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【摘要】目的研究玉郎傘多糖（yulangsanpolysaccharides,YLSPS）的抗抑郁作用。方法采用懸尾實驗（TST）和強迫游泳實驗（FST）觀察YLSPS對小鼠不動時間的影響，用酶聯免疫吸附法（ELISA）測定小鼠腦中單胺類神經遞質去甲腎上腺素（NE）、多巴胺（DA）、五羥色胺（5-HT）的含量。結果600mg/kgYLSPS能明顯縮短小鼠懸尾不動時間，300，600mg/kgYLSPS能明顯縮短小鼠強迫游泳不動時間。與空白組相比，300，600mg/kgYLSPS顯著提高了小鼠腦中NE、DA和5-HT的濃度（P<0.05）。結論YLSPS對“行為絕望”動物模型有明顯的抗抑郁作用，其機制可能與其提高腦中單胺類神經遞質水平有關。
【關鍵詞】玉郎傘多糖；抗抑郁；懸尾實驗；強迫游泳實驗；單胺類神經遞質
玉郎傘是一種尚未開發的廣西習用壯藥,為蝶形花科植物疏葉崖豆MillettiapulchraKurzvar.laxior(Dunn)Z.Wei的塊根，具有舒筋活絡、補虛潤肺之功能，民間用于腰腿痛、風濕痛和慢性肝炎，也用于智力減退、消化不良、營養不良和病后虛弱等治療。玉郎傘多糖（yulangsanpolysaccharides,YLSPS）是玉郎傘提取物中主要的有效成分,由葡萄糖和阿拉伯糖組成［1］。本課題組前期研究表明，YLSPS具有護肝、抗自由基、抗癡呆等作用［2～4］。本文對YLSPS的抗抑郁作用進行了初步研究。
1材料與儀器
1.1動物昆明種小鼠，SPF級，♂，體重18～22g，由廣西醫科大學實驗動物中心提供，許可證號：SCXK（桂）2003-0003。動物分籠飼養，自由飲水和取食。
1.2實驗藥物YLSPS由本室自行提取；鹽酸氟西汀膠囊（fluoxetine，FLU，批號：071201，上海中西制藥有限公司）。實驗前將各試藥用蒸餾水配成所需濃度，4℃冷藏備用。
1.3儀器與試劑TGL-16G-A冷凍離心機（上海安亭科學儀器廠）；MK3酶標儀（ThermoElectronCorporation）；FJ-200高速均質分散機（上海標本模型廠）；HH-W21-Cr600電熱恒溫水溫箱（北京長安科學儀器廠）；開場實驗箱（高50cm，長80cm，寬80cm，底面平均劃分為16格面積相等的格子）自制；懸尾實驗觀察箱（高35cm，長25cm，寬25cm）自制；秒表；去甲腎上腺素試劑盒（美國ADL公司，批號：RT110371）；多巴胺試劑盒（美國ADL公司，批號：RT110371）；五羥色胺試劑盒（美國ADL公司，批號：RT110371）。
2方法
2.1小鼠懸尾實驗小鼠隨機分成5組：空白組，FLU（20mg/kg）組，YLSPS低、中、高劑量（150，300，600mg/kg）組。每日上午8時灌胃給藥，1次/d，連續7d。末次給藥30min后將小鼠尾末端2cm處固定倒懸于自制懸尾箱內，頭部離箱底約5cm，觀察6min，記錄后4min內的累計不動時間。判定不動標準：小鼠在空中停止掙扎，身體呈垂直倒懸狀，靜止不動。
2.2小鼠強迫游泳實驗分組和給藥同懸尾實驗。末次給藥30min后將小鼠單獨置于高20cm，直徑14cm，水深10cm，水溫25℃的圓形玻璃缸內，玻璃缸之間放一個不透明隔板，以防小鼠彼此看到，觀察6min，記錄后4min內的累計不動時間。判定不動標準：小鼠在水中停止掙扎，或呈漂浮狀態，僅有細小的肢體運動以保持頭部浮在水面。
2.3開場實驗分組和給藥同懸尾實驗。末次給藥30min后將小鼠放入自制開場實驗箱中，適應1min后，記錄動物5min內由底面中心開始走動的穿越格數。
2.4酶聯免疫吸附實驗檢測腦中單胺類神經遞質水平“小鼠強迫游泳實驗”測試結束后立即將小鼠斷頭，在冰臺上迅速取全腦，稱重，腦組織加入5倍量（重量/體積）預冷生理鹽水，低溫均漿，14000r/min冷凍高速離心15min，取上清，置-86℃冰箱保存，以供單胺類神經遞質含量測定。50μl上清液和10μl生物素標記液加入預先包被一抗的96孔酶標板，加入100μl酶標記液，（36±2）℃孵育反應60min，甩盡反應液，洗板6次，每孔加入底物A、B液各50μl，37℃避光孵育反應15min，加入50μl終止液，終止反應。用酶標儀測定450nm處各孔的OD值。同時測定標準品OD值，以OD值為縱坐標,濃度為橫坐標繪制標準曲線。從坐標曲線查得各樣本濃度。
2.5數據統計處理數據用以±s的形式表示，采用SPSS13.0統計軟件,選用單因素方差分析（ANOVA）來檢驗各組數據之間的差異性。
3結果
3.1YLSPS對小鼠懸尾實驗、強迫游泳實驗中不動時間的影響與空白組相比，600mg/kgYLSPS能明顯縮短小鼠TST、FST的不動時間（P<0.01）。300mg/kgYLSPS能明顯縮短小鼠FST的不動時間（P<0.05），提示YLSPS具有一定的抗抑郁作用。結果見表1。表1YLSPS對小鼠懸尾和強迫游泳不動時間的影響（略）
3.2YLSPS對小鼠自主活動的影響YLSPS各劑量組小鼠的自主活動與空白組比較無明顯差異，表明該藥對小鼠自主活動無顯著影響。結果見表2。表2YLSPS對小鼠自主活動的影響（略）
3.3YLSPS對小鼠腦組織單胺類神經遞質水平的影響
FLU可以顯著增加腦中5-HT的含量，而對NE和DA沒有顯著影響。300，600mg/kgYLSPS可以顯著提高腦中NE、DA和5-HT的水平。結果見表3。表3YLSPS對小鼠腦組織單胺類神經遞質水平的影響（略）
4討論
抑郁癥是一種由各種原因引起的以抑郁為主要癥狀的一組心境障礙或情感性障礙，其主要臨床表現為情緒低落，消極待物，無助感，精力及注意力下降等。抑郁癥發病機制甚為復雜，誘發原因較多。目前多數人認可去甲腎上腺素(NE)、5-羥色胺(5-HT)、多巴胺(DA)等神經遞質可能參與抑郁癥的神經生化機制。研究發現，5-TH功能降低會導致人們心境抑郁、食欲減退、失眠、焦慮不安、性功能障礙、不能應付應激、活動減少等癥狀［5］。NE不足導致注意力難以集中，情感抑郁，工作記憶障礙等精神癥狀。臨床上對抑郁癥的治療主要是直接或間接增加突觸間隙中NE和5-HT。
小鼠強迫游泳實驗（FST）是由Porsolt于1977年首先提出，小鼠懸尾實驗（TST）是受FST的啟發而創建的。FST和TST是兩個經典的抗抑郁劑評價模型，各提供了一個無可回避的壓迫環境。實驗中小鼠最初表現為掙扎、試圖逃脫，一段時間后呈不動狀態，反映了一種被稱之為“行為絕望和扭曲(behavioraldespairandvariant)”或“對強壓環境適應的失敗(failuretoadapttostress)”狀態。FST和TST兩種行為絕望模型對絕大多數抗抑郁藥敏感，操作簡單、快捷，被廣泛用于該類藥物的初篩。
本文以這兩個模型為基礎，對YLSPS的抗抑郁作用進行初步研究。實驗結果表明，YLSPS能顯著縮短小鼠懸尾實驗和強迫游泳實驗的累計不動時間，顯示了一定的抗抑郁作用。開野實驗中各劑量YLSPS對小鼠自主活動均無顯著影響，提示其抗抑郁作用與中樞興奮性作用無關，故可排除其假陽性結果的可能性。與空白組相比，連續給藥7d后，300、600mg/kgYLSPS能顯著提高腦中NE、DA、5-HT的水平，與本課題組前期研究發現一致［6］。鑒于此，我們推測YLSPS可能是通過直接或間接升高腦內突觸間隙中NE、DA、5-HT水平而發揮抗抑郁作用的，其確切神經生物學機制有待于進一步研究。新晨：
【參考文獻】
1］段小群,焦楊,張士軍,等．玉郎傘多糖對肝星狀細胞增殖和I型膠原合成的影響［J］．中國現代醫學雜志，2008,18(4):423.
［2］黃仁彬，段小群，焦楊，等．玉郎傘提取物對小鼠急性化學性肝損傷的保護作用及其機制的研究［J］．廣西醫科大學學報，2003,20(6):874.
［3］陳健，黃媛恒，王乃平，等．玉郎傘多糖和皂苷對氧自由基清除作用研究［J］．中藥藥理與臨床，2007,23(5):100.
［4］黃忠仕，黃仁彬，李江，等．龍眼參多糖對不同模型擬癡呆小鼠的益智作用［J］．右江民族醫學院學報，2004,26(4):463.
［5］WHALER，CLIFFORDEM，BHAGWAGARZ，etal．Decreasedsensitivityof5-HTreceptorsinmelancholicdepression［J］．BrainJour-nalPsychiatry，2001,178:454.
［6］黃忠仕，林興，張士軍，等．龍眼參多糖對SAMP8學習記憶及腦組織單胺類神經遞質含量影響的研究［J］．中國藥房，2008,19(9):647