中學(xué)養(yǎng)成教育總結(jié)范文

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第1篇

一、完善制度建設(shè)，強(qiáng)化育人意識(shí)

葉圣陶先生曾經(jīng)說(shuō)過(guò)：“教育是什么，往簡(jiǎn)單方面講，只須一句話，就是養(yǎng)成良好的行為習(xí)慣?！币粋€(gè)人有了好的習(xí)慣，必然會(huì)產(chǎn)生好的結(jié)果。學(xué)校是培養(yǎng)人的地方，養(yǎng)成教育是育人的基礎(chǔ)工程，也是素質(zhì)教育的基本內(nèi)容。對(duì)學(xué)生的養(yǎng)成教育，不是某個(gè)人或是某些人的工作，而是一個(gè)系統(tǒng)的、長(zhǎng)期的，需要學(xué)校全體教職員工參與的工程。為此，確立了“全員、全方位、全過(guò)程”的育人理念，要求全體教職員工都要以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男袨楹土己玫谋砺食蔀轲B(yǎng)成教育的實(shí)施者，教師要做到教書育人，職員要做到管理育人，工人要做到服務(wù)育人，讓學(xué)生在每天的學(xué)習(xí)生活中時(shí)時(shí)刻刻都能受到教育。為此，學(xué)校在管理制度方面，制定了一套較為完善的制度體系，以“勤政、奉獻(xiàn)、開(kāi)拓、高效”為宗旨制定了學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)崗位職責(zé)；以“立志、尚學(xué)、求實(shí)、創(chuàng)新”為宗旨制定了學(xué)生行為規(guī)范；以“愛(ài)校、愛(ài)生、愛(ài)事業(yè)、講奉獻(xiàn)”為宗旨制定了教師崗位職責(zé)。學(xué)校還制定了《教師十要十不要》、《教師文明用語(yǔ)與文明忌語(yǔ)》、《禁煙規(guī)定》、《職能部門崗位職責(zé)》、《教職工工作考評(píng)制度》等一系列的規(guī)章制度，并通過(guò)全校大會(huì)，以及其他各種教育形式，貫徹到干部教師的工作中，使全體干部、師生的行為做到有章可循、有章可依。這些規(guī)章制度也督促教職員工嚴(yán)格約束自己的行為，為學(xué)生做好表率，形成了良好的行為習(xí)慣和和諧有序的工作學(xué)習(xí)氛圍，保證了養(yǎng)成教育的健康發(fā)展。

二、構(gòu)建德育網(wǎng)絡(luò)，狠抓隊(duì)伍建設(shè)

為了有效地挖掘和整合學(xué)校德育工作力量，形成全員育人的“大德育”體系，學(xué)校成立了以校長(zhǎng)為組長(zhǎng)的德育工作領(lǐng)導(dǎo)小組，組員包括副校長(zhǎng)、各職能部門主任、團(tuán)委書記、年級(jí)主任，并明確領(lǐng)導(dǎo)小組成員分工，將學(xué)校德育工作細(xì)化為每個(gè)人的職責(zé)，形成“校長(zhǎng)―政教處―年級(jí)―班主任”的管理網(wǎng)絡(luò)和學(xué)校、家庭、社會(huì)三方參與實(shí)施德育的格局。在注重德育領(lǐng)導(dǎo)機(jī)構(gòu)力量配備的同時(shí)，學(xué)校十分重視德育隊(duì)伍的建設(shè)。重點(diǎn)加強(qiáng)了“二支隊(duì)伍”建設(shè)：即教師隊(duì)伍和班主任隊(duì)伍。

德國(guó)教育學(xué)家第斯多惠曾說(shuō)：“教師本人是學(xué)校里最重要的師表，是直觀的最有教益的模范，是學(xué)生最活生生的榜樣?！彼茉炝己玫膸煹滦蜗?，是學(xué)校加強(qiáng)學(xué)生養(yǎng)成教育的必要前提，也是關(guān)鍵，正所謂“正人先正己，教人先自教”。教師的行為表率是對(duì)學(xué)生進(jìn)行經(jīng)常性的養(yǎng)成教育的有效方式。教師的模范行為是推進(jìn)學(xué)生進(jìn)行道德實(shí)踐和行為仿效的榜樣。每個(gè)學(xué)生都有自己的個(gè)性和興趣愛(ài)好，他們必然在教師中尋找自己的榜樣。各學(xué)科教師的群體形象及教師平時(shí)的一言一行，本身就是養(yǎng)成教育豐富的資源和最形象、最生動(dòng)、最富有感召力的教育。因此，學(xué)校在狠抓學(xué)生道德行為習(xí)慣養(yǎng)成的同時(shí)，重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)了師德建設(shè)，大力提倡“愛(ài)學(xué)生、愛(ài)學(xué)校、愛(ài)事業(yè)”的三愛(ài)教育，力求以優(yōu)良的師德師風(fēng)去感染、教育學(xué)生。在師德教育中，做到治本為先，抓起點(diǎn)、抓風(fēng)氣，對(duì)教師高要求、嚴(yán)要求，大力倡導(dǎo)“學(xué)校無(wú)小事，教師無(wú)小節(jié)”的育人觀念，從教師的自我養(yǎng)成，自我完善著手。特別是在儀容儀表、言談舉止、遵紀(jì)守法、愛(ài)護(hù)學(xué)生等方面，教師要做到彬彬有禮，溫文爾雅，在潛移默化中影響學(xué)生的行為習(xí)慣。

班主任隊(duì)伍是學(xué)校德育工作的核心，是學(xué)校實(shí)施養(yǎng)成教育的關(guān)鍵，班主任隊(duì)伍的素質(zhì)直接關(guān)系到學(xué)校養(yǎng)成教育的目標(biāo)能否落實(shí)到實(shí)處。為此，學(xué)校加強(qiáng)了對(duì)班主任隊(duì)伍的培訓(xùn)工作，做到規(guī)范化、系統(tǒng)化、科學(xué)化。學(xué)校每?jī)芍苷匍_(kāi)一次班主任會(huì)例會(huì)，通過(guò)例會(huì)組織班主任進(jìn)行理論學(xué)習(xí)，向班主任傳遞最新的德育信息與方法。請(qǐng)優(yōu)秀班主任作班級(jí)管理和教育學(xué)生的經(jīng)驗(yàn)介紹，外請(qǐng)教育專家舉辦講座，從而提高了班主任隊(duì)伍的整體素質(zhì)，有力地促進(jìn)了學(xué)校的班級(jí)管理和育人工作。學(xué)校還安排青年教師承擔(dān)副班主任和政教處義務(wù)德育教導(dǎo)員的工作，使青年教師在實(shí)際工作得到鍛煉，培養(yǎng)了大批的班主任后備力量，為青年教師從事班主任工作打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

三、實(shí)踐生活課程，規(guī)范群體行為

學(xué)生活動(dòng)的時(shí)間空間幾乎都在校內(nèi)，既給學(xué)校增加了教育管理的任務(wù)，又為學(xué)校拓寬教育渠道，更為主動(dòng)地對(duì)學(xué)生進(jìn)行全面素質(zhì)的培養(yǎng)提供了條件。學(xué)校提出將學(xué)生的校園生活課程化，使校園生活成為目的明確、內(nèi)容豐富、形式多樣的教育課程。

在初一剛?cè)胄r(shí)，學(xué)校就對(duì)學(xué)生提出“來(lái)了就是主人，起步就要正規(guī)”的指導(dǎo)口號(hào)。教育學(xué)生明白“一日生活規(guī)范是一周規(guī)范、一年規(guī)范、一生規(guī)范的基礎(chǔ)”。“生活規(guī)范是做人規(guī)范、學(xué)業(yè)規(guī)范、事業(yè)規(guī)范的基礎(chǔ)”。入學(xué)第一課是十天的軍訓(xùn)，同時(shí)進(jìn)行的是行為規(guī)范教育，通過(guò)講解、指導(dǎo)、模仿、強(qiáng)制、激勵(lì)等手段，引導(dǎo)學(xué)生掌握規(guī)范、認(rèn)同規(guī)范、直到自覺(jué)執(zhí)行，形成習(xí)慣。管理細(xì)節(jié)，從學(xué)生入學(xué)第一天開(kāi)始，直到畢業(yè)，從不間斷和放松，同學(xué)們?cè)谶@樣的引導(dǎo)和約束下，逐漸形成了良好的生活習(xí)慣和作風(fēng)，同學(xué)團(tuán)結(jié)友愛(ài)。很多家長(zhǎng)更是感受到學(xué)生到市九中后發(fā)生的顯著變化。

對(duì)于學(xué)生的課余時(shí)間活動(dòng)，學(xué)校安排了豐富的教育活動(dòng)，文娛活動(dòng)、體育活動(dòng)、科技活動(dòng)合理安排，全校性活動(dòng)，年級(jí)活動(dòng)，班級(jí)活動(dòng)有序進(jìn)行。歡快的小品比賽，緊張的辯論賽，激烈的籃球賽，開(kāi)心的風(fēng)箏比賽，使學(xué)生在緊張的學(xué)習(xí)之余，多了一分輕松，多了一分愉快，獲得精神上的滿足，也培養(yǎng)了他們合作、團(tuán)結(jié)、友愛(ài)的良好品質(zhì)。

四、開(kāi)展主題活動(dòng)，著眼終身發(fā)展

養(yǎng)成教育作為一種教育過(guò)程，是永恒不變的，而作為一種教育現(xiàn)象，其內(nèi)容又是多種多樣的。如何把握養(yǎng)成教育的特點(diǎn)，順應(yīng)時(shí)代變化，捕捉學(xué)生需要，較好地處理養(yǎng)成教育過(guò)程持續(xù)性和內(nèi)容靈活性的關(guān)系，實(shí)現(xiàn)養(yǎng)成教育的不斷創(chuàng)新和深化，是實(shí)施養(yǎng)成教育的關(guān)鍵。我們的體會(huì)是堅(jiān)持不懈地開(kāi)展系列的、有所側(cè)重的、豐富多彩的主題教育活動(dòng)，以活動(dòng)為載體，讓學(xué)生在自覺(jué)參與中深化道德認(rèn)識(shí)，踐行道德規(guī)范，從而達(dá)到養(yǎng)成教育與實(shí)踐活動(dòng)的有機(jī)統(tǒng)一。

學(xué)校大力開(kāi)展感恩教育，通過(guò)系列國(guó)旗下講話，引導(dǎo)學(xué)生把感恩的實(shí)際行動(dòng)體現(xiàn)在對(duì)老師的尊重上、體現(xiàn)在對(duì)父母的理解和關(guān)心上、體現(xiàn)在對(duì)他人的友善和幫助上。

9月份，學(xué)校開(kāi)展“行為規(guī)范養(yǎng)成”主題教育月活動(dòng)，10月份開(kāi)展“人人都是環(huán)境、文明禮儀伴我行”主題宣傳實(shí)踐教育月活動(dòng)，安排形式多樣、豐富多彩的教育活動(dòng)。主題教育月活動(dòng)結(jié)束后，各班都及時(shí)進(jìn)行總結(jié)，深化教育效果，政教處也通過(guò)全校學(xué)生大會(huì)對(duì)各班的活動(dòng)情況進(jìn)行點(diǎn)評(píng)，對(duì)表現(xiàn)突出的班級(jí)和個(gè)人給予精神和物質(zhì)上的獎(jiǎng)勵(lì)，取得了很好的教育效果。

每學(xué)年，學(xué)校都要組織為貧困同學(xué)捐款活動(dòng)，在政教處、團(tuán)委的倡議下，同學(xué)們將感恩的激情投入到對(duì)貧困同學(xué)的幫助之中，全體同學(xué)紛紛伸出援助之手，為貧困同學(xué)獻(xiàn)上一份愛(ài)心，學(xué)生參與率達(dá)到100%，為幾十名家庭的同學(xué)提供了幫助，解決了生活上的困難。同學(xué)們認(rèn)識(shí)到自己捐出的是慰問(wèn)款，獲得的是一份責(zé)任和心靈上的滿足。獲得資助的同學(xué)也深刻地感到自己得到的不僅是經(jīng)濟(jì)上的幫助，更是同學(xué)的關(guān)心和友情。這項(xiàng)活動(dòng)學(xué)校已經(jīng)連續(xù)組織了八年，讓同學(xué)們?cè)谛@生活中面對(duì)有困難的人，面對(duì)自己的同學(xué)知道應(yīng)該做些什么，應(yīng)該有一份愛(ài)心和責(zé)任心。

第2篇

[關(guān)鍵詞] 血管外膜成纖維細(xì)胞； 組織貼塊法； 消化法；經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

[中圖分類號(hào)] R322.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2016）08（b）-0004-05

[Abstract] Objective To compare the differences of two methods in adventitial fibroblasts culture and summarize the experience. Methods Aortic vascular adventitia were separated from 6 specific pathogen free wistar rats， and cut into small pieces. Half of adventitial fibroblasts were isolated and cultured using tissue explants adherent method， others by digestion method. Phase contrast microscope was used to observe the cell morphology， immunohistochemistry was used to identify the expression of vimentin and a-smooth muscle actin， and cell counts to determine rate of cell growth and proliferation. The differences between two groups were compared. Results Massive adventitial fibroblasts were obtained successfully by both tissue explant adherent method and digestion method. All of them were confirmed to be Vimentin （+）/ a-SMA （-） cells by immunohistochemistry， which represented adventitial fibroblasts. The rate of cell growth and proliferation were comparable between two groups and showed no statistically significant difference（P > 0.05）. Conclusion Adventitial fibroblasts can be obtained and cultured successfully both by tissue explants adherent method and digestion method. Stability and high survival rate of adventitial fibroblasts gained from both two methods make it valuable in the future study of vascular remodeling.

[Key words] Adventitial fibroblasts； Tissue explants adherent method； Digestion method； Experience summary

血管外膜在血管重構(gòu)的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起到了重要的作用，是多種心血管疾病發(fā)病的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，針對(duì)血管外膜的研究是當(dāng)前心血管領(lǐng)域研究熱點(diǎn)之一[1-2]。AFs是血管外膜的主要組成部分，它在體內(nèi)血管活性物質(zhì)作用下，通過(guò)分泌活性因子，參與細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化、增殖、凋亡、遷移及膠原的合成和分泌，從而參與血管的功能調(diào)節(jié)和修復(fù)過(guò)程[3-5]，AFs已成為治療心血管疾病的新靶點(diǎn)[6-8]。選擇合適的方法獲得AFs對(duì)于開(kāi)展血管重構(gòu)研究領(lǐng)域具有重要意義，本項(xiàng)目組在前期試驗(yàn)中[9-11]，通過(guò)組織貼塊法和消化法均能在短期內(nèi)獲得大量純度較高、生長(zhǎng)狀態(tài)良好的AFs，現(xiàn)在對(duì)兩種方法進(jìn)行比較并總結(jié)經(jīng)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 一般材料

4～6周齡（120～150 g，SPF級(jí)，屏障環(huán)境中飼養(yǎng)，普通飲食）健康雄性Sprague-Dawley大鼠由北京大學(xué)第一醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SYXK（京）2016-0001； DMEM/F12培養(yǎng)基、I型膠原酶和木瓜蛋白酶購(gòu)自Gibco公司；胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）購(gòu)自Hyclone公司；免疫組化用小鼠抗大鼠α-SMA和Vimentin單克隆抗體購(gòu)自武漢博士德公司，辣根過(guò)氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）和異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）標(biāo)記的二抗購(gòu)自碧云天公司，胰酶細(xì)胞消化液購(gòu)自北京普利萊公司；超凈工作臺(tái)為Thermo公司產(chǎn)品（Heraguard ECO 1.5）、倒置相差顯微鏡為日本Olympus公司出品（BIO500-PH）、CO2培養(yǎng)箱為日本SANYO公司產(chǎn)品（MCO-18AC）、熒光顯微鏡為L(zhǎng)eica公司產(chǎn)品（AF6000）。

1.2 大鼠AFs的原代培養(yǎng)

1.2.1 大鼠血管外膜的獲取 取雄性Sprague-Dawley大鼠，麻醉后斷頸處死，立刻浸泡于75%酒精中，5 min后轉(zhuǎn)移至無(wú)菌手術(shù)臺(tái)上，沿正中線剪開(kāi)大鼠胸腔和腹腔，可見(jiàn)胸腹主動(dòng)脈沿脊柱左側(cè)緣走形，剪取胸腹主動(dòng)脈，浸泡于Hanks緩沖液中，無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移至超凈工作臺(tái)。先用含青鏈霉素的滅菌磷酸鹽緩沖液（phosphate-buffered saline，PBS）沖洗血管內(nèi)外殘留的血液，鈍性分離血管周圍的結(jié)締組織，然后用眼科剪將血管縱向剖開(kāi)，使內(nèi)膜面向上，用眼科彎鑷自上而下輕輕刮除內(nèi)膜后，再小心撕下近內(nèi)膜面的中膜平滑肌層，剩余的絮狀乳白色組織即為血管外膜[3，12-13]。

1.2.2 貼塊法獲得Afs 將血管外膜組織用眼科剪剪成大小約1 mm×1 mm×1 mm的組織塊，均勻平鋪在25 cm2培養(yǎng)瓶的底部。輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶使瓶底面向上，向培養(yǎng)瓶中加入約6 mL含20% FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基，務(wù)必不要將組織塊沖掉。將培養(yǎng)瓶置入37℃、含5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中直立靜置2～4 h后，慢慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使培養(yǎng)液緩慢覆蓋組織塊，繼續(xù)培養(yǎng)約72 h后，可見(jiàn)AFs自組織塊周圍爬出。此時(shí)，不常規(guī)換液，僅向培養(yǎng)瓶中補(bǔ)加3 mL含20%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基，既保證細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分，又不會(huì)對(duì)培養(yǎng)液的PH值、溫度等造成大的影響。4～6 d后，待細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)到70%～80%融合狀態(tài)時(shí)即可按1∶4傳代，取2～3代細(xì)胞進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)[14]。

1.2.3 消化法獲得Afs 取血管外膜組織，剪成小塊后，加入1 mL消化液（消化液配方[15-16]：I型膠原酶0.5%、木瓜蛋白酶0.05%、牛血清白蛋白0.2%、二硫蘇糖醇1 mmol/L，使用不含氯化鈣的Hanks平衡鹽溶液溶解），37℃水浴15～30 min，然后經(jīng)200目不銹鋼濾網(wǎng)過(guò)濾消化液，加入2 mL培養(yǎng)液終止消化，1000 r/min離心2 min，棄掉上清液，加入5 mL含20%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基重懸，將細(xì)胞接種于60 mm的培養(yǎng)皿中，置于37℃、含5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24 h后換液。此后每隔48 h換液一次，直至消化傳代。

1.3 AFs的鑒定

蓋玻片泡酸并高壓消毒滅菌后，置于培養(yǎng)皿中，將AFs懸液種植于培養(yǎng)皿，待細(xì)胞生長(zhǎng)至50%融合狀態(tài)時(shí)，倒掉培養(yǎng)液，PBS沖洗，4%多聚甲醛固定20 min，用含0.3% Triton X-100、1%牛血清白蛋白的PBS透化處理，加封閉血清室溫封閉60 min后，倒掉封閉血清，加小鼠抗大鼠α-SMA抗體及Vimentin抗體，37℃孵育2 h，PBS沖洗3 min×3次。免疫熒光法：滴加FITC標(biāo)記的山羊抗小鼠二抗，避光孵育60 min，倒置熒光顯微鏡下觀察結(jié)果，拍片。二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色法：滴加HRP標(biāo)記的山羊抗小鼠二抗，室溫孵育60 min后，PBS沖洗3 min×3次，滴加DAB顯色液，在顯微鏡下觀察控制反應(yīng)速速，1～5 min即可，自來(lái)水充分沖洗，蘇木素復(fù)染，鹽酸酒精溶液浸泡返藍(lán)，中性樹(shù)膠封片，顯微鏡下觀察結(jié)果，拍片。

1.4 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定

分別將貼塊法和消化法兩種培養(yǎng)方法獲得的第2代AFs消化，細(xì)胞計(jì)數(shù)后，用含10%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度為2 ×104個(gè)/mL，每孔1 mL接種于12孔培養(yǎng)板，放置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，每隔24 h收集每組3孔細(xì)胞并計(jì)數(shù)，取平均值，連續(xù)計(jì)數(shù)7 d后繪制生長(zhǎng)曲線[17]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用GraphPad Prism 5.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析， 計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組之間均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較用方差分析。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AFs的原代培養(yǎng)

血管外膜組織塊在培養(yǎng)72 h后，可見(jiàn)少量成纖維細(xì)胞自組織塊邊緣爬出，漸向外生長(zhǎng)形成細(xì)胞暈，進(jìn)而形成細(xì)胞簇（圖1a）。剛長(zhǎng)出的細(xì)胞呈圓形，后變?yōu)闄E圓形，隨后細(xì)胞逐漸展開(kāi)，伸出偽足，形態(tài)多樣，呈梭形、多角形、星形或不規(guī)則形，大小略有差異（圖1b）。細(xì)胞逐漸圍繞組織塊呈放射性生長(zhǎng)，聚集成片（圖1c），傳代后80%～90%的細(xì)胞可重新貼壁生長(zhǎng)，其生長(zhǎng)方式及形態(tài)特點(diǎn)同前一致。消化法得到的細(xì)胞散在、成片分布，細(xì)胞形態(tài)和貼塊法一致（圖1d）。

2.2 AFs的鑒定

取第2代AFs進(jìn)行鑒定，待細(xì)胞長(zhǎng)至50%融合狀態(tài)時(shí)，固定細(xì)胞，加入α-SMA及Vimentin一抗抗體孵育后，再滴加FITC/HRP標(biāo)記的二抗，顯微鏡下觀察、拍片。可見(jiàn)α-SMA在細(xì)胞中基本沒(méi)有表達(dá)（圖2a、2c），而Vimentin在AFs中高表達(dá)（圖2b、2d），證實(shí)培養(yǎng)的細(xì)胞為典型的AFs。

2.3 兩種方法獲得的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線比較

傳代后AFs懸浮于培養(yǎng)液中，在重力的作用下逐漸下沉至培養(yǎng)板底，散在分布于培養(yǎng)板中，初始形態(tài)為圓形，后逐漸變成紡錘形、梭型、不規(guī)則性，細(xì)胞逐漸增大，3～6 h即完全貼壁，細(xì)胞伸出偽足并相互交織成網(wǎng)，逐漸形成細(xì)胞單層，鋪滿瓶底。AFs的倍增時(shí)間較短，在一段時(shí)間內(nèi)AFs數(shù)量與時(shí)間呈正相關(guān)，1～3 d為細(xì)胞增殖期、3～6 d為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、6～7 d為平臺(tái)期，與人皮膚成纖維細(xì)胞類似[17]。本項(xiàng)目中貼塊法和消化法所得細(xì)胞在細(xì)胞增殖期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和平臺(tái)期的時(shí)間大致相同，二者的生長(zhǎng)、增殖比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05 ）。

3 討論

貼塊法是將組織剪成小塊，貼附在培養(yǎng)瓶上，加入培養(yǎng)液浸沒(méi)組織塊，讓細(xì)胞從組織塊中爬出的一種方法，其優(yōu)點(diǎn)在于操作簡(jiǎn)單、步驟少、成本低、影響因素少、細(xì)胞爬出時(shí)間固定，便于實(shí)驗(yàn)者把控時(shí)間[3]；缺點(diǎn)在于部分組織細(xì)胞爬出慢、耗時(shí)長(zhǎng)。消化法常采用膠原酶、胰酶、彈力酶、透明質(zhì)酸酶及鏈霉蛋白酶等酶將組織消化分散，使細(xì)胞從組織中脫落出來(lái)。優(yōu)點(diǎn)在于培養(yǎng)時(shí)間短，短期內(nèi)可以獲得大量細(xì)胞；缺點(diǎn)在于操作復(fù)雜、不同組織消化時(shí)間長(zhǎng)短不固定、不同種類的消化酶對(duì)細(xì)胞狀態(tài)影響較大、步驟繁瑣帶來(lái)污染概率增加，且消化酶昂貴，因而消化法的應(yīng)用受到一定限制。本項(xiàng)目參考北京大學(xué)第一醫(yī)院風(fēng)濕免疫科博士生高蘭、樊勇等人的經(jīng)驗(yàn)[15-16]，采用組合酶消化法，消化時(shí)間控制在0.5 h以內(nèi)，可以短時(shí)間內(nèi)獲得大量活細(xì)胞。一般而言，貼塊法從獲取組織到細(xì)胞傳代需要7～10 d，而消化法只需要5～6 d。細(xì)胞在傳代以后，兩種方法獲得AFs在增殖期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和平臺(tái)期的時(shí)間大致相同，因而兩種培養(yǎng)方法在這一階段相比沒(méi)有差異。

AFs原代培養(yǎng)時(shí)難免混雜少量的其他細(xì)胞，包括平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等，利用AFs生長(zhǎng)速度快、數(shù)優(yōu)的特點(diǎn)，在傳代培養(yǎng)過(guò)程中能排斥其他細(xì)胞而優(yōu)先增殖，經(jīng)過(guò)幾代的傳代生長(zhǎng)后，能達(dá)到自然純化的效果，得到較高純度的AFs[18]。Vimentin是細(xì)胞骨架中間纖維家族成員，主要在成纖維細(xì)胞中表達(dá)；α-SMA主要表達(dá)于平滑肌細(xì)胞，所以可根據(jù)Vimentin表達(dá)陽(yáng)性/a-SMA表達(dá)陰性來(lái)鑒定成纖維細(xì)胞。本項(xiàng)目中兩種方法培養(yǎng)的細(xì)胞，使用免疫組化方法鑒定，可見(jiàn)Vimentin表達(dá)陽(yáng)性/ a-SMA表達(dá)陰性，故而可以確定所培養(yǎng)的細(xì)胞為AFs。

原代培養(yǎng)第一次傳代時(shí)機(jī)的掌握非常重要，一般認(rèn)為選取細(xì)胞接近或完全融合成片時(shí)進(jìn)行傳代。貼塊法原代培養(yǎng)時(shí)由于組織塊的分布不均勻，且活性不一，導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)也不均勻，經(jīng)常是一些區(qū)域已長(zhǎng)成致密細(xì)胞層，一些區(qū)域仍未見(jiàn)細(xì)胞爬出，這種情況下，當(dāng)整瓶細(xì)胞達(dá)亞融合時(shí)，致密細(xì)胞層已“老化”，功能狀態(tài)不佳。所以可根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況在細(xì)胞未達(dá)80%融合時(shí)進(jìn)行“原瓶”傳代，使細(xì)胞能均勻貼壁生長(zhǎng)及避免局部細(xì)胞“老化”。在細(xì)胞傳代消化以細(xì)胞成片收縮、變圓變亮、細(xì)胞間隙增大時(shí)為宜，若消化過(guò)度、時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，易嚴(yán)重?fù)p傷細(xì)胞膜，細(xì)胞難以貼壁成活，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)，經(jīng)驗(yàn)是胰酶定量、時(shí)間固定、操作迅速、動(dòng)作輕柔、及時(shí)終止消化。

綜上所述，組織貼塊法和消化法均能成功培養(yǎng)AFs，兩種方法獲得的細(xì)胞性狀穩(wěn)定、存活率高，為從細(xì)胞水平研究血管重構(gòu)性疾病的發(fā)病機(jī)制提供了可靠的模型。

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第3篇

一、構(gòu)建得力的領(lǐng)導(dǎo)機(jī)構(gòu)，加強(qiáng)教師規(guī)范引領(lǐng)作用。

1、領(lǐng)導(dǎo)小組成員經(jīng)常深入各年級(jí)組，同時(shí)加強(qiáng)自身建設(shè)，加強(qiáng)學(xué)習(xí)，真正成為學(xué)校德育工作帶頭人。領(lǐng)導(dǎo)小組成員以自己的能力、人格，高尚的品德，帶好班主任隊(duì)伍和加強(qiáng)學(xué)校骨干隊(duì)伍建設(shè)。形成“全員參與、全程實(shí)施、提升觀念、注重實(shí)效”的德育工作作風(fēng)。

2、強(qiáng)化師德建設(shè)。師德是教師素質(zhì)的靈魂，要確立人人是德育工作者，事事、處處都育人的管理理念。“榜樣的力量是無(wú)窮的”，教師是學(xué)生的榜樣，要求學(xué)生做到的，自己首先要做到。因此，教師首先行為要規(guī)范。教師每天自己打掃辦公室，升旗儀式時(shí)排在學(xué)生隊(duì)伍后面，與學(xué)生一起高唱國(guó)歌，按時(shí)值勤，護(hù)導(dǎo)護(hù)送按時(shí)到崗，半年來(lái)，我校教師從課堂到課間，從學(xué)校到社會(huì)，總能給學(xué)生以良好的行為示范。

3.開(kāi)學(xué)初我校要求各位班主任教師制定養(yǎng)成教育工作計(jì)劃，把讀記習(xí)慣和書寫習(xí)慣作為重點(diǎn)工作同時(shí)，把文明習(xí)慣作為本學(xué)期的主要方向。時(shí)時(shí)刻刻關(guān)注學(xué)生的言行舉止，通過(guò)文明習(xí)慣教育，使學(xué)生逐步養(yǎng)成尊敬長(zhǎng)輩、禮貌待人的優(yōu)秀品質(zhì)，提高分清是非、美丑、善惡、真假的能力。

二、養(yǎng)成教育工作重點(diǎn)

1、文明習(xí)慣

本學(xué)期我校把文明禮儀教育作為主要突破口，通過(guò)“一臺(tái)”（校園廣播臺(tái)）、“一式”（周一升旗儀式）、“一崗”（校文明禮儀監(jiān)督崗）、“一會(huì)”（主題班會(huì)）等活動(dòng)，全面開(kāi)展“文明習(xí)慣”教育活動(dòng)。開(kāi)學(xué)初，組織學(xué)生學(xué)習(xí)《小學(xué)生日常行為規(guī)范》、《小學(xué)生守則》，讓學(xué)生明白做文明學(xué)生的準(zhǔn)則，使學(xué)生更好的學(xué)習(xí)文明禮儀內(nèi)容，使文明習(xí)慣得到很好的擴(kuò)展和延伸，形成學(xué)生良好的品德和健康的人格。

為強(qiáng)化學(xué)生的行為養(yǎng)成教育，真正將工作做好做實(shí)，平時(shí)加強(qiáng)檢查督促，強(qiáng)化“意”的訓(xùn)練。采取了“日檢查、周評(píng)比”制度，其中日檢查是基礎(chǔ)管理，周評(píng)比是及時(shí)反饋、強(qiáng)化教育，形成“教育—管理—反饋—再教育—再管理”的工作模式。對(duì)每班學(xué)生的好人好事，行為習(xí)慣進(jìn)行監(jiān)督記載查評(píng)和常規(guī)管理評(píng)分，并把各班每天的情況及時(shí)反饋給各班主任，以利各班有針對(duì)性的進(jìn)行教育。學(xué)生的行為規(guī)范有較大程度進(jìn)步，學(xué)生的文明意識(shí)，良好的文明行為習(xí)慣有所養(yǎng)成。

2、寫字習(xí)慣

合理安排練字時(shí)間。每周二第七節(jié)課為寫字課時(shí)間，周三第七節(jié)課為練字時(shí)間，每天中午1:00——1：15為師生練字時(shí)間，學(xué)生平均每天練字時(shí)間不少于20分鐘。為提高師生書寫水平，把此項(xiàng)活動(dòng)落實(shí)到位，校長(zhǎng)和教導(dǎo)處將到各班進(jìn)行檢查。以班為單位舉行競(jìng)賽，強(qiáng)化學(xué)生正確的寫字姿勢(shì)概念。班內(nèi)開(kāi)辟書法展覽角，定期展覽學(xué)生的書法作品，給每個(gè)人展示自己的機(jī)會(huì)。重視抓好書法興趣小組活動(dòng)，有重點(diǎn)地發(fā)現(xiàn)和培養(yǎng)寫字人才。營(yíng)造濃郁的翰墨飄香的校園文化氛圍，充分發(fā)揮書法啟智、育人的作用。

3、讀記習(xí)慣

學(xué)校將每日早7：40----8：00定為晨讀時(shí)間，培養(yǎng)學(xué)生堅(jiān)持每天朗讀20分鐘，掌握有效的讀書方法，每周至少誦記一條名言警句或一首詩(shī)歌；及時(shí)批改學(xué)生的記錄筆記。

三、養(yǎng)成教育具體活動(dòng)

1、在紀(jì)念學(xué)習(xí)雷鋒活動(dòng)47周年之際，為使雷鋒精神代代相傳得以弘揚(yáng)，大隊(duì)部發(fā)出了“學(xué)雷鋒、樹(shù)新風(fēng)”的活動(dòng)倡議，組織大隊(duì)干部開(kāi)展“學(xué)雷鋒、樹(shù)新風(fēng)”走進(jìn)社區(qū)活動(dòng)。學(xué)校全體少先隊(duì)員還在輔導(dǎo)員的帶領(lǐng)下，對(duì)校園進(jìn)行了一次大掃除活動(dòng)。在這個(gè)過(guò)程中，隊(duì)員們真正體驗(yàn)到了“學(xué)雷鋒、樹(shù)新風(fēng)”的快樂(lè)。

2、為培養(yǎng)學(xué)生孝敬父母、熱愛(ài)長(zhǎng)輩的優(yōu)良品質(zhì)，學(xué)校開(kāi)展了“三八”婦女節(jié)感恩教育活動(dòng)。學(xué)校大隊(duì)部向全校學(xué)生發(fā)出倡議，全校各中隊(duì)還開(kāi)展《感恩母親》主題班會(huì)，通過(guò)講故事、繪畫等形式，讓學(xué)生體會(huì)母親的偉大等等。學(xué)生從最細(xì)致的事情入手，體驗(yàn)孝敬父母、熱愛(ài)長(zhǎng)輩的快樂(lè)與幸福，將感恩的心融入生活中的方方面面。

3、3月22-28日是第二十三屆“中國(guó)水周”，為了進(jìn)一步提高小學(xué)生節(jié)約水資源和保護(hù)意識(shí)，從小培養(yǎng)保護(hù)水資源，改善水環(huán)境的良好習(xí)慣，開(kāi)展了以“珍愛(ài)生命之水”為主題的征文、繪畫活動(dòng)。許多參賽小選手將自己平時(shí)的一些節(jié)約方面的好創(chuàng)意、好建議、好習(xí)慣、好做法融入到自己作品中。

4、今年四月份為學(xué)校的懷念月，為了更好地運(yùn)用傳統(tǒng)節(jié)日，弘揚(yáng)民族優(yōu)秀文化傳統(tǒng)，學(xué)校組織開(kāi)展了“緬懷革命先烈”清明節(jié)主題系列文化活動(dòng)。全校開(kāi)展了以緬懷革命先烈為主題的班會(huì)。并在學(xué)校的號(hào)召下，紛紛登錄中華英烈網(wǎng)、抗日英烈紀(jì)念館等網(wǎng)站，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向革命先烈獻(xiàn)上一束鮮花，寫下一段心里話，深情緬懷革命先烈的豐功偉績(jī)，寄托對(duì)英烈們的無(wú)限哀思。學(xué)生們立志要努力學(xué)習(xí)，以實(shí)際行動(dòng)來(lái)回報(bào)革命先烈。

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5、為了進(jìn)一步推動(dòng)恒山小學(xué)讀書活動(dòng)的開(kāi)展，創(chuàng)建書香校園，學(xué)校開(kāi)展了“待啟航書香溢恒小”主題讀書月活動(dòng)。舉行了活動(dòng)啟動(dòng)儀式，開(kāi)展了“待啟航書香溢恒小”學(xué)校讀書展示匯報(bào)會(huì)等。全校各班以班隊(duì)會(huì)的形式開(kāi)展讀書展示活動(dòng)，評(píng)選出讀書學(xué)生代表參加全校讀書成果匯報(bào)會(huì)。通過(guò)讀書月活動(dòng)，同學(xué)們收益良多，更好的促進(jìn)了同學(xué)們讀書的熱情。

6、為了增強(qiáng)青少年的愛(ài)國(guó)情感，引導(dǎo)青少年樹(shù)立正確的國(guó)家觀、民族觀，學(xué)校開(kāi)展了以“中國(guó)精神頌”為主題的征文演講比賽暨畢業(yè)生立志簽名活動(dòng)。通過(guò)開(kāi)展征文、演講比賽等各項(xiàng)實(shí)踐活動(dòng)，引導(dǎo)學(xué)生們不斷增強(qiáng)對(duì)中華民族的歸屬感，對(duì)中華文化的認(rèn)同感，培養(yǎng)學(xué)生們樹(shù)立自強(qiáng)不息的中國(guó)精神。

7、家長(zhǎng)會(huì)是家校溝通的重要渠道，讓孩子始終保持良好的行為習(xí)慣，家庭的作用不可忽略。5月28日下午學(xué)校召開(kāi)了全校性的學(xué)生家長(zhǎng)會(huì)。各班從安全管理、教育教學(xué)、養(yǎng)成教育三大方面向家長(zhǎng)介紹了學(xué)校的新要求和新舉措。向家長(zhǎng)分別發(fā)放了《學(xué)校工作家長(zhǎng)反饋單》、《致家長(zhǎng)一封信》。學(xué)校希望家校協(xié)力，雙管齊下，合力教育學(xué)生健康成長(zhǎng)。

總而言之，良好的行為習(xí)慣的形成并非一朝一夕之功，它需要學(xué)生長(zhǎng)期努力，需要老師不斷地督促引導(dǎo)。對(duì)學(xué)生進(jìn)行行為規(guī)范訓(xùn)練，必須持之以恒，像滴水穿石一樣，一點(diǎn)一滴，經(jīng)年累月，使養(yǎng)成教育真正變成學(xué)生的內(nèi)在需要，促使他們自覺(jué)養(yǎng)成各方面的良好行為習(xí)慣。我校養(yǎng)成教育一定會(huì)在工作實(shí)踐中不斷摸索，不斷完善。

(2)

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