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腎移植癌螺旋CT范文

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VX2腫瘤是由shope病毒誘發的兔可移植性腫瘤,可接種到不同器官而成兔移植瘤模型[1]。它具有生長速度快、血供豐富、較早出現壞死和轉移等特點,是應用廣泛的大動物腫瘤模型。我們對兔VX2肝癌模型的傳代方式進行了一些改進,并采用螺旋ct掃描技術檢測瘤灶并評價腫瘤生長情況。

1材料與方法

1.1材料

日本大白兔30只,體重2.5kg~3.0kg,雌雄不限,由西安交通大學動物實驗中心提供,VX2腫瘤兔由第四軍醫大學提供。PQ-6000超高檔螺旋CT,18G穿刺活檢切割針。造影劑用歐乃派克。

1.2方法

待荷瘤兔腫瘤形成直徑約2cm大小時完整切取,在冰塊上去除包膜及壞死組織,剪取腫瘤邊緣生長旺盛部分置于Hanks液中。盡量剪碎約1mm,制成瘤細胞懸液[2]。接種兔麻醉狀態下CT引導18G穿刺針進入右腎下級,注入瘤細胞懸液0.3ml。手術操作于1.5h內完成。實驗動物肌肉注射青霉素40萬U,連續3d。腫瘤移植后第7天、第9天、第11天、第13天、第15天、第17天、第19天、第21天、第23天、第25天、第27天,實驗動物在耳緣靜脈麻醉后行螺旋CT平掃及增強掃描。增強CT造影劑選用歐乃派克,劑量5ml,經耳緣靜脈以0.5ml/s速度注射[3]。掃描條件:電壓為120kV,電流為200mA,螺距1.25,層距5mm,層厚5mm。觀察腎臟及腎內腫瘤的大小、形態特點,用所測數據計算腫瘤體積和腫瘤生長率(TGF=a2b2~a1b1/a1b1×100%)。觀察腎門及腹主動脈旁淋巴結變化,是否出現癌栓及液化壞死等。于每次CT掃描后即刻活殺一只兔,切取原發瘤灶及可疑淋巴結、肝臟、肺臟轉移組織進行光學顯微鏡檢查。

2結果

2.1腫瘤成瘤率

本組30例全部成瘤。術后螺旋CT平掃,腎下極瘤灶及穿刺道未見明顯出血征象。觀察期間荷瘤兔生長正常,未見感染及其他并發癥。植瘤后2周~3周,腫瘤體積增長穩定,邊緣完整,形態規則,密度均勻,無遠處轉移,是進行實驗研究的最佳時段。

2.2腫瘤螺旋CT表現

腫瘤種植灶在1周左右時較小,CT難以顯示或僅顯示點狀低密度灶,強化不明顯。2周時瘤灶直徑達1cm~2cm,平掃呈低密度或等密度,邊界清楚,密度較均勻,周圍未見水腫形成(見圖1)。強掃描呈明顯強化,其中環形強化18例,環形壁厚,較均勻,未見明顯壁結節形成,中間可見未強化區,未見明確腫瘤血管(見圖2)。較均勻強化12例;3周瘤灶明顯增大,直徑在3cm~5cm之間,螺旋CT平掃可見密度不均勻,17例出現壞死,且壞死明顯,中間可見囊變區呈水樣密度;增強掃描呈不規則環形強化,強化與2周時掃描比減低,環形壁較薄,無壁結節形成;9例可見腎內多個大小不一的結節狀轉移灶,增強特點與主病灶相似,病變為低密度,與周圍增強腎臟組織形成明顯對比。4例有腎門及腎主動脈旁淋巴結轉移。

2.3荷瘤兔存活及病檢

荷瘤兔自然存活時間為接種后6周~7周,其中3例存活50d。荷瘤兔死亡前表現明顯惡病質,體重下降,拒食,活動減少,呼吸困難。活檢可見腫瘤體積巨大,周圍廣泛浸潤、粘連,腎內、腹壁、腹膜后可見多個大小不一轉移結節;腎門、主動脈旁、肝門部、大網膜、腸系膜可見多個腫大淋巴結,部分融合;15例可見肝臟多發轉移,脾臟未見轉移灶。24例有雙肺彌漫粟粒樣轉移灶,14例有血性胸腔積液,有大葉性肺實變表現2例。腫瘤大體呈灰白色,質硬,切面呈魚肉樣,有包膜,巨大腫塊切開可見有果醬樣液體流出,有空洞形成,壁不規則,瘤體中央因缺血壞死而成豆渣樣。鏡下表現為鱗癌。

3討論

以往腎癌模型大多建立在裸鼠移植癌,該方法操作復雜,成瘤率低。VX2腫瘤是由Shop病毒在兔皮膚誘發的鱗癌經數十次傳代而建立。兔腎VX2腫瘤模型,傳代簡易、方便、生物學性質穩定,性質明確。該腫瘤雖不是腎臟原發性腫瘤,但具有轉移瘤的一切特點,腫瘤雖是來源于皮膚的鱗癌,但腫瘤血供豐富,生長速度快,易出現壞死[4],表現與人類原發性腎癌類似,是臨床研究肝臟腫瘤的理想模型。國內外有較多報道,有細胞懸液經皮穿刺直接種植法,剖腹直視下瘤組織塊直接種植法等,采用腫瘤細胞或懸液直接種植成功率可達100%,但較費時、費力。采用腿部皮下接種成瘤并傳代作為瘤種進行腎臟接種雖然成功率不及前者,但較簡單、經濟,成功率高。我們采用在螺旋CT透視下穿刺活檢的方法進行腫瘤的活體傳代。在腎臟種植腫瘤時進針較深,將組織塊用導絲推至腎內,隨后用少量明膠海綿以同樣的方法封堵針道,拔針后并壓迫片刻。一方面減少瘤塊逆出致腹腔種植,另一方面盡量使腫瘤種植在腎臟下極深部。其定位準確,成功率較高,本組成功率為100%。操作簡單,動物創傷小,并發癥少,本組無一例動物因感染或出血死亡。

螺旋CT掃描檢測兔VX2腎癌病灶顯示清晰,對瘤灶的變化可進行動態觀測,避免了實驗動物必須開腹或處死才能觀測瘤灶。我們經過反復摸索得出電壓:120kV,電流:200mA,螺距:1.25,層距:5mm,層厚:5mm的掃描條件。在CT平掃上瘤灶呈低密度,少數為等密度,當有壞死時為明顯低密度;增強掃描瘤灶呈明顯強化;與人腎癌CT表現相似。在腫瘤的種植時間上以2周~3周左右的瘤灶顯示清晰,表現典型。1周左右的瘤灶常較小,難以觀測到。而3周以上的瘤灶大多出現明顯的壞死且遠處出現多發轉移灶。CT表現的低密度區,與尸檢發現腫瘤液化壞死是吻合的。表明腫瘤生長迅速,惡性程度高。實驗中我們還觀測到通過動物多次傳代的腫瘤會增加免疫原性[5],較早出現壞死且壞死明顯,所以應盡量避免反復種植傳代。

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