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《江西中醫(yī)藥雜志》2014年第八期
1統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以x珋±s表示,兩組數(shù)據(jù)間比較采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn),以P<0.05表示顯著性差異、以P<0.01表示非常顯著性差異、以P<0.001表示極顯著性差異。
2方法與結(jié)果
2.1提取方法
2.1.1水溶性有效部位提取方法稱取干燥梔子粗30g加7倍量水浸泡30min后超聲提取15min過濾,濾渣再加4倍量水超聲提取15min過濾,最后再加4倍量水超聲提取15min過濾,合并3次提取液加入1‰苯甲酸鈉于55℃烘箱中濃縮至100mL。
2.1.270%醇溶性有效部位提取方法稱取干燥梔子水提藥渣30g加入5倍量70%乙醇浸泡30min后超聲提取20min過濾,再加4倍量70%乙醇超聲提取20min過濾,最后再加入3倍量70%乙醇超聲提取20min過濾,合并3次提取液于55℃烘箱中濃縮至100mL,加入1‰苯甲酸鈉。
2.2試驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為9組:正常對(duì)照組(Normal)、巴中產(chǎn)梔子水溶性有效部位組(BZZZW)、江西產(chǎn)梔子水溶性有效部位組(JXZZW)、江津產(chǎn)梔子水溶性有效部位組(JJZZW)、湖北產(chǎn)梔子水溶性有效部位組(HBZZW);巴中產(chǎn)梔子70%醇溶性有效部位組(BZZZA)、江西產(chǎn)梔子70%醇溶性有效部位組(JXZZA)、江津產(chǎn)梔子70%醇溶性有效部位組(JJZZA)、湖北產(chǎn)梔子70%醇溶性有效部位組(HBZZA)。每組動(dòng)物數(shù)均為5只。于試驗(yàn)第一日開始,給藥8個(gè)組分別插管灌胃給予相應(yīng)藥物,劑量均為2.1g/kg;Normal組插管灌胃給予等量生理鹽水。每日灌胃1次,連續(xù)3天。實(shí)驗(yàn)第四天灌胃給藥一次后30min,于家兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉30mg/kg(即3%戊巴比妥鈉溶液1mL/kg),麻醉后將動(dòng)物背位固定于手術(shù)上,去毛后開腹,于家兔膽囊中抽取膽汁,測(cè)定膽汁中TBIL和CHOL含量。
2.3檢測(cè)原理肝膽疾病和溶血性疾病膽汁中CHOL和TBIL含量都有一定程度變化,本試劑盒能定量測(cè)定人體膽汁中二者的含量,所采用的反應(yīng)原理:TBIL反應(yīng)原理(化學(xué)氧化法)。
2.4試驗(yàn)結(jié)果見表1。結(jié)果可知,四個(gè)產(chǎn)地梔子無論是水溶性有效部位,還是70%醇溶性有效部位均具有非常顯著降低正常家兔膽汁中總膽紅素TBIL和總膽固醇CHOL含量的作用,尤其是醇溶性有效部位。巴中產(chǎn)梔子水溶性有效部位BZZZW對(duì)正常家兔膽汁中TBIL和CHOL的含量降低作用比江西、湖北、江津產(chǎn)梔子水溶性有效部位更有優(yōu)勢(shì),但無顯著性差異(P>0.05)。巴中產(chǎn)梔子70%醇溶性有效部位BZZZA對(duì)正常家兔膽汁中TBIL和CHOL的含量降低作用比江西、湖北、江津產(chǎn)梔子70%醇溶性有效部位更有優(yōu)勢(shì),但無顯著性差異(P>0.05)。梔子70%醇溶性有效部位對(duì)正常家兔膽汁中TBIL和CHOL的含量降低作用優(yōu)于梔子水溶性有效部位,但是無顯著性差異(P>0.05)。總之從梔子對(duì)正常家兔膽汁中總膽紅素TBIL和總膽固醇CHOL含量降低作用的研究結(jié)果證明:巴中產(chǎn)梔子品質(zhì)更優(yōu),治療黃疸產(chǎn)生的效果更佳。巴中產(chǎn)梔子在川產(chǎn)藥材中的臨床開發(fā)和利用方面占具優(yōu)勢(shì)。
3討論
3.1研究結(jié)果表明,巴中產(chǎn)梔子提取物降低正常家兔膽汁中TBIL、CHOL的效應(yīng)與江西、江津、湖北產(chǎn)梔子的比較有進(jìn)一步降低趨勢(shì),提示巴中梔子提取物具有明顯利膽退黃作用,在臨床上黃疸發(fā)生時(shí),可優(yōu)選巴中產(chǎn)梔子,以達(dá)到更好的治療效果。另根據(jù)傳統(tǒng)的炮制經(jīng)驗(yàn),臨床配方用梔子多采用烘干、麩炒、清炒等方法進(jìn)行炮制后才能入藥。故其炮制品對(duì)藥效的研究有待深入。
3.2本研究只采用梔子提取物對(duì)正常家兔膽汁中TBIL、CHOL含量的作用進(jìn)行研究,而對(duì)梔子如何利膽退黃的機(jī)制還不夠深入。下一步有待制備溶血性黃疸、肝細(xì)胞細(xì)胞性黃疸、阻塞性黃疸、膽汁淤積型黃疸等模型,再給家兔膽總管插管形成瘺管引流膽汁,觀察梔子提取物對(duì)家兔膽汁分泌量的影響,測(cè)定家兔膽汁以及血清成分,觀察梔子提取物對(duì)黃疸模型組家兔利膽退黃的效果。
3.3梔子本身味苦、性寒,臨床上不能大劑量長時(shí)間給藥,但劑量太少給藥時(shí)間太短都會(huì)影響治療效果。本研究連續(xù)同劑量給藥四天,最后各給藥組之間結(jié)果無顯著性差異,可能與給藥時(shí)間相對(duì)過短有關(guān)。有待進(jìn)一步研究給藥劑量和給藥時(shí)間對(duì)療效的影響。
作者:王利國唐燦劉艷李梅雷燕黃麗萍單位:瀘州醫(yī)學(xué)院附屬中醫(yī)醫(yī)院瀘州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院