柳珊瑚化學(xué)成分研究范文

本站小編為你精心準(zhǔn)備了柳珊瑚化學(xué)成分研究參考范文，愿這些范文能點燃您思維的火花，激發(fā)您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

《中國海洋藥物雜志》2016年第二期

摘要：

目的研究扁小尖柳珊瑚Muricellasibogae的化學(xué)成分。方法利用硅膠薄層色譜、硅膠柱層析、凝膠SephadexLH－20柱層析、HPLC等手段對化學(xué)成分進行了分離純化；結(jié)合化合物理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)分析，通過文獻對照，鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果從扁小尖柳珊瑚Muricellasibogae的甲醇提取物中，分離并鑒定了9個化合物：（22E）－3β－羥基膽甾－5，22－二烯－7－酮（1），3β－羥基膽甾－5－烯－7－酮（2），膽甾－5－烯－3β，7α－醇（3），（22E，24S）－麥角甾－5，22－二烯－3β－醇（4），（22E，24R）－麥角甾－5，22－二烯－3β－醇（5），次黃嘌呤核苷（6），尿嘧啶核苷（7），順－5，8，11，14－二十碳四烯酸甲酯（8），順－9，12－十八碳二烯酸甲酯（9）。其中化合物1～3、6～9為首次從該物種中分離得到。

關(guān)鍵詞：

扁小尖柳珊瑚；化學(xué)成分；甾醇

珊瑚在分類學(xué)上屬腔腸動物門，珊瑚蟲綱，是海洋珊瑚礁生物系統(tǒng)中最重要的低等無脊椎動物之一，具有非常重要的生態(tài)功能。Muricella屬柳珊瑚屬于軟珊瑚目、全軸珊瑚亞目（Holaxonia）、柳珊瑚亞綱、類尖柳珊瑚亞科）［1］。有文獻報道［2－8］，該屬柳珊瑚主要含Eunicellin型二萜、9，10－開環(huán)甾醇類、類胡蘿卜素和其它甾體類化合物，具有細胞毒、鹵蟲致死和抗藤壺附著等生物活性。目前，國內(nèi)外罕見關(guān)于扁小尖柳珊瑚Muricellasibogae化學(xué)成分的相關(guān)研究報道［9－11］。為了尋找具有藥用前景的海洋生物活性成分，本文應(yīng)用活性導(dǎo)向的分離方法，對采自中國南海的扁小尖柳珊瑚M．sibogae進行了化學(xué)成分研究。

通過對M．sibo－gae腫瘤細胞毒活性初篩，發(fā)現(xiàn)M－3部位組分在50μg／mL的濃度下對HeLa細胞株和K562細胞株表現(xiàn)出較強的抑制活性，其抑制率分別為80．66％（HeLa）、86．38％（K562）；根據(jù)其TLC顯色特點判斷，主要為甾體類化合物，因此選擇這一部分進行重點研究，從中共分離鑒定了5個甾醇類單體化合物（見圖1）：（22E）－3β－羥基膽甾－5，22－二烯－7－酮（1），3β－羥基膽甾－5－烯－7－酮（2），膽甾－5－烯－3β，7α－醇（3），（22E，24S）－麥角甾－5，22－二烯－3β－醇（4），（22E，24R）－麥角甾－5，22－二烯－3β－醇（5）。此外，在極性較大組分（M5－M8）分離純化得到2個生物堿化合物：次黃嘌呤核苷（6），尿嘧啶核苷（7）；在組分M－1段分離純化得到2個長鏈脂肪酸酯化合物：順－5，8，11，14－二十碳四烯酸甲酯（8），順－9，12－十八碳二烯酸甲酯（9）。其中化合物1～3、8～9為首次從該物種中分離得到。本文報道以上9個化合物的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定工作。

1實驗部分

1．1儀器試劑Q－Tof－Ultima－Global型質(zhì)譜儀；7890AGC－5975MS氣相色譜－質(zhì)譜儀（美國Agilent公司）；紫外光譜儀；核磁共振儀JNM－ECP600型（日本JEOL公司）和DRX－500型（美國Bruker公司）；HPLC（美國Agilent1100，美國Waters2695）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國Heidolph公司）；BSZ－100自動部分收集器（上海滬西分析儀器有限公司）。薄層硅膠和柱層析硅膠（青島海洋化工廠）；柱層析用ODS（北京金歐亞科技發(fā)展有限公司）；SephadexLH－20。常用有機試劑（甲醇、二氯甲烷、丙酮、石油醚、乙酸乙酯等）均為國產(chǎn)分析純。

1．2樣品來源及鑒定樣品于2010年11月采集于中國南海北部灣潿洲島附近海域水深15～30m處，樣品種屬由中國科學(xué)院南海海洋研究所鄒仁林教授鑒定為扁小尖柳珊瑚Muricellasibogae。樣品采集后于－20℃保存于中國海洋大學(xué)醫(yī)藥學(xué)院天然藥物化學(xué)一室，樣品編號WZD－2010－15。

1．3提取與分離將低溫保存（－20℃）的柳珊瑚樣品（濕質(zhì)量5．0kg）用組織粉碎機粉碎，用甲醇（5．0L）超聲提取3次，每次3d，所得提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀低溫減壓濃縮得到浸膏；浸膏由無水甲醇溶解后用布氏漏斗抽濾脫鹽，重復(fù)3次，得粗浸膏87．0g；將粗浸膏通過減壓柱（填料為200～300目正相硅膠）進行粗組分的初步分離，石油醚／丙酮梯度洗脫（100％～0％），根據(jù)化合物的極性分布，得到8個一級部位（M1－M8）。通過活性篩選和TLC分析確定M3部位為重點研究對象。經(jīng)正、反相硅膠柱層析和半制備高效液相色譜分離純化，得到5個甾體類化合物（見圖1）：化合物1（1．5mg），化合物2（1．5mg），化合物3（4．0mg），化合物4（2．5mg），化合物5（3．7mg）。此外，經(jīng)過反復(fù)凝膠SephadexLH－20柱層析、正／反相硅膠柱層析和半制備高效液相色譜在極性較大組分（M5－M8）分離純化得到2個生物堿化合物6（4．3mg），化合物7（2．8mg）；在組分M－1段分離純化得到2個長鏈脂肪酸酯化合物8（1．7mg），化合物9（5．2mg）。

2結(jié)構(gòu)鑒定

以上核磁數(shù)據(jù)與文獻［18］報道值基本一致，結(jié)合GC－MS數(shù)據(jù)確定化合物8為順－5，8，11，14－二十碳四烯酸甲酯。

3結(jié)語

通過活性追蹤方式對扁小尖柳珊瑚Muricellasibogae進行化學(xué)成分研究，從甲醇提取物中分離獲得5個甾醇類化合物（1～5），2個生物堿類化合物（6～7），2個長鏈脂肪酸酯化合物（8～9）；其中，化合物1～3、6～9為首次從該物種中分離得到。研究結(jié)果進一步豐富了扁小尖柳珊瑚的化學(xué)成分多樣性。

作者：錢西勇 張興旺 唐旭利 李平林 李國強 單位：中國海洋大學(xué)海洋藥物教育部重點實驗室 中國海洋大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院