茶皂素對瘤胃原蟲及產(chǎn)氣量調(diào)控作用范文

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摘要在瘤胃培養(yǎng)液中分別添加0.25%、0.50%、0.75%的茶皂素提取物,經(jīng)過體外培養(yǎng)發(fā)酵試驗表明:添加茶皂素提取物的各組均使活原蟲數(shù)顯著減少(P<0.01);并且能夠顯著提高產(chǎn)氣量(P<0.01),從而提高飼料的轉(zhuǎn)化效率;并使湖羊獲得更多的菌體蛋白和能量。

關鍵詞茶皂素;湖羊;瘤胃液;發(fā)酵;原蟲數(shù);影響

茶皂素為茶籽餅的提取物,在畜禽飼料中,因為茶皂素的存在,而使茶籽餅不能作為畜禽的常規(guī)飼料進行開發(fā)和利用。我國的茶葉業(yè)十分發(fā)達,因此我國具有十分豐富的茶籽餅資源。但由于茶皂素具有一定的毒性,因此利用率很低[1]。隨著國外同類技術的發(fā)展和所取得的成績,以及國內(nèi)消費者生活水平的日益提高和對抗生素類添加劑可能會產(chǎn)生的畜產(chǎn)品中的殘留的擔憂,在未來的消費市場中使用天然物及其提取物作為添加劑的畜產(chǎn)品將日益受到消費者的歡迎。因此,自20世紀70年代以來,茶皂素的應用研究日益增加,并且得到迅速的發(fā)展。各方面的研究表明:茶皂素不僅是一個天然的表面活性劑而且具有廣泛的生物活性作用[2]。本試驗通過把茶皂素添加于湖羊的瘤胃培養(yǎng)液中,進行瘤胃液的體外培養(yǎng)發(fā)酵試驗,初步探討茶皂素對瘤胃原蟲及產(chǎn)氣量的調(diào)控作用。

1材料與方法

1.1試驗材料

供試茶皂素提取物為一種茶皂素含量為60%的粉劑。供試瘤胃液取自蕭山區(qū)某牧場內(nèi)的裝有瘤胃瘺管的湖羊,用2層紗布進行過濾,在39℃的恒溫器中保溫,并用二氧化碳氣體進行飽和,備用。鹽類培養(yǎng)液按照吳躍明等[3]編寫的《飼料營養(yǎng)價值評定》中的方法進行配制。配制方法如下:0.05mL溶液A+100mL溶液B+0.5mL刃天青溶液+100mL溶液C+20mL還原溶液+蒸餾水至500mL。其中微量元素溶液A為CaCl2·2H2O13.2g、MnCl2·4H2O10.0g、CoCl2·6H2O1.0g、FeCl3·6H2O0.3g;蒸餾水加至100mL;緩沖溶液B為NH4HCO32.0g、NaHCO317.5g,蒸餾水加至500mL;常量元素C為無水Na2HPO42.85g、無水KH2PO43.1g、MgSO2·7H2O0.3g,蒸餾水加至500mL;刃天青溶液0.1%(W/V);還原劑溶液為1g/LNaOH4.0mL、Na2S·9H2O625mL,蒸餾水加95mL。

1.2試驗方法

按照茶皂素提取物在培養(yǎng)液中的濃度分別設0.25%、0.50%、0.75%以及空白對照(CK)4個組,各有3個重復。培養(yǎng)液在厭氧密封的100mL具塞注射器狀培養(yǎng)器中進行。培養(yǎng)前在每一培養(yǎng)器中預先加入相應量的茶皂素提取物以及米粉、黑麥草粉各0.1g,共設36個培養(yǎng)器。在39℃下恒溫、二氧化碳厭氧狀況下培養(yǎng)。鹽類培養(yǎng)液與瘤胃液以2∶1的比列混合。每一培養(yǎng)器都準確抽取該混合液30mL在39℃恒溫水浴搖床進行培養(yǎng)。分別于培養(yǎng)后3、6、12h測定各組的產(chǎn)氣量;測定氣體量后立刻終止培養(yǎng)器,量取0.5mL培養(yǎng)液用2mLMFS液進行染色,在顯微鏡下測定活的原蟲數(shù)。

2結(jié)果與分析

2.1茶皂素瘤胃液體外培養(yǎng)物產(chǎn)氣量的影響

從表1可以看出,在培養(yǎng)6h之后添加茶皂素的各組產(chǎn)氣量均高于空白對照組,且差異極顯著(P<0.01)。這說明茶皂素可以加速飼料的發(fā)酵,提高飼料的利用率。因為根據(jù)研究,瘤胃產(chǎn)生的氣體主要以揮發(fā)性脂肪酸為主,如乙酸、丙酸、丁酸[4]。而反芻動物的能量則主要從此獲得,所以添加茶皂素能提高飼料的轉(zhuǎn)化率,可使動物獲得更多的能量。

2.2對瘤胃液體外培養(yǎng)物中原蟲活力的影響

從表2可以看出,空白對照組隨著培養(yǎng)時間的延長,原蟲的成活率基本上維持在培養(yǎng)前的同一水平。這表明試驗的條件符合原蟲的生存條件。而添加茶皂素提取物的各組在培養(yǎng)3h后,原蟲數(shù)則顯著減少。并且隨著添加量的增加,原蟲的成活率極顯著地低于空白對照組(P<0.01)。添加0.75%的茶皂素培養(yǎng)12h后已經(jīng)檢測不出活的原蟲,這表明茶皂素可以抑制并殺滅瘤胃原蟲。從瘤胃原蟲的作用分析發(fā)現(xiàn),到達真胃原蟲的數(shù)量遠遠低于它在微生物中的比例。而原蟲的氮源主要來源于各個細菌,原蟲數(shù)量減少后可以使細菌的數(shù)量增加3倍,因為原蟲吞噬細菌很快,最快的每分鐘可以吞噬細菌總量的1%,因此隨著原蟲數(shù)的減少則細菌數(shù)相對的增加。而細菌數(shù)量的增加則有助于瘤胃液中底物的發(fā)酵。與此同時則能為動物提供更多的菌體蛋白,使動物獲得更多的營養(yǎng)[5]。對于飼喂低蛋白質(zhì)日糧的湖羊來說,滅蟲(即添加一定的茶皂素)可以提高飼料的轉(zhuǎn)化率和利用率(Orskow等,1992年)。