本站小編為你精心準(zhǔn)備了萱藻配子孤雌生殖絲狀體分析參考范文,愿這些范文能點(diǎn)燃您思維的火花,激發(fā)您的寫(xiě)作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。
《大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào)》2016年第3期
摘要:
為研究萱藻的絲狀體育苗,以大連沿海萱藻為材料,采用配子孤雌生殖方法,進(jìn)行了絲狀體的誘導(dǎo)及采苗、育苗研究。結(jié)果表明:單株種藻獲得的配子經(jīng)孤雌生殖形成的盤(pán)狀體在20益時(shí)生長(zhǎng)最快,15益時(shí)次之,10益時(shí)最慢;盤(pán)狀體直徑達(dá)到100滋m以上時(shí)開(kāi)始形成絲狀體,絲狀體在20益時(shí)形成的時(shí)間最短、數(shù)量最多、生長(zhǎng)速度最快,15益時(shí)次之,10益時(shí)最差;將絲狀體剝下經(jīng)增殖后切碎采苗,在10益時(shí)幼苗形成最快、形成率最高,15益時(shí)次之,20益時(shí)無(wú)幼苗形成;在10益時(shí),采苗后培養(yǎng)30d幼苗長(zhǎng)度達(dá)到(110依03)mm,移至海區(qū)栽培4個(gè)月后獲得藻體長(zhǎng)度為60cm左右的萱藻成體。
關(guān)鍵詞:
萱藻;配子;孤雌生殖;絲狀體;采苗;室內(nèi)培養(yǎng)
萱藻是經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的一年生大型經(jīng)濟(jì)褐藻,在中國(guó)北至遼寧、南至廣東沿海均有分布,萱藻在冬春季生長(zhǎng)繁茂,藻體最大長(zhǎng)度可達(dá)80~110cm,能在近岸潮間帶和潮下帶的巖礁區(qū)形成大的藻場(chǎng),是中國(guó)沿海重要的海藻資源[1-2]。萱藻營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美,是人們喜歡食用的主要海藻之一[3]。研究發(fā)現(xiàn),萱藻中氨基酸含量豐富且種類齊全,共含有7種人體必需氨基酸、2種半必需氨基酸和7種非必需氨基酸,其中天門(mén)冬氨酸和谷氨酸含量占總氨基酸的20%以上,兒童生長(zhǎng)發(fā)育必需的精氨酸和組氨酸含量也較高[4],而且萱藻中巖藻聚糖硫酸脂含量豐富,具有顯著的護(hù)肝作用[5]。近年來(lái),萱藻作為健康和保健食品,市場(chǎng)需求量迅速增大,有關(guān)萱藻規(guī)模化苗種生產(chǎn)技術(shù)、海區(qū)栽培技術(shù)的研究已經(jīng)引起人們的關(guān)注。目前,國(guó)內(nèi)外有關(guān)萱藻的研究報(bào)道多集中在其生活史和生態(tài)學(xué)方面[6-10],關(guān)于萱藻人工育苗的研究報(bào)道較少,久保昭史[11]進(jìn)行了配子(合子)采集和盤(pán)狀體孢子體培養(yǎng)初步研究;三浦昭雄[12]將室內(nèi)培養(yǎng)的盤(pán)狀孢子體切碎并附著在維尼綸繩上,在海區(qū)浮筏上培育出萱藻幼苗;張澤宇等[13]從合子萌發(fā)形成的盤(pán)狀孢子體上得到絲狀體,將絲狀體再轉(zhuǎn)化為盤(pán)狀孢子體并培養(yǎng)至形成單室孢子囊,采集從成熟孢子囊放出的孢子并在室內(nèi)培育出萱藻幼苗。本研究中利用萱藻配子異宗結(jié)合的特點(diǎn),用單株藻體采集配子的方法,從配子孤雌生殖形成的盤(pán)狀體上獲得絲狀體,經(jīng)增殖后,采用絲狀體采苗的方法將絲狀體切碎并使其附著在維尼綸繩網(wǎng)簾上,絲狀體細(xì)胞直接萌發(fā)為萱藻幼苗,并將其在海區(qū)浮筏上栽培成成體,可將育苗時(shí)間縮短為20~30d。作者根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,掌握了盤(pán)狀體生長(zhǎng)以及絲狀體形成、生長(zhǎng)和采苗期的最適宜溫度,可為萱藻的規(guī)模化苗種生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)。
1材料與方法
1.1材料試驗(yàn)
用萱藻種藻于2014年4月采集于大連市黑石礁海區(qū)自然種群,采集時(shí)取藻體表面形成配子囊的成熟種藻(圖1),單株用海水洗凈后分別放入塑料袋內(nèi),帶回實(shí)驗(yàn)室供試驗(yàn)使用。
1.2方法
1.2.1配子放散與采集將單株種藻鋪放在白紙上,在室內(nèi)陰干2~3h后,分別放入盛有100mL消毒海水的200mL燒杯內(nèi),在光照強(qiáng)度逸60滋mol/(m2·s)下刺激配子放散,當(dāng)有褐色煙霧狀配子放散后撈出種藻,用吸管在向光處水表面配子趨光集中的褐色區(qū)域汲取配子水,分別取2~3滴移入數(shù)個(gè)鋪有載玻片的培養(yǎng)皿(直徑15cm)內(nèi),添加培養(yǎng)液后在室溫下靜置過(guò)夜,于次日上午移到溫度為20益、光周期為12h/d、光照強(qiáng)度為40滋mol/(m2·s)的條件下培養(yǎng)。
1.2.2盤(pán)狀體的形成及生長(zhǎng)試驗(yàn)將附著胚配子的載玻片移至直徑為9cm的培養(yǎng)皿(下同)內(nèi),添加培養(yǎng)液后置于不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng),每5d測(cè)定1次盤(pán)狀體的生長(zhǎng)狀況,測(cè)定50個(gè)盤(pán)狀體的直徑并取其平均值。
1.2.3溫度對(duì)絲狀體形成和生長(zhǎng)的影響試驗(yàn)在溫度為20益、光照強(qiáng)度為40滋mol/(m2·s)、光照周期為12h/d的條件下,盤(pán)狀體直徑達(dá)到100滋m左右時(shí),將生長(zhǎng)盤(pán)狀體的載玻片移到培養(yǎng)皿內(nèi),添加培養(yǎng)液后移至不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。每10d檢查1次盤(pán)狀體,每次測(cè)量50個(gè)盤(pán)狀體,按形成絲狀體的盤(pán)狀體數(shù)與盤(pán)狀體總數(shù)的百分比計(jì)算絲狀體形成率。將生長(zhǎng)在盤(pán)狀體表面的絲狀體剝下,移至盛有培養(yǎng)液的300mL燒瓶中,培養(yǎng)至肉眼可見(jiàn)的藻團(tuán)時(shí),將絲狀體藻團(tuán)移到載玻片上,用雙面刀片切碎后撒在鋪有載玻片的培養(yǎng)皿內(nèi),添加培養(yǎng)液后靜置過(guò)夜,次日上午將附著絲狀體藻段的載玻片分別移入裝有培養(yǎng)液的不同培養(yǎng)皿內(nèi),并置于不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。每5d測(cè)定1次絲狀體的生長(zhǎng)狀況,每次測(cè)量50個(gè)絲狀體的長(zhǎng)度并取其平均值。
124絲狀體切碎及幼苗培養(yǎng)取增殖后的絲狀體藻團(tuán)2g(濕質(zhì)量),添加300mL培養(yǎng)液后,用組織搗碎機(jī)(PhilipHR2096)切碎,時(shí)間為120s,在測(cè)定藻段長(zhǎng)度后,灑在鋪有載玻片的培養(yǎng)皿內(nèi),附著3d后,將載玻片移至直徑為15cm的培養(yǎng)皿內(nèi),添加培養(yǎng)液后置于不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。每5d測(cè)定1次幼苗形成率,每次測(cè)量50個(gè)絲狀體,按形成幼苗的絲狀體數(shù)與絲狀體總數(shù)的百分比計(jì)算幼苗形成率;最后將形成幼苗的載玻片移入不同培養(yǎng)皿內(nèi),并置于不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。每5d測(cè)定1次幼苗生長(zhǎng)狀況,每次測(cè)量50個(gè)個(gè)體的長(zhǎng)度并取其平均值。以上培養(yǎng)過(guò)程均在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行,溫度分別設(shè)定為10、15、20益,光源為日光燈,光照周期為12h/d,光照強(qiáng)度為40滋mol/(m2·s)。培養(yǎng)液為過(guò)濾后加熱至80益以上再冷卻的海水,營(yíng)養(yǎng)鹽的添加量為NaNO3100mg/L,KH2PO420mg/L,微量元素PI溶液[14]1mL/L,每3d全量更換培養(yǎng)液1次。
1.2.5幼苗培育及海區(qū)栽培2014年10月20日,將增殖后的孤雌生殖絲狀體采用相同方法切碎,灑在鋪有維尼綸繩網(wǎng)簾的塑料水槽(水體03t)內(nèi),待附著牢固后,將網(wǎng)簾移入玻璃鋼水槽(水體2t)內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)用水為過(guò)濾的自然海水,營(yíng)養(yǎng)鹽添加量為NaNO320mg/L,NaH2PO410mg/L,培養(yǎng)用水每3d全量更換1次,待幼苗肉眼可見(jiàn)時(shí)移至海區(qū)浮筏上栽培。
2.結(jié)果與分析
2.1配子附著、萌發(fā)與盤(pán)狀體的形成及生長(zhǎng)
配子呈梨形,大小為(60~70)滋m伊(35~50)滋m,色素呈體盤(pán)狀,具眼點(diǎn),側(cè)生兩條不等長(zhǎng)鞭毛(圖2-A)。配子放散具正趨光性,附著時(shí)表現(xiàn)出負(fù)趨光性,游向背光處并附著。配子附著時(shí)長(zhǎng)鞭毛接觸基質(zhì)并快速旋轉(zhuǎn)將鞭毛收回體內(nèi),當(dāng)配子前端與基質(zhì)接觸后停止旋轉(zhuǎn)并附著,成為胚配子。胚配子為圓形,直徑約5滋m,在20益下24h后開(kāi)始萌發(fā),細(xì)胞首先在側(cè)面產(chǎn)生突起并拉長(zhǎng)呈長(zhǎng)圓形,經(jīng)2~3次細(xì)胞橫分裂后形成5~7個(gè)細(xì)胞的長(zhǎng)條狀盤(pán)狀體(圖2-B),隨后細(xì)胞開(kāi)始向周邊分裂,形成多細(xì)胞盤(pán)狀體。剛形成的盤(pán)狀體呈圓形或橢圓形,直徑為20~30滋m,由數(shù)十個(gè)橢圓形細(xì)胞組成,呈放射狀排列,細(xì)胞內(nèi)含1個(gè)褐色的盤(pán)狀色素體。在20益下,盤(pán)狀體細(xì)胞首先沿著基質(zhì)的表面分裂增加附著面積,培養(yǎng)15d時(shí),盤(pán)狀體直徑達(dá)到60滋m以上。之后盤(pán)狀體中部細(xì)胞橫分裂加快,由中央開(kāi)始逐漸向上隆起,厚度逐漸增加。培養(yǎng)25d時(shí),盤(pán)狀體直徑均超過(guò)100滋m,中央部略隆起,盤(pán)狀體進(jìn)入快速生長(zhǎng)階段,周邊外層可見(jiàn)由透明長(zhǎng)方形分生細(xì)胞組成的分生膜。培養(yǎng)2個(gè)月時(shí),盤(pán)狀體直徑達(dá)2mm左右,肉眼已清楚可見(jiàn)。從表1可見(jiàn),培養(yǎng)20d時(shí),20益下盤(pán)狀體直徑為(800依30)滋m,15益和10益下分別為(600依20)、(450依20)滋m;培養(yǎng)30d時(shí),20益下盤(pán)狀體直徑增加至(1200依40)滋m,明顯大于15益和10益下的(850依30)、(600依30)滋m。
2.2溫度對(duì)絲狀體、葉狀體形成的影響
當(dāng)盤(pán)狀體直徑達(dá)到100滋m左右時(shí),其中央及周邊部分表面細(xì)胞拉長(zhǎng)并延伸出盤(pán)狀體表面,細(xì)胞內(nèi)原生質(zhì)向上移動(dòng)使細(xì)胞頂端膨大呈褐色棒狀,部分棒狀細(xì)胞經(jīng)2~3次細(xì)胞橫分裂,形成3~5個(gè)細(xì)胞的絲狀體,經(jīng)生長(zhǎng)后形成多細(xì)胞絲狀體(圖2-C)。剛形成的絲狀體為單條絲狀體,絲狀體長(zhǎng)為300~400滋m,寬為120~150滋m,內(nèi)含褐色盤(pán)狀色素體,隨后產(chǎn)生分枝并生長(zhǎng)成為分枝絲狀體藻團(tuán)。從表2可見(jiàn):在20益下,培養(yǎng)5d時(shí)開(kāi)始形成絲狀體,培養(yǎng)10d時(shí)形成率達(dá)到(250依50)%,培養(yǎng)30d時(shí)絲狀體形成率達(dá)到100%,每個(gè)盤(pán)狀孢子體上一般都形成多個(gè)絲狀體;在15益下,培養(yǎng)10d時(shí),盤(pán)狀體上開(kāi)始形成絲狀體,培養(yǎng)30d時(shí),絲狀體形成率為(800依60)%;在10益下,培養(yǎng)20d時(shí),盤(pán)狀體上才開(kāi)始形成絲狀體,培養(yǎng)30d時(shí),絲狀體形成率僅為(200依30)%,且每個(gè)盤(pán)狀孢子體上形成的絲狀體數(shù)量均明顯少于20益和15益下形成的絲狀體數(shù)量(P<001)。葉狀體是由2~5列細(xì)胞組成的細(xì)長(zhǎng)藻體,一般形成于盤(pán)狀體中部。開(kāi)始時(shí)盤(pán)狀體中部細(xì)胞顏色加深,分裂加快,隨后延伸出盤(pán)狀體表面并生長(zhǎng)成為葉狀體(圖2-D)。當(dāng)葉狀體生長(zhǎng)到一定長(zhǎng)度(200滋m左右)時(shí)生長(zhǎng)停止,藻體逐漸失去光澤、變厚,縱裂為2~5條由單列細(xì)胞組成的絲狀體(圖2-E)。葉狀體的產(chǎn)生非常普遍,且每個(gè)盤(pán)狀體上產(chǎn)生葉狀體的數(shù)量也較多,部分盤(pán)狀體上形成的葉狀體可達(dá)十余棵。
2.3溫度對(duì)絲狀體生長(zhǎng)的影響
切碎后的絲狀體藻段長(zhǎng)度為70~230滋m,平均為160滋m,依靠破碎細(xì)胞溢出的原生質(zhì)黏附在基質(zhì)上。絲狀體生長(zhǎng)時(shí),首先細(xì)胞拉長(zhǎng),細(xì)胞內(nèi)的盤(pán)狀色素體也隨之變細(xì)拉長(zhǎng),隨后細(xì)胞中間產(chǎn)生隔閡,色素體和原生質(zhì)也被分隔,分裂為2個(gè)細(xì)胞,在顯微鏡下可見(jiàn)多個(gè)細(xì)胞同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞分裂,藻體長(zhǎng)度增加很快,在20益下培養(yǎng)1個(gè)月時(shí),可生長(zhǎng)成長(zhǎng)度為5mm左右的單列細(xì)胞絲狀體。隨后絲狀體兩側(cè)產(chǎn)生少數(shù)分枝并延長(zhǎng)為分枝絲狀體,培養(yǎng)2個(gè)月時(shí),生長(zhǎng)成直徑為5mm左右的絲狀體藻團(tuán)。不同溫度對(duì)絲狀體生長(zhǎng)的影響如表3所示。從表3可見(jiàn),培養(yǎng)30d時(shí),絲狀體的長(zhǎng)度在20益下達(dá)到(64依03)mm,在15益下為(47依04)mm,在10益下僅為(30依01)mm。結(jié)果表明,在設(shè)定的3個(gè)溫度條件下,絲狀體在20益下生長(zhǎng)最快,15益下次之,10益下最慢。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,絲狀體藻團(tuán)細(xì)胞分裂旺盛,長(zhǎng)度快速增加,同時(shí)部分細(xì)胞縮短變粗,細(xì)胞內(nèi)原生質(zhì)濃度增加呈黑褐色。之后,筒狀細(xì)胞逐漸膨大,在其上端或下端向周邊環(huán)生出多個(gè)圓形小細(xì)胞,經(jīng)生長(zhǎng)后聚集在一起形成節(jié)狀細(xì)胞團(tuán)。節(jié)狀細(xì)胞團(tuán)多環(huán)生于細(xì)胞隔閡處,由十余個(gè)或幾十個(gè)直徑為6~10滋m的圓形細(xì)胞組成,細(xì)胞內(nèi)具有1個(gè)盤(pán)狀色素體和豐富的原生質(zhì),呈黑褐色。培養(yǎng)后絲狀體藻團(tuán)的絲狀體上形成大量節(jié)狀細(xì)胞團(tuán)(圖2-F)。
2.4幼苗的形成與生長(zhǎng)擴(kuò)增后的絲狀體
如圖3-A所示,經(jīng)切碎后的絲狀體藻段長(zhǎng)度為110~230滋m,平均為155滋m,依靠切斷細(xì)胞溢出的原生質(zhì)黏附在基質(zhì)上。在10益下切碎3d后,在顯微鏡下可見(jiàn)絲狀體細(xì)胞逐漸變短,細(xì)胞內(nèi)原生體濃度增加并呈褐色,細(xì)胞表面產(chǎn)生突起并向上延伸呈透明棒狀,細(xì)胞內(nèi)的盤(pán)狀色素體及原生質(zhì)向棒狀細(xì)胞內(nèi)移動(dòng),使棒狀細(xì)胞呈淺褐色,隨后棒狀細(xì)胞逐漸拉長(zhǎng)并分裂為2~3個(gè)細(xì)胞,上部細(xì)胞頂端生出透明無(wú)色毛,基部細(xì)胞向下延伸出透明假根絲,附著在基質(zhì)上成為萱藻幼苗。一般情況下,絲狀體藻段與基質(zhì)接觸的兩端細(xì)胞先形成幼苗,未與基質(zhì)接觸的細(xì)胞和絲狀體藻段的中間細(xì)胞形成幼苗相對(duì)較晚,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),幾乎所有絲狀體藻段細(xì)胞均能形成幼苗,顯微鏡下可見(jiàn)1個(gè)絲狀體藻段上有多棵幼苗生出(圖3-B)。節(jié)狀細(xì)胞團(tuán)被打碎后散落在基質(zhì)上,在10益下,圓形細(xì)胞3d時(shí)開(kāi)始增大,與基質(zhì)的附著面變?yōu)楸鈭A形,隨后表面產(chǎn)生突起并延伸成棒狀細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)的色素體和原生質(zhì)移動(dòng)到棒狀細(xì)胞內(nèi)后成為透明細(xì)胞空殼,并與棒狀細(xì)胞相連。隨后棒狀細(xì)胞基部產(chǎn)生隔閡并分裂成3~5個(gè)細(xì)胞,上部細(xì)胞頂端生出無(wú)色毛,下部細(xì)胞生出假根絲并延伸到基質(zhì)表面成為萱藻幼苗。不同溫度對(duì)幼苗形成率的影響見(jiàn)表4。從表4可見(jiàn),溫度對(duì)幼苗形成率的影響極顯著(P<001)。10益下,絲狀體細(xì)胞切碎5d時(shí)便開(kāi)始形成幼苗,10d時(shí)幼苗形成率為(240依20)%,20d時(shí)形成率為(850依80)%,30d時(shí)形成率達(dá)到100%;15益下,絲狀體細(xì)胞切碎10d時(shí)開(kāi)始形成幼苗,20d時(shí)幼苗形成率為(180依20)%,30d時(shí)形成率為(450依50)%;20益下,絲狀體只進(jìn)行旺盛的細(xì)胞分裂,切碎30d時(shí)也沒(méi)有幼苗形成。不同溫度對(duì)幼苗生長(zhǎng)的影響如表5所示。從表5可見(jiàn):在10益下,培養(yǎng)10d時(shí)幼苗長(zhǎng)度為(12依02)mm,20d時(shí)長(zhǎng)度增加至(52依01)mm,30d時(shí)長(zhǎng)度達(dá)到(110依03)mm;在15益下,培養(yǎng)10d時(shí)幼苗長(zhǎng)度為(08依01)mm,20d時(shí)長(zhǎng)度為(32依03)mm,30d時(shí)長(zhǎng)度為(62依04)mm;20益下,培養(yǎng)10d時(shí)幼苗長(zhǎng)度為(05依01)mm,20d時(shí)長(zhǎng)度為(12依02)mm,30d時(shí)長(zhǎng)度僅增至(24依01)mm,顯微鏡下可見(jiàn)幼苗呈彎曲狀,藻體表面細(xì)胞凹凸不平,部分藻體已經(jīng)死亡。
2.5幼苗培育及栽培
附著在維尼綸網(wǎng)簾上的絲狀體細(xì)胞在培育10d左右時(shí)陸續(xù)形成幼苗,培養(yǎng)40d時(shí)幼苗藻體長(zhǎng)度已達(dá)10cm左右(圖3-C),隨后于2014年11月30日,研究人員將生長(zhǎng)在維尼綸繩網(wǎng)簾的幼苗移至海區(qū)浮筏上栽培,4個(gè)月后生長(zhǎng)成藻體長(zhǎng)度為60cm左右的萱藻成體(圖3-D)。
3.討論
萱藻的常規(guī)人工育苗要經(jīng)歷合子采集、盤(pán)狀體孢子體室內(nèi)培育、游孢子采集和幼苗培育等階段,一般需要6個(gè)月左右的培育時(shí)間。由于育苗時(shí)間長(zhǎng),特別是在夏季高溫期內(nèi),雜藻大量繁衍導(dǎo)致盤(pán)狀孢子體死亡或發(fā)育程度降低,難以獲得大量孢子,導(dǎo)致育苗失敗[11-12]。本研究中,根據(jù)萱藻配子異宗結(jié)合的特點(diǎn)[6],從單株種藻采集的配子孤雌生殖形成盤(pán)狀體上獲得絲狀體,經(jīng)增殖后,采用絲狀體采苗的方法,將絲狀體切碎并撒在維尼綸繩等附著基上,絲狀體細(xì)胞直接萌發(fā)形成萱藻幼苗,將育苗時(shí)間縮短到20~30d。張澤宇等[13]報(bào)道了使用從萱藻配子結(jié)合后的合子萌發(fā)形成的盤(pán)狀體上獲得的絲狀體進(jìn)行采苗和育苗的研究結(jié)果,但該方法中切碎后的絲狀體仍要經(jīng)歷盤(pán)狀孢子體形成、生長(zhǎng),以及單室孢子囊形成、成熟和游孢子放散等階段,同樣存在著育苗時(shí)間長(zhǎng)、夏季高溫期難以逾越的問(wèn)題。溫度是影響絲狀體形成和幼苗萌發(fā)的最重要因子之一。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),10~20益范圍內(nèi),溫度越高越利于絲狀體的形成和生長(zhǎng),但溫度越低越利于幼苗的形成。10益下,切碎的絲狀體細(xì)胞在短時(shí)間內(nèi)可形成幼苗,且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)幾乎所有的細(xì)胞均可形成幼苗,但在此溫度下,絲狀體幾乎不生長(zhǎng);15益下,只有部分枝端細(xì)胞和與基質(zhì)接觸的絲狀體細(xì)胞形成幼苗,未形成幼苗的絲狀體仍在繼續(xù)生長(zhǎng);20益下,絲狀體細(xì)胞不形成幼苗,只進(jìn)行細(xì)胞分裂,增加絲狀體長(zhǎng)度,且生長(zhǎng)速度明顯快于15益。絲狀體生長(zhǎng)和幼苗萌發(fā)適應(yīng)不同溫度的特性為其增殖培養(yǎng)和采苗提供了便利的條件,作者于2014年采用20益下絲狀體切碎增殖的方法,在2~3個(gè)月內(nèi)獲得了大量的絲狀體,在秋季自然水溫降至12益左右時(shí)將絲狀體切碎并撒在維尼綸繩等附著基上,在常溫下成功地培育出一定數(shù)量的萱藻幼苗。不同溫度對(duì)圓形細(xì)胞形成幼苗的影響與絲狀體藻段基本相同,20益下,圓形細(xì)胞拉長(zhǎng)后經(jīng)多次細(xì)胞分裂又形成了絲狀體。10益下,由圓形細(xì)胞形成的幼苗生長(zhǎng)很快,藻體先進(jìn)行細(xì)胞橫分裂,成為十余個(gè)細(xì)胞的單列細(xì)胞藻體后,藻體基部細(xì)胞逐漸增大,向下分生出多條假根絲,經(jīng)分裂形成盤(pán)狀固著器附著在基質(zhì)上。隨后,自基部細(xì)胞開(kāi)始細(xì)胞縱分裂,形成多列細(xì)胞藻體,再經(jīng)過(guò)多次縱橫分裂后生長(zhǎng)成為肉眼可見(jiàn)的圓柱狀萱藻幼苗。
參考文獻(xiàn):
[1]曾呈奎中國(guó)海藻志(第三卷):褐藻門(mén)(第二冊(cè))墨角藻目[M]北京:科學(xué)出版社,2000:54-56
[2]錢(qián)樹(shù)本,孫軍,劉濤海藻學(xué)[M]青島:中國(guó)海洋大學(xué)出版社,2014:636-637
[3]李偉新,朱仲嘉,劉鳳賢海藻學(xué)概論[M]上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1982:151-153
[4]孫杰,繆靜,朱路英,等煙臺(tái)沿海4種常見(jiàn)海藻的氨基酸分析及營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)[J]安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(8):3081-3082
[5]王慶鈞,谷越,楊穎,等萱藻中巖藻聚糖硫酸脂的提取工藝優(yōu)化及其保肝護(hù)肝作用[J]大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2015,30(4):417-421
[6]堀輝三藻類的生活史集成:褐藻·紅藻類:第2卷[M]東京:內(nèi)田老鶴圃,1993:54-55
[7]久保昭史萱藻科有用海藻的養(yǎng)殖研究[J]神水試業(yè)績(jī),1987(3):41-48
[8]三浦昭雄食用藻類瘴栽培[M]東京:疭星社厚生閣,1992:101-105
[9]張澤宇,李曉麗,劉宏宇,等萱藻絲狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)及采苗研究[J]大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,25(1):14-18
作者:李曉麗 申元 曹淑青 張澤宇 單位:大連海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室