(shí)間上較野生小鼠有所提前。這與本研究組前期在大鼠骨癌痛模型觀察到的阻斷P2X7受體明顯對(duì)抗骨癌痛的結(jié)果完全不同，提示P2X7受體在大、小鼠骨癌痛中可能發(fā)揮不同的作用，并再次提示疾病動(dòng)物模型上的研究結(jié)果與人類疾病機(jī)理之間還存在巨大差異。

關(guān)鍵詞：

骨癌痛；小鼠；P2X7受體；基因敲除；小膠質(zhì)細(xì)胞

癌痛即惡性腫瘤所引起的疼痛，是慢性痛中最嚴(yán)重也最難以控制的疼痛之一。許多常見的腫瘤如乳腺癌、肺癌、前列腺癌等容易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，約有75%~95%的轉(zhuǎn)移性骨癌患者伴有嚴(yán)重疼痛[1]，極大降低了患者的生活質(zhì)量，也給臨床治療帶來很多困擾。在目前常用的“三階梯”癌痛管理治療手段下，仍有45%的患者疼痛得不到有效控制[2,3]。因此，揭示癌痛發(fā)生機(jī)理，尋求更有效的緩解癌痛方法成為迫切需要解決的問題。隨著多種模擬臨床骨轉(zhuǎn)移瘤動(dòng)物模型的建立，對(duì)骨癌痛的機(jī)理研究成為可能[4]。ATP作為重要的神經(jīng)遞質(zhì)[5]和膠質(zhì)遞質(zhì)[6]，在脊髓傷害性信息傳遞中起關(guān)鍵性作用[7,8]。嘌呤能離子通道型受體是ATP門控的離子通道受體家族成員，在脊髓優(yōu)勢地表達(dá)在小膠質(zhì)細(xì)胞[9,10]。本研究組以往的研究顯示，神經(jīng)損傷或嗎啡鎮(zhèn)痛耐受顯著上調(diào)大鼠脊髓P2X7受體表達(dá)，活化脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞；阻斷P2X7受體可抑制神經(jīng)病理性痛和嗎啡耐受行為，提示其參與神經(jīng)病理性疼痛和嗎啡鎮(zhèn)痛耐受的發(fā)生[10–12]。來自其它實(shí)驗(yàn)室的研究也一致性揭示，脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的P2X7受體廣泛參與炎癥痛和神經(jīng)病理性痛的發(fā)生[13–15]。最近，本研究組在Walker256乳腺癌細(xì)胞誘導(dǎo)的大鼠骨癌痛模型上觀察到，P2X7受體介導(dǎo)的脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞激活對(duì)進(jìn)展期骨癌痛的維持(而不是發(fā)生)起重要作用，提示了P2X7受體在骨癌痛中的作用與炎癥痛和神經(jīng)病理性痛的差異[16]。更為有趣的是，在4T1乳腺癌細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠骨癌痛模型，Hansen等發(fā)現(xiàn)P2X7受體缺陷的C57BL/6-BALB/cJ雜交小鼠表現(xiàn)出對(duì)骨癌痛的易感[17]，提示該受體在不同種屬骨癌痛模型中的作用可能相反。考慮到Hansen等使用的4T1乳腺癌細(xì)胞只能在BALB/cJ小鼠成瘤，而P2X7受體基因敲除(P2rx7/)小鼠是C57BL/6背景的，通過兩種品系小鼠雜交獲得的P2rx7/小鼠可能存在P2X7受體的剪切突變體[P2X7(k)][17–19]，該突變體在脊髓中有大量表達(dá)，可能代償P2X7受體的功能。為進(jìn)一步明確P2X7受體在小鼠骨癌痛中的作用，本研究采用Lewis肺癌細(xì)胞在C57BL/6J背景的P2rx7/小鼠誘導(dǎo)骨癌痛，一方面不存在P2X7(k)的代償作用，另一方面也避免了乳腺癌細(xì)胞更適合接種到雌鼠的性別局限性。我們通過建立C57BL/6J小鼠骨癌痛模型，檢測P2rx7/小鼠在骨癌痛發(fā)生、發(fā)展過程中的行為學(xué)變化，以期為揭示P2X7受體在骨癌痛中的作用提供新的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物6~8周齡C57BL/6J小鼠(雌雄不拘)，購自中國科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)SCXF(滬)2007-2005。P2rx7/小鼠購自TheJack-sonLab。飼養(yǎng)環(huán)境保持12h/12h明暗間隔的人工晝夜節(jié)律，自由攝食和飲水。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行的所有研究行為均嚴(yán)格遵照國際疼痛研究學(xué)會(huì)的相關(guān)動(dòng)物保護(hù)及使用規(guī)定，并獲得復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2主要儀器vonFrey纖毛(Stolting公司，美國)，336型輻射熱測試儀，CatWalk步態(tài)分析系統(tǒng)。

1.3小鼠股骨癌痛模型制備

1.3.1Lewis肺癌細(xì)胞的培養(yǎng)Lewis肺癌細(xì)胞購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫。將細(xì)胞貼壁培養(yǎng)于含10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基(Gibco公司，美國)中，置于含5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱(Thermo公司，美國)中培育，每1~2天進(jìn)行1:2傳代。收集細(xì)胞時(shí)，舍棄培養(yǎng)基，用0.125%胰蛋白酶消化貼壁細(xì)胞。1min后用含血清的培養(yǎng)基終止酶反應(yīng)，1000r/min離心5min，沉淀溶于PBS制成細(xì)胞懸液。取5~10μL細(xì)胞懸液計(jì)數(shù)，密度達(dá)到2×108個(gè)/mL方可使用。操作時(shí)將細(xì)胞置于冰上，2h內(nèi)完成細(xì)胞接種，以保持癌細(xì)胞活性。

1.3.2細(xì)胞接種小鼠腹腔注射4%戊巴比妥鈉(100mg/kg)麻醉。小鼠仰臥位，左側(cè)后肢剃毛，用絡(luò)合碘和酒精消毒皮膚。彎曲小鼠膝關(guān)節(jié)，可見白色髕韌帶。用4號(hào)針頭繞過髕韌帶，從近髁間窩位置進(jìn)針，按股骨長軸方向鉆孔進(jìn)入股骨骨髓腔后，換用微量進(jìn)樣器(依次吸取1μL空氣+2μL明膠海綿溶液+1μL空氣+5μL腫瘤細(xì)胞)向骨髓腔內(nèi)接種腫瘤細(xì)胞(1×106個(gè))，明膠封口，留針片刻后退出針頭，無菌棉簽沾生理鹽水清洗傷口，酒精棉球擦拭傷口處進(jìn)行消毒。對(duì)照組用PBS代替腫瘤細(xì)胞，其余操作均相同。

1.4行為學(xué)測試

1.4.1vonFrey測試用vonFrey法測定小鼠對(duì)機(jī)械刺激誘發(fā)的縮爪反應(yīng)閾值，其原理是利用不同克數(shù)的纖毛壓力作用于小鼠腳掌中心，以引起小鼠縮爪反應(yīng)的最小克數(shù)作為小鼠PWT。將小鼠置于8.8cm×8.8cm×4.4cm的有機(jī)玻璃盒內(nèi)，放在間距2mm的金屬網(wǎng)格之上，室溫控制在(23±2)℃，保持環(huán)境安靜。測試前3天將小鼠放置于測試環(huán)境適應(yīng)，每天至少2h。測試時(shí)，提前將小鼠放入測試環(huán)境0.5h，按照壓力遞增順序依次使用從0.16g到4g的vonFrey纖毛，對(duì)小鼠后爪掌中心后方位置進(jìn)行刺激，以纖毛適度彎曲作為受力標(biāo)準(zhǔn)。每種強(qiáng)度的纖毛刺激5次，每次刺激持續(xù)3s，刺激間隔30s以上，以引起快速反射性縮爪反應(yīng)作為有效反應(yīng)。至少3次能夠引起有效反應(yīng)的vonFrey纖毛強(qiáng)度作為小鼠PWT。

1.4.2Hargreaves測試采用Hargreaves法測定小鼠對(duì)輻射熱刺激誘發(fā)的縮爪反應(yīng)潛伏期，其原理是利用鹵鎢絲燈發(fā)出的輻射熱刺激小鼠腳掌中心，引起小鼠縮爪反應(yīng)，從熱刺激開始到小鼠產(chǎn)生縮爪反應(yīng)的時(shí)間定義為PWL。測試使用8.8cm×8.8cm×4.4cm的有機(jī)玻璃盒，置于距離桌面30cm高的透明雙層玻璃平臺(tái)上，玻璃平臺(tái)夾層中有電熱金屬絲對(duì)平臺(tái)進(jìn)行加熱，維持實(shí)驗(yàn)動(dòng)物足底溫度恒定。室溫控制在(23±2)℃，保持環(huán)境安靜。測試前3天將小鼠放置于測試環(huán)境適應(yīng)，每天至少2h。正式測試時(shí)，提前將小鼠放入測試環(huán)境0.5h，用輻射熱刺激小鼠腳掌中心，刺激器自動(dòng)記錄從刺激開始至動(dòng)物反射性縮爪的時(shí)間。為了防止測試對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成實(shí)質(zhì)性的損傷，設(shè)定每次刺激時(shí)間上限為15s，同一只后爪每兩次測試之間的間隔不少于10min，以三次測量的平均值作為該動(dòng)物的PWL。

1.4.3CatWalk步態(tài)分析使用CatWalk步態(tài)分析系統(tǒng)對(duì)運(yùn)動(dòng)中的小鼠進(jìn)行步態(tài)測定分析。該裝置主要由內(nèi)置熒光燈的上蓋、玻璃底板通道和高頻攝像頭組成。測試前，小鼠預(yù)先置于測試環(huán)境下30min。室溫控制在(23±2)℃，室內(nèi)開紅色光照，保持環(huán)境安靜。測試時(shí)，將小鼠輕輕放在CatWalk通道的起始端，通道寬度設(shè)置為小鼠寬度的1.5倍，由小鼠自行穿過走廊，選取20cm的距離進(jìn)行記錄，通過時(shí)長約1~2s。當(dāng)小鼠的腳掌與玻璃平板的表面接觸時(shí)，光線向下反射，使得下方的高速攝像頭捕捉到清晰的腳印圖像傳送到計(jì)算機(jī)，通過相應(yīng)程序進(jìn)行分析，獲得小鼠雙側(cè)腳掌接觸底板的腳印面積、站立時(shí)相持續(xù)時(shí)間(standphase，小鼠腳掌每次接觸底板的時(shí)間)和舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間(swingphase，小鼠腳掌兩次接觸底板的間隔)。在一次測試中，將站立和舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間分別求平均值，即為該次測試中小鼠某側(cè)腳的站立和舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間，每只小鼠在一次測試中至少重復(fù)3次。腳印面積在一定程度上反映行走過程中肢體的承重狀態(tài)；站立時(shí)相持續(xù)時(shí)間和舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間與受累側(cè)肢體的疼痛和動(dòng)物的保護(hù)性行為相關(guān)[20]。合格的測試需滿足：腳印數(shù)≥10個(gè)，動(dòng)物走動(dòng)時(shí)間在0.5~5s，速度方差小于40。

1.5組織學(xué)檢測骨癌第28天，行為檢測結(jié)束后，隨機(jī)選取部分骨癌痛小鼠過量麻醉處死，取雙側(cè)后肢股骨，放入4%多聚甲醛固定，經(jīng)脫鈣(4天)、脫水(2天)、透明、石蠟包埋、切片(5μm厚)、貼片、脫蠟、HE染色、脫水透明和封片等步驟后，于顯微鏡下觀察股骨骨質(zhì)破壞和腫瘤細(xì)胞生長情況，并用CCD采集圖像。

1.6統(tǒng)計(jì)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以mean±SEM表示。由于存在處理方法和時(shí)間點(diǎn)雙重因素，均值間差異的顯著性檢驗(yàn)采用雙因素方差分析和Holm-Sidak兩兩比較，并定義P<0.05為顯著性界值。

2結(jié)果

2.1小鼠骨癌誘發(fā)痛覺敏化的時(shí)間過程瘤細(xì)胞接種后14~28天，小鼠術(shù)側(cè)后肢出現(xiàn)明顯的熱痛過敏，與假手術(shù)組相比差異顯著。與熱痛過敏相比，機(jī)械刺激引起的觸誘發(fā)痛在腫瘤小鼠出現(xiàn)較早，瘤細(xì)胞接種后7天即出現(xiàn)明顯的觸誘發(fā)痛，持續(xù)至28天。腫瘤小鼠對(duì)側(cè)后肢對(duì)熱刺激和機(jī)械刺激的反應(yīng)閾值在各檢測時(shí)間點(diǎn)間無顯著變化(圖1C，D)。進(jìn)一步，我們通過CatWalk步態(tài)分析對(duì)骨癌小鼠行走時(shí)患側(cè)腳印面積、站立和舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間等進(jìn)行了檢測。如圖2顯示，在骨癌第21和28天，與對(duì)側(cè)相比，患側(cè)腳印面積和站立時(shí)相持續(xù)時(shí)間顯著縮短，舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間明顯延長。雙因素方差分析顯示明顯的同、對(duì)側(cè)差異小鼠骨癌第28天，行為檢測結(jié)束后，取術(shù)側(cè)股骨病理學(xué)切片檢測腫瘤細(xì)胞浸潤和骨質(zhì)破壞情況。HE染色結(jié)果顯示，術(shù)側(cè)股骨遠(yuǎn)端腫瘤細(xì)胞大量浸潤，骨髓質(zhì)破壞，正常的骨小梁結(jié)構(gòu)丟失(圖3)。

2.2P2X7受體基因敲除對(duì)小鼠骨癌痛發(fā)展的影響如前所述，P2X7受體在炎癥痛和神經(jīng)病理性痛發(fā)生中扮演重要角色，但在癌痛條件下，依接種的瘤細(xì)胞系和動(dòng)物種屬不同，P2X7受體的作用顯示出相互矛盾的結(jié)果。本研究在P2rx7/小鼠進(jìn)一步觀察Lewis肺癌細(xì)胞股骨骨髓腔接種誘導(dǎo)骨癌痛敏行為發(fā)生、發(fā)展的時(shí)間過程。與我們的預(yù)期相反，P2rx7/小鼠在腫瘤接種后。

3討論

P2X7受體已被廣泛證明參與慢性痛的中樞敏化過程[12,21]。2005年，Chessell等研究者發(fā)現(xiàn)在炎癥痛和神經(jīng)病理性痛動(dòng)物模型中，P2rx7/小鼠的痛覺敏化行為明顯減弱[22]。本實(shí)驗(yàn)室前期的工作也顯示，大鼠鞘內(nèi)給予P2X7受體抑制劑或siRNA敲減脊髓背角P2X7受體明顯對(duì)抗嗎啡鎮(zhèn)痛耐受[10,11]和高頻刺激坐骨神經(jīng)引起的痛覺敏化行為[12]。然而，骨癌痛作為一種機(jī)制復(fù)雜而獨(dú)特的慢性痛，P2X7受體在其中的作用尚有爭議[16,17]。本研究采用C57BL/6J背景的野生型和P2rx7/小鼠，在股骨骨髓腔內(nèi)接種Lewis肺癌細(xì)胞建立小鼠骨癌痛模型，觀察和比較其痛相關(guān)行為的改變。臨床上，肺癌、乳腺癌和前列腺癌骨轉(zhuǎn)移引起的骨癌痛是惡性腫瘤誘發(fā)的慢性痛中最為嚴(yán)重的一種，難以有效控制，嚴(yán)重影響了腫瘤患者的生活質(zhì)量。為了深入研究骨癌痛的發(fā)生機(jī)理，發(fā)展更為有效的治療手段，目前已建立多種骨癌痛動(dòng)物模型。這些模型依動(dòng)物品系、性別、腫瘤細(xì)胞系和接種部位的不同而有所差異，特別是不同腫瘤細(xì)胞系的在體成瘤環(huán)境不同，適宜接種的動(dòng)物種屬、品系和性別也各不相同[4]。例如，Walker256乳腺癌細(xì)胞株多選用雌性大鼠脛骨骨髓腔接種[16]，4T1乳腺癌細(xì)胞株多選用BALB/cJ和C3H/SCID小鼠股骨骨髓腔接種[17]。然而，目前多種基因工程小鼠選用C57BL/6J品系，該品系具有自發(fā)性腫瘤低、應(yīng)激反應(yīng)均一等優(yōu)勢，但用于骨癌痛模型動(dòng)物研究很少。本實(shí)驗(yàn)嘗試選用來源廣泛、易于獲得、致瘤作用極強(qiáng)的Lewis肺癌細(xì)胞接種C57BL/6J小鼠股骨骨髓腔，建立了穩(wěn)定、重復(fù)性好、無性別選擇性的小鼠骨癌痛模型。隨腫瘤生長，受累肢體出現(xiàn)進(jìn)行性加重的熱痛過敏和觸誘發(fā)痛(圖1)以及移動(dòng)肢體誘發(fā)的疼痛(步態(tài)異常，圖2)；組織病理切片HE染色結(jié)果顯示，腫瘤受累骨骨質(zhì)破壞明顯，正常骨髓質(zhì)結(jié)構(gòu)丟失，骨髓腔內(nèi)有大量癌細(xì)胞浸潤(圖3)。這些結(jié)果提示，該模型較好地模擬了臨床上腫瘤骨轉(zhuǎn)移的特征，包括骨質(zhì)破壞、患者隨病程發(fā)展出現(xiàn)輕觸或移動(dòng)引發(fā)劇烈疼痛等現(xiàn)象[23]。值得一提的是，我們?cè)诒緦?shí)驗(yàn)中采用了一種更為客觀的小鼠行為檢測方法——CatWalk步態(tài)分析。通過計(jì)算機(jī)的實(shí)時(shí)分析，該方法可以檢測運(yùn)動(dòng)中小鼠四只腳掌的各項(xiàng)參數(shù)，包括位置、壓力強(qiáng)度、接觸面積、運(yùn)動(dòng)速度等等。與vonFrey測試相比，該方法能更客觀精確地檢測小鼠的觸誘發(fā)痛和步態(tài)適應(yīng)過程[24]，也在一定程度上反映出小鼠的自發(fā)痛行為[25]。該方法在急性痛[20]、炎癥痛[26]和神經(jīng)病理性痛[27,28]大鼠行為檢測中有所應(yīng)用，在小鼠骨癌痛行為檢測中尚無報(bào)道。本研究證明，小鼠骨癌發(fā)展至21天，患側(cè)腳印面積顯著減小，站立時(shí)相持續(xù)時(shí)間縮短，舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間明顯延長，這些參數(shù)反映出小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)將重心轉(zhuǎn)移至非腫瘤側(cè)的保護(hù)性行為。該方法能較大程度地避免檢測者主觀影響等其它行為測試中常見的問題，同時(shí)由于檢測快速，也方便了大樣本的行為學(xué)測量。

P2X7受體是一種嘌呤能離子通道受體，其配體ATP可作為神經(jīng)遞質(zhì)/調(diào)質(zhì)或膠質(zhì)遞質(zhì)在神經(jīng)細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞之間介導(dǎo)信息傳遞，廣泛參與多種慢性痛的發(fā)生、發(fā)展過程。我們及其他實(shí)驗(yàn)室以往的研究證明，阻斷P2X7受體的功能可以減輕多種類型的慢性痛，包括炎癥痛、神經(jīng)病理性痛和大鼠骨癌痛[13–16]。相反，Hansen等在4T1乳腺癌細(xì)胞誘導(dǎo)的BALB/cJ小鼠骨癌痛模型發(fā)現(xiàn)，P2X7受體基因敲除增加小鼠對(duì)骨癌痛的易感[17]。由于4T1乳腺癌細(xì)胞并不能在C57BL/6J背景的P2rx7/小鼠成瘤，Hansen等通過雜交BALB/cJ野生小鼠和C57BL/6J背景的P2rx7/小鼠獲得P2X7受體基因敲除的BALB/cJ小鼠。該過程可能使P2X7受體基因敲除存在某些不確定性，如可能存在P2X7受體的剪切突變體[(P2X7(k)][17]代償P2X7受體的作用[18,19]。為進(jìn)一步確認(rèn)P2X7受體在小鼠骨癌痛中的作用，我們選用Pfizer開發(fā)的C57BL/6J背景的P2rx7/小鼠，在Lewis肺癌細(xì)胞誘導(dǎo)的C57BL/6J小鼠骨癌痛模型上進(jìn)行該項(xiàng)研究。與Hansen等在不同腫瘤細(xì)胞系和不同品系小鼠上的結(jié)果相類似，P2rx7/小鼠接種Lewis肺癌細(xì)胞后，癌痛的行為表現(xiàn)與野生型小鼠相比并無顯著差異，甚至其CatWalk步態(tài)分析參數(shù)變化發(fā)生的時(shí)間點(diǎn)較野生小鼠有所提前。該結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，在小鼠骨癌痛模型，P2X7受體不參與骨癌誘發(fā)痛覺敏化的發(fā)生和發(fā)展。結(jié)合我們前期關(guān)于P2X7受體在大鼠骨癌痛中的作用研究[16]，本工作結(jié)果提示P2X7受體在大、小鼠骨癌痛中可能發(fā)揮完全不同的作用。這種差異可能與大、小鼠骨癌痛條件下膠質(zhì)細(xì)胞不同的激活情況有關(guān)，如在多個(gè)大鼠骨癌痛模型可觀察到脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞的大量活化，但在小鼠骨癌模型，脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活化少有報(bào)道[29,30]。已知P2X7受體主要表達(dá)在脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞，P2X7受體與脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活化之間的關(guān)系在不同種屬骨癌痛發(fā)生中的作用還有待進(jìn)一步研究。另外，用于大、小鼠骨轉(zhuǎn)移瘤模型的瘤細(xì)胞系是不同的，而不同品系的瘤細(xì)胞破壞骨質(zhì)時(shí)形成不同微環(huán)境所造成的影響可能也對(duì)這種品系差異有所貢獻(xiàn)[31]。這些結(jié)果再次提示，在疾病動(dòng)物模型上所得的研究結(jié)果與人類疾病機(jī)理之間還存在著巨大差異。

作者：趙欣 劉慧珠 張玉秋 單位：復(fù)旦大學(xué)腦科學(xué)研究院