茶皂素對瘤胃原蟲及產氣量調控作用范文
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摘要在瘤胃培養液中分別添加0.25%、0.50%、0.75%的茶皂素提取物,經過體外培養發酵試驗表明:添加茶皂素提取物的各組均使活原蟲數顯著減少(P<0.01);并且能夠顯著提高產氣量(P<0.01),從而提高飼料的轉化效率;并使湖羊獲得更多的菌體蛋白和能量。
茶皂素為茶籽餅的提取物,在畜禽飼料中,因為茶皂素的存在,而使茶籽餅不能作為畜禽的常規飼料進行開發和利用。我國的茶葉業十分發達,因此我國具有十分豐富的茶籽餅資源。但由于茶皂素具有一定的毒性,因此利用率很低[1]。隨著國外同類技術的發展和所取得的成績,以及國內消費者生活水平的日益提高和對抗生素類添加劑可能會產生的畜產品中的殘留的擔憂,在未來的消費市場中使用天然物及其提取物作為添加劑的畜產品將日益受到消費者的歡迎。因此,自20世紀70年代以來,茶皂素的應用研究日益增加,并且得到迅速的發展。各方面的研究表明:茶皂素不僅是一個天然的表面活性劑而且具有廣泛的生物活性作用[2]。本試驗通過把茶皂素添加于湖羊的瘤胃培養液中,進行瘤胃液的體外培養發酵試驗,初步探討茶皂素對瘤胃原蟲及產氣量的調控作用。
1材料與方法
1.1試驗材料
供試茶皂素提取物為一種茶皂素含量為60%的粉劑。供試瘤胃液取自蕭山區某牧場內的裝有瘤胃瘺管的湖羊,用2層紗布進行過濾,在39℃的恒溫器中保溫,并用二氧化碳氣體進行飽和,備用。鹽類培養液按照吳躍明等[3]編寫的《飼料營養價值評定》中的方法進行配制。配制方法如下:0.05mL溶液A+100mL溶液B+0.5mL刃天青溶液+100mL溶液C+20mL還原溶液+蒸餾水至500mL。其中微量元素溶液A為CaCl2·2H2O13.2g、MnCl2·4H2O10.0g、CoCl2·6H2O1.0g、FeCl3·6H2O0.3g;蒸餾水加至100mL;緩沖溶液B為NH4HCO32.0g、NaHCO317.5g,蒸餾水加至500mL;常量元素C為無水Na2HPO42.85g、無水KH2PO43.1g、MgSO2·7H2O0.3g,蒸餾水加至500mL;刃天青溶液0.1%(W/V);還原劑溶液為1g/LNaOH4.0mL、Na2S·9H2O625mL,蒸餾水加95mL。
1.2試驗方法
按照茶皂素提取物在培養液中的濃度分別設0.25%、0.50%、0.75%以及空白對照(CK)4個組,各有3個重復。培養液在厭氧密封的100mL具塞注射器狀培養器中進行。培養前在每一培養器中預先加入相應量的茶皂素提取物以及米粉、黑麥草粉各0.1g,共設36個培養器。在39℃下恒溫、二氧化碳厭氧狀況下培養。鹽類培養液與瘤胃液以2∶1的比列混合。每一培養器都準確抽取該混合液30mL在39℃恒溫水浴搖床進行培養。分別于培養后3、6、12h測定各組的產氣量;測定氣體量后立刻終止培養器,量取0.5mL培養液用2mLMFS液進行染色,在顯微鏡下測定活的原蟲數。
2結果與分析
2.1茶皂素瘤胃液體外培養物產氣量的影響
從表1可以看出,在培養6h之后添加茶皂素的各組產氣量均高于空白對照組,且差異極顯著(P<0.01)。這說明茶皂素可以加速飼料的發酵,提高飼料的利用率。因為根據研究,瘤胃產生的氣體主要以揮發性脂肪酸為主,如乙酸、丙酸、丁酸[4]。而反芻動物的能量則主要從此獲得,所以添加茶皂素能提高飼料的轉化率,可使動物獲得更多的能量。
2.2對瘤胃液體外培養物中原蟲活力的影響
從表2可以看出,空白對照組隨著培養時間的延長,原蟲的成活率基本上維持在培養前的同一水平。這表明試驗的條件符合原蟲的生存條件。而添加茶皂素提取物的各組在培養3h后,原蟲數則顯著減少。并且隨著添加量的增加,原蟲的成活率極顯著地低于空白對照組(P<0.01)。添加0.75%的茶皂素培養12h后已經檢測不出活的原蟲,這表明茶皂素可以抑制并殺滅瘤胃原蟲。從瘤胃原蟲的作用分析發現,到達真胃原蟲的數量遠遠低于它在微生物中的比例。而原蟲的氮源主要來源于各個細菌,原蟲數量減少后可以使細菌的數量增加3倍,因為原蟲吞噬細菌很快,最快的每分鐘可以吞噬細菌總量的1%,因此隨著原蟲數的減少則細菌數相對的增加。而細菌數量的增加則有助于瘤胃液中底物的發酵。與此同時則能為動物提供更多的菌體蛋白,使動物獲得更多的營養[5]。對于飼喂低蛋白質日糧的湖羊來說,滅蟲(即添加一定的茶皂素)可以提高飼料的轉化率和利用率(Orskow等,1992年)。