HPLC法檢測馬來酸曲美布汀緩釋片含量范文

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作者：魏春燕，陸宏國，吳沉，張紹林，尹必喜

【摘要】目的建立一種采用反離子對高效液相色譜測定馬來酸曲美布汀緩釋片含量的方法。方法采用CromasilC18色譜柱（4.6mm×150mm，5μm），柱溫40℃，乙腈-0.15%戊烷磺酸鈉的高氯酸緩沖液（pH4.5）-乙腈（45：55）為流動相，流速1.0ml/min，檢測波長254nm，進樣量20μl。結果在該色譜條件下，馬來酸曲美布汀在20.35～286.22μg/ml濃度范圍內與其峰面積呈良好的線性關系（r=0.9999，n=5）。3個濃度水平樣品的平均回收率為100.5％（n＝9）。結論本法靈敏、準確、專屬性強，可作為馬來酸曲美布汀緩釋片的檢測方法。

【關鍵詞】馬來酸曲美布??；緩釋片；hplc法

【Abstract】ObjectiveToestablishaRP-ionpairHPLCmethodfordeterminationofthetrimebutinemaleateinsustained-releasebrts.MethodsTheseparationandanalysiswasperformedonaC18column（4.6mm×150mm,5μm）,columntemperature40℃,themobilephaseconsistedofacetonitrile-perchloricacidbuffer（45:55）.Theflowratewas1.0ml/min.Thedetectionwavelengthwassetat254nm.Loadedvolumewas20μl.ResultsAgoodlinearrelationshipwasobtaintedinthetrimebutinemaleate20.35～286.22μg/ml（r=0.9999,n=5）.Theaveragerecoverywas100.5%（n=9）.ConclusionTheproposedmethodissensitive,accurateandsimple,andcanbeusedforthedeterminationoftrimebutinemaleateinsustained-releasebrts.

【Keywords】trimebutinemaleate;sustained-releasebrts;highperformanceliquidchromatography（HPLC）

馬來酸曲美布汀（trimebutinemaleate,TMB）是一種不同于膽堿能藥物和抗多巴胺藥物類型的胃腸道節律劑，臨床上主要用于治療慢性胃炎引起的胃腸道癥狀和腸易激綜合征，法國等十幾個國家廣泛使用。TMB普通片劑（100mg/片），每日3次，每次1片，使用不便。研制TMB緩釋片，旨在減少患者服藥次數，提高患者的順應性。本文采用反相高效液相色譜法［1,2］，建立了馬來酸曲美布汀緩釋片含量測定的方法，簡單、準確、專屬性強?，F報告如下。

1儀器與試藥

Agilent1200高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；馬來酸曲美布汀對照品（自制，批號：060924），純度為99.8%，供試品（自制，批號：061105，061110，061116），3，4，5－三甲氧基苯甲酸、3，4，5－三甲氧基苯甲酯（自制），乙腈（色譜純），其余試劑為分析純。

2方法與結果

2.1色譜條件［3］色譜柱：DiamonsilC18柱（4.6mm×150mm，5μm）；流動相：乙腈-0.15%戊烷磺酸鈉的高氯酸緩沖液（pH4.5）［取戊烷磺酸鈉1.5g，溶于緩沖液（0.01molLl高氯酸溶液，用1.0％醋酸銨溶液調節至pH4.5）1000ml，過濾］（45：55）；流速：1.0ml/min；檢測波長：254nm；進樣量：20μl；柱溫：40℃。理論板數按曲美布汀計不低于3000，馬來酸曲美布汀與各雜質間的分離度應符合要求。

2.2專屬性試驗取馬來酸曲美布汀緩釋片適量，研細，精密稱取細粉適量，加0.01mol/L鹽酸溶液-乙腈（13：7）混合液溶解并稀釋制成1.0mg/ml的溶液，過濾，作為供試品溶液；精密稱取3，4，5－三甲氧基苯甲酸（雜質1）、3，4，5－三甲氧基苯甲酯（雜質2）各適量，加上述混合液制成1.0mg/ml的溶液。取供試品溶液加入雜質溶液各適量，搖勻，取20μl注入色譜儀，記錄色譜圖（見圖1～4）。

由色譜圖可以看出，主成分曲美布汀與最近雜質峰的分離度為5.8，表明在本色譜條件下，馬來酸曲美布汀與各有關物質能達到有效的分離和檢測，無其他明顯干擾吸收峰。

圖1雜質1色譜圖圖2雜質2色譜圖圖3供試品色譜圖圖4供試品＋雜質色譜圖2.3線性關系試驗精密稱取馬來酸曲美布汀對照品適量，加上述混合液制成1.0mg/ml的溶液，精密量取0.5、1.0、3.0、5.0、7.0ml,分別置于25ml量瓶中，加混合液稀釋至刻度，搖勻。精密量取各濃度溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄峰面積（A），以峰面積A對濃度C進行線性回歸，得回歸方程為A=14.8254C+5.6521（r=0.9999，n=5），線性范圍為20.35～286.22μg/ml。

2.4精密度試驗取馬來酸曲美布汀對照品適量，精密稱定，加上述混合液溶解并稀釋

制成0.2mg/ml的溶液，進樣20μl，重復進樣6次，記錄色譜圖，結果峰面積的RSD為0.38%，表明該溶液進樣精密度良好。

2.5回收率試驗精密稱取馬來酸曲美布汀對照品16.0、20.0、24.0mg各3份，置100ml量瓶中，分別加入處方量的空白輔料，加上述混合液適量，超聲，定量稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液各20μl注入色譜儀，按上述色譜條件測定，記錄色譜峰，計算回收率。結果低、中、高3種濃度溶液的回收率分別為100.4%，99.8%，101.2%；RSD分別為0.67%，0.58%，0.50%；平均回收率（n=9）為100.5%。表明本檢測方法準確。

2.6馬來酸曲美布汀緩釋片含量的檢測取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取細粉適量（約相當于馬來酸曲美布汀20mg），置100ml量瓶中，加上述混合液適量，超聲溶解，并定量稀釋至刻度，濾過，取續濾液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取馬來酸曲美布汀對照品適量，精密稱定，用上述混合液溶液定量稀釋制成0.2mg/ml的溶液，同法測定，按外標法計算。結果，批號為061105、061110、061116的三批樣品，含量分別為100.2%、99.4%、100.9%。

3討論

3.1流動相的選擇馬來酸曲美布汀為弱酸弱堿鹽，不同pH（3.0～5.5）對弱堿性曲美布汀的保留時間影響較大，采用乙腈-0.15%戊烷磺酸鈉的高氯酸緩沖液（45：55）為流動相系統，在不同的pH條件下考察曲美布汀與各雜質的保留時間及分離情況。結果表明：pH較小時，主成分曲美布汀的保留時間較短，隨著pH的增大，曲美布汀保留時間不斷延長。在高氯酸緩沖液pH>4.5時，主成分曲美布汀與雜質1和2能較好分離，因此將流動相中緩沖液用1.0%醋酸銨溶液調節至pH4.5。調節流動相中乙腈的比例（30%～60%）,分析同一供試品溶液，考察其對各化合物保留時間的影響。結果當乙腈比例為45%時，曲美布汀與雜質1和2可達到良好的分離。綜上，選定乙腈-0.15%戊烷磺酸鈉的高氯酸緩沖液（pH4.5）（45：55）為流動相。

3.2優點本文采用反離子對高效液相色譜法，對馬來酸曲美布汀緩釋片進行含量測定，靈敏度高、專屬性強、結果準確，能有效控制馬來酸曲美布汀緩釋片的質量。

【參考文獻】

1王銳利,張麗鋒,張淑秋.高效液相色譜法測定馬來酸曲美布汀緩釋微丸的含量及有關物質.山西醫科大學學報,2006,37（7）:23-726.

2王衛,左文堅.反相離子對高效液相色譜法測定馬來酸曲美布汀片的含量及有關物質.藥物分析雜志,2003,23（2）：111-113.

3國家食品藥品監督管理局.馬來酸曲美布汀質量標準.［WS1-（X-469）-2003Z-2006］.新晨