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《中國(guó)司法鑒定雜志》2014年第二期

1方法

1.1DNA提取、PCR擴(kuò)增、STR分型檢測(cè)采用chelex100法提取DNA，擴(kuò)增體系和熱循環(huán)反應(yīng)按powerplex21試劑盒說明書進(jìn)行，擴(kuò)增產(chǎn)物在3130xL遺傳分析儀電泳，GenemapperIDv3.2軟件分析結(jié)果。

1.2統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用PowerStatsV12.xls軟件，計(jì)算STR基因座的雜合度（H）、個(gè)體識(shí)別力（DP）、非父排除率（PE）、多態(tài)信息含量（PIC）等法醫(yī)學(xué)應(yīng)用參數(shù)。累積非父排除率（CPE）和累積個(gè)體識(shí)別力（CDP）參照文獻(xiàn)[1]進(jìn)行計(jì)算。

2結(jié)果

2.1PowerPlex21系統(tǒng)的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用參數(shù)用PowerPlex21系統(tǒng)對(duì)1937個(gè)無(wú)關(guān)個(gè)體進(jìn)行DNA分型，對(duì)分型結(jié)果進(jìn)行法醫(yī)學(xué)應(yīng)用參數(shù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表1。除TH01和TPOX基因座外，其余基因座均H＞0.7；除TPOX基因座外，其余基因座均DP＞0.8；除D3S1358、CSF1PO、TH01和TPOX基因座外，其余基因座均PE＞0.5、PIC＞0.7。

2.2PowerPlex21在親子鑒定中的應(yīng)用用PowerPlex21系統(tǒng)檢測(cè)1704例親子鑒定案件，認(rèn)定親子關(guān)系的三聯(lián)體案件為82例、二聯(lián)體案件為1357例，排除親子關(guān)系265例，其中PentaE基因座的排除概率最高，為71.54%；TPOX的排除概率最低，為20.97%（見表2）。

2.3PowerPlex21系統(tǒng)20個(gè)STR基因座的突變情況在認(rèn)定的1439例親子鑒定中，其中44例表現(xiàn)為1個(gè)基因座違反遺傳規(guī)律。發(fā)現(xiàn)的突變基因座共15個(gè)，按突變率從高到低排列如下：D12S391、PentaE、D18S51、vWA、FGA、D5S818、D13S317、CSF1PO、D8S1179、D19S433、D3S1358、D1S1656、D2S1338、TH01和D21S11，見表3。

2.4PowerPlex21系統(tǒng)的等位基因丟失用PowerPlex21系統(tǒng)檢測(cè)的1704例親子鑒定案件中，2例親子鑒定經(jīng)PowerPlex21系統(tǒng)檢測(cè)，父和子在D5S818基因座均表現(xiàn)為純合子、且峰高約為附近純合子基因座峰高的一半，經(jīng)Sinofiler檢測(cè)證實(shí)PowerPlex21系統(tǒng)在D5S818基因座出現(xiàn)等位基因丟失，見圖1。

3討論

Shriver等認(rèn)為當(dāng)DP＞0.80、PE＞0.50時(shí)，該基因座屬于高度多態(tài)性。Gill等認(rèn)為，DP≥0.9、H≥0.7的基因座具有高鑒別力。與目前常用的試劑盒相比，PowerPlex21試劑盒增加了D1S1656基因座，該基因座的H、DP、PE、PIC值均顯示滿足高度多態(tài)性基因座的標(biāo)準(zhǔn)，可見D1S1656基因座在親子鑒定和個(gè)體識(shí)別方面有較大的應(yīng)用價(jià)值。

對(duì)于認(rèn)定親子關(guān)系的案件，PowerPlex21檢測(cè)三聯(lián)體的CPI值均大于10000，檢測(cè)二聯(lián)體CPI小于10000的案例百分比低于其他檢測(cè)系統(tǒng)。這表明PowerPlex21可更好地滿足親子鑒定的要求。對(duì)于排除親子關(guān)系的案件，PowerPlex21系統(tǒng)在PentaE基因座的排除概率最高，在TPOX基因座的排除概率最低，這與統(tǒng)計(jì)得到的PE值一致。PowerPlex21系統(tǒng)認(rèn)定的1439例親子鑒定中，有15個(gè)STR基因座檢出突變，突變率較高的基因座是D12S391、PentaE、D18S51、vWA、FGA。

PowerPlex21檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)了2例親子鑒定在D5S818基因座發(fā)生等位基因丟失的現(xiàn)象。這兩例案件在分析DNA圖譜時(shí)，根據(jù)該基因座的峰高特征（峰高約為附近雜合子基因座峰高的一半），且僅該基因座違反遺傳規(guī)律，初步預(yù)測(cè)可能是等位基因丟失，因此加做其他公司的擴(kuò)增試劑盒（Sinofiler系統(tǒng)）檢測(cè)，確認(rèn)用PowerPlex21檢測(cè)時(shí)在D5S818基因座出現(xiàn)等位基因丟失。這2宗案例易誤認(rèn)為是發(fā)生一步突變，因此對(duì)于親代和子代為純合子的基因座判斷突變時(shí)要特別慎重。

作者：陳玲邱平明陸慧潔黃恩平余嘉欣單位：南方醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)系 南方醫(yī)科大學(xué)司法鑒定中心