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《黑龍江醫藥科學雜志》2015年第二期
1方法
1.1揮發油提取與供試液制備陳皮和木香分別粉碎,過二號篩成粗粉。取單味藥粉末各25g混合,作為藥對提取。分別取單味藥粉末50g,用作單味藥提取。按《中國藥典》(2010版)一部附錄“揮發油提取法”甲法進行,用正己烷洗滌揮發油提取器,并加入揮發油中,經無水硫酸鈉干燥,減壓濃縮除去溶劑,將所得樣品進行避光冷藏。GC-MS測定前,藥對揮發油、單味藥揮發油分別用正己烷稀釋成10倍體積。
1.2GC-MS測定色譜條件:HP-5MS色譜柱(30m×0.25mm×0.25μm),接口溫度280℃,進樣口溫度280℃;載氣為氦氣(99.999%),分流比為50:1,進樣量1uL。質譜條件:電子轟擊離子源(EI),離子源溫度240℃,接口溫度280℃;電子能量為70Ev,四級桿溫度為150℃,質量掃描范圍為30~450Amu。升溫程序:以50℃柱溫為起始溫度,以4℃/min速率升至140℃,恒溫15min,再以4℃/min速率升至260℃。
2結果
分別將所得揮發油供試液按進行GC-MS檢測,得到的總離子流圖,見圖1。質譜圖經NIST08譜庫進行檢索,并參考質譜的裂解規律解析確定化合物,并采用峰面積歸一化法測定各成分的相對百分含量。陳皮中主要成分為D-檸檬油烯,占其揮發油總量的40.54%;木香中主要成分巴西菊內酯,占其揮發油總量的21.80%;藥對主要成分為D-檸檬油烯,占其揮發油總量的39.12%。單味藥與藥對共同含有23種揮發油成分;組成藥對后,單味藥陳皮消失6種組分,木香消失3種組分。
3討論
本實驗對于藥對陳皮-木香與其單味藥揮發油成分進行比較分析,結果表明藥對揮發油成分主要來自于陳皮,而單味藥木香的主要成分在藥對中含量較少,單味藥中的一些揮發油成分在藥對中消失,其原因可能與其在藥對揮發油中所占比例過低或與其他成分反應有關。藥對中新增成分可能是由于陳皮與木香在合煎的過程中發生了氧化反應、還原反應、水解反應和增溶助溶等物理和化學變化產生的,藥對中其種類與含量變化并不等于2種單味藥的簡單相加。GC-MS技術的應用,對于得到單藥與藥對揮發油成分的變化提供了有效的手段,有利于進一步研究單味藥配伍后成分變化的機制,進一步促進中藥藥理的研究。
作者:李淑賢 沙靖全 陸洪軍 單位: 佳木斯大學藥學院 佳木斯大學附屬第一醫院