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《華西藥學(xué)雜志》2016年第一期
摘要:
目的對比研究天麻的形態(tài)組織學(xué),尋找不同品種天麻的鑒別依據(jù)。方法采用生藥學(xué)常規(guī)方法,對不同品種天麻進(jìn)行原植物、藥材性狀、顯微特征的對比觀察,并觀察花粉塊的掃描電鏡特征。結(jié)果找出了烏天麻、紅天麻、綠天麻在形態(tài)組織學(xué)方面的鑒別特征。結(jié)論為天麻的品種鑒別提供了參考依據(jù)。
關(guān)鍵詞:
天麻;原植物;藥材性狀;顯微鑒別;電鏡掃描
天麻GastrodiaelataBl.為蘭科天麻屬多年生寄生植物,以干燥塊莖入藥,具有息風(fēng)止痙、平抑肝陽、祛風(fēng)通絡(luò)之功效。用于治療失眠、頭痛、耳鳴、肢體麻木、高血壓等癥。此外,天麻還用于食品、保健品、美容化妝品等,國內(nèi)外市場需求量大,在中國陜西、云南、貴州、四川、湖北等省均有種植。中國的天麻有紅天麻、烏天麻、綠天麻、黃天麻和松天麻等5個變型[1]。目前,各地種植的天麻以烏天麻、紅天麻為主,也有少量綠天麻及雜交品種,不同品種天麻在生物性狀和質(zhì)量上有差異[2]。現(xiàn)通過對比研究不同品種天麻的形態(tài)組織學(xué)來提供品種鑒定依據(jù)。
1實(shí)驗(yàn)部分
1.1儀器與材料CH-20-BIM型生物顯微鏡(日本Olympus);JSM-6390LV型掃描電子顯微鏡、CO2超臨界流體萃取儀、IB-5型離子濺射儀(日本日產(chǎn))。15批供試對口藥材和原植物標(biāo)本收集于四川、貴州、云南、湖北、陜西等省,經(jīng)馬逾英教授鑒定為蘭科植物烏天麻GastrodiaelataBl.f.glaucaS.Chow、紅天麻G.elataBl.f.elata、綠天麻G.elataBl.f.viridis(Maki-no)Makino。
1.2方法與結(jié)果
1.2.1原植物的形態(tài)觀察樣品收集地栽培的不同品種天麻植株及原植物標(biāo)本,并參考《中國植物志》[1]描述其植物形態(tài)。烏天麻的植株高113~157(~160)cm,塊莖橢圓形,肉質(zhì),長8~12cm,直徑3~5(~7)cm,厚2.0~3.5cm,具較密的節(jié),節(jié)上被多數(shù)三角狀寬卵形的鞘。莖直立,淺灰褐色,葉退化成膜質(zhì)磷片。總狀花序頂生,具30~50朵花;花苞片披針形或狹披針形,膜質(zhì);花梗和子房長略短于花苞片;花烏黃色;萼片和花瓣合生成的花被筒長約1cm,近圓筒形,筒的基部向前方凸出,頂端具5枚裂片,唇瓣長圓狀卵圓形,黃色;雄蕊1枚,著生于雌蕊上端;子房扭轉(zhuǎn)。紅天麻與烏天麻的區(qū)別為塊莖表面環(huán)節(jié)上的潛伏芽常有凹陷。植株高107~124(~132)cm,莖橙紅色,花序長26~31(~32)cm,花橙黃色,唇瓣橙黃。綠天麻與烏天麻的區(qū)別為植株高98~102(~111)cm,莖黃綠色,花序長22~27(~29)cm,花黃綠色,唇瓣黃綠色(圖1)。
1.2.2性狀鑒別觀察各產(chǎn)地不同品種天麻樣品的形狀、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地、斷面、氣味等外觀性狀,并參考2010年版《中國藥典》[3]中描述的性狀特征。3個不同品種天麻在藥材外觀上無明顯區(qū)別,僅在形狀、大小及表面的環(huán)節(jié)上稍有差異。烏天麻呈橢圓形,略扁,皺縮而稍彎曲,長4~10cm,寬2.5~5.0cm,厚0.5~2.0cm。表面黃白色至淡黃棕色,具不規(guī)則縱皺紋,由潛伏芽排列成的橫環(huán)紋9~14個,偶可見棕褐色菌索。頂端有紅棕色鸚嘴狀的芽或殘留莖基;基部有圓臍形瘢痕[4-5]。質(zhì)堅(jiān),不易折斷,斷面較平坦,黃白色至淡棕色,角質(zhì)樣。氣微,味甘。紅天麻與烏天麻的區(qū)別為呈長橢圓形或長條形,表面橫環(huán)紋11~18個,基部有圓臍形瘢痕較烏天麻小。綠天麻與烏天麻的區(qū)別為多為長條形,下端稍尖,表面橫環(huán)紋12~17個,基部圓臍形瘢痕較烏天麻小(圖2)。
1.2.3顯微鑒別采用徒手切片、石蠟切片、粉末制片、顯微攝影等方法,粉末圖用顯微描繪鏡繪制。烏天麻表皮偶有殘留,下皮由3~4列切向延長的栓化細(xì)胞組成,下皮細(xì)胞扁橢圓形。皮層為7~8列多角形細(xì)胞,皮層最外層細(xì)胞長橢圓形,切向延長,有的皮層細(xì)胞中含草酸鈣針晶束。中柱占絕大部分,有小型周韌維管束散在;薄壁細(xì)胞內(nèi)亦含草酸鈣針晶束。紅天麻與烏天麻的主要區(qū)別為下皮細(xì)胞4列以上,其細(xì)胞為橢圓形或多角形,近皮層1~2列下皮細(xì)胞栓化。皮層細(xì)胞7~9列,最外層細(xì)胞排列緊密呈類方形。綠天麻與烏天麻在橫切面上沒有明顯的區(qū)別。3個不同品種天麻橫切面組織特征比較(表1、圖3)。常規(guī)顯微觀察,3個不同品種天麻的粉末特征無明顯的區(qū)別。粉末黃白色或黃棕色。薄壁細(xì)胞中可見糊化多糖團(tuán)塊;厚壁細(xì)胞橢圓形或類多角形,直徑80~153μm,壁厚3~8μm,木化,紋孔明顯。偶見草酸鈣針晶成束,長28~68(~89)μm。螺紋導(dǎo)管、網(wǎng)紋導(dǎo)管及環(huán)紋導(dǎo)管直徑7~25μm(圖4)。
1.2.4花粉塊的掃描電鏡觀察用2.5%戊二醛溶液(PBS配制、pH7.2)固定花粉塊,于4℃冰箱中保存。使用上升系列的乙醇(20%~100%)各脫水20min后,置CO2超臨界流體萃取設(shè)備中進(jìn)行干燥,將干燥樣品粘于固定臺上,經(jīng)IB-5型離子濺射儀噴金后,置掃描電子顯微鏡下觀察,拍照記錄各花粉塊的外表結(jié)構(gòu)特征。天麻花粉塊由眾多花粉粒相互堆積而成,相鄰花粉粒之間有明顯的溝回;花粉粒多呈不規(guī)則四邊形或多邊形,表面呈網(wǎng)狀紋理,可見網(wǎng)孔,花粉塊上常有黏液物質(zhì)(絲狀、線狀或堆積存在)。除上述共同特征外,不同品種天麻在花粉單粒大小、網(wǎng)紋疏密、網(wǎng)脊寬窄方面有差異:烏天麻的花粉單粒大小為(10.3~19.7)×(7.7~14.3)μm,網(wǎng)紋緊密,網(wǎng)脊寬度為0.77~1.88(1.97)μm;紅天麻花粉單粒大小為(12.4~22.5)×(6.4~14.1)μm,疏松,網(wǎng)脊寬度為0.55~0.99(1.01)μm;綠天麻花粉單粒大小為(13.7~26.8)×(9.1~14.5)μm,較緊密,可見網(wǎng)孔,網(wǎng)脊寬度為0.44~0.99(1.54)μm。不同品種天麻花粉塊的掃描電鏡特征比較見圖5。
2討論
文中通過對比研究了3種天麻的形態(tài)組織學(xué),找出了其原植物形態(tài)、藥材性狀、組織結(jié)構(gòu)及花粉塊的主要鑒別特征。原植物形態(tài)主要從植株的高矮、莖的顏色、花的顏色進(jìn)行鑒別:烏天麻植株高113~157(~160)cm,莖淺灰褐色,花烏黃色;紅天麻植株高107~124(~132)cm,莖橙紅色,花橙黃色;綠天麻植株高98~102(~111)cm,莖黃綠色,花黃綠色。藥材性狀方面,主要從藥材形狀、大小及表面的環(huán)節(jié)這3點(diǎn)來鑒別3個不同品種的天麻。組織結(jié)構(gòu)方面,紅天麻下皮細(xì)胞4列以上,其細(xì)胞為橢圓形或多角形,近皮層1~2列下皮細(xì)胞栓化,皮層細(xì)胞7~9列,最外層細(xì)胞排列緊密呈類方形。以此與綠天麻和烏天麻進(jìn)行區(qū)別。花粉塊電鏡掃描顯示:同一產(chǎn)地不同品種的天麻花粉塊的整體形態(tài)相似,均由眾多花粉粒組成。花粉粒多呈不規(guī)則四邊形或多邊形,表面具網(wǎng)狀紋理,可見網(wǎng)孔;花粉塊上常有黏液物質(zhì)。而不同品種天麻花粉塊在單粒花粉大小、網(wǎng)紋疏密度、網(wǎng)脊寬度等方面存在差異。
參考文獻(xiàn):
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[2]余昌俊,王紹柏.天麻6個品種重要性狀比較分析[J].生物學(xué)通報,2010,45(3):12-14.
[3]中華人民共和國國家藥典委員會.中國藥典[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:54.
[4]鄧恒青,童紅,周漢華.天麻環(huán)節(jié)紋上的點(diǎn)狀痕是根還是芽[J].中國民族民間醫(yī)藥,2010,11:15.
[5]鄧恒青,童紅,周漢華.天麻顯微鑒定拾遺[J].中國民族民間醫(yī)藥,2009,13:9.
作者:李振斌 鄧薇 徐大東 宗露 楊芝芳 張彩虹 馬逾英 單位:成都中醫(yī)藥大學(xué) 中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地