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摘要：為研究食用菌子的實體水提物對腸道菌群的影響，文章通過對六種食用菌子的實體水提物進行分組培養后，得出的測序結果顯示出這六種食用菌子實體水提物對腸道微生物有不同的影響，放線菌門有較高水平的為杏鮑菇組、雙孢菇組、黑木耳組、平菇組，擬桿菌門有較高水平的為雙孢菇組、平菇組、香菇組，厚壁菌門有較高水平的為金針菇組，乳桿菌有較高水平的為平菇組、黑木耳組、香菇組，雙歧桿菌有較高水平的為黑木耳組、香菇組，厚壁菌門有較高水平的為黑木耳組、香菇組、金針菇組，而只有香菇組的變形菌門的水平較高。

關鍵詞：食用菌實體水提物；腸道微生物；二代測序平臺

通過對富硒猴頭菇的凍干粉和香菇酶解物的研究，發現它們分別可使大腸埃希氏菌和大腸桿菌減少，對腸道菌群環境有改善的效果，從而提高生命體的免疫力。文章通過實驗來系統分析不同食用菌子的實體水提物對腸道菌群的不同影響。

1材料及方法

1.1材料、試劑從本地市場采購的新鮮杏鮑菇、雙孢菇、平菇、黑木耳、香菇、金針菇6種菌類。來自試劑公司美國Omega的D3350-1（此為提取出的細菌DNA試劑盒）和國產的分析純的其他化學試劑。

1.2設備儀器可旋轉的蒸發儀、壓力方式為立式的蒸汽滅菌器、既可數顯、測速又可保證恒溫的磁力攪拌器、高速組織的絞碎機、厭氧的手套箱、離心機、萬用爐（電子）、恒溫水浴缸。

1.3實驗方法（1）制備食用菌子的實體水提物。取一定的蒸餾水加熱，然后取蒸餾水一半體積的食用菌子原料，將其絞碎，放入蒸餾水中，在保證蒸餾水恒溫55℃的情況下，加熱2h后，將混合液過濾并收集起濾液。將濾液通過低溫進行濃縮、干燥冷凍，即為食用菌子的實體水提物。（2）測定食用菌子的實體水提物具體成分。此實驗采用的是自動凱氏定氮儀法來測定蛋白質含量；根據一些文獻測定實體水提物的總糖含量以及水分含量。（3）配制厭氧培養基。厭氧培養基需要實體水提物、菊糖、牛肉膏粉、魚粉。首先將之前已經提取出來的水提物分別放入6個瓶中，并且在每個瓶中各加入0.18g的糖；取3個瓶，在瓶中分別加入0.12g的牛肉膏和魚粉，并且再多加入0.3g的菊糖，作為陽性對照；另外3個瓶作為實驗組。最后需要在6個瓶中各加入30mL的基礎培養基，然后放在121℃的高壓環境中，進行2h的滅菌。（4）配制腸道微生物的培養液。配制此培養液需要保證沒有其他因素的影響，選擇了一位兩個月內沒有服用過抗生素，且身體健康的青年男性作為受試者。首先需要將受試者的新鮮糞便收集起來。提取3g已經混合好的新鮮糞便，在里面加入30m磷酸鹽緩沖液（需進行脫氧處理），使用離心機將此混合液進行離心，得到糞便懸液，且將其迅速放在之前準備好的厭氧手套箱中。（5）培養腸道微生物以及提取分離微生物的DNA。取出之前備好的糞便懸液0.3g、厭氧培養基實驗組2.7mL、厭氧培養基對照組2.7mL；將3種液體分別放在一起并進行充分混合。將混合后的液體在厭氧手套箱重進行恒溫培養，并每隔12h進行充分混合。48h后即可完成對糞便懸液的接種。將接種好的糞便懸液進行提取分離，需按照之前的DNA試劑盒上的說明提取分離，提取分離完成后，將提取分離后的物質放在-20℃的環境中保存。（6）對樣品進行測序分析。將之前的分離出的DNA，通過引物接頭的連接，在經過二代測序的方法，對測序后的結果進行統計收集，從而得到不同模板中DN段的序列。

2結語

經過上述實驗，得出這樣的結論：不同食用菌子的實體水提物所含有的粗蛋白和還原糖均不相等，也因此不同食用菌的實體水提物對腸道微生物的影響各有不同，通過對腸道菌群的影響，達到對身體的影響。例如：食用黑木耳則能產生較多的雙歧桿菌，既能通腸胃、環節胃腸障礙，又能有效地抵抗炎癥和感染；而金針菇、杏鮑菇則能使身體里產生較多屬放線菌門的有益菌，能軟化和保護血管，增強免疫力，也可降低人體中血脂和膽固醇；雙孢菇的食用則可減少厚壁菌門的數量，達到減肥效果；平菇的食用則 可使產生較多的乳桿菌，從而促進肌體健康。總的來說，不同的菌類實體水提物對腸道菌群有不同影響。

參考文獻

［1］李傳華，賈薇，楊海芮．人工栽培黑柄炭角菌子實體的生物活性［J]．食用菌學報，2016，23（2）：59-64.

作者：張放放 郭曉帆 單位：沈陽工學院