四逆散對水環(huán)境的影響范文

本站小編為你精心準(zhǔn)備了四逆散對水環(huán)境的影響參考范文，愿這些范文能點(diǎn)燃您思維的火花，激發(fā)您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

1模型制備

水環(huán)境小平臺站立法模型大鼠的復(fù)制，采用D．Suchecki多平臺法(modifiedmultipleplatformmethod，MMPM)進(jìn)行改良制作［4］，其將大鼠置于睡眠剝奪平臺，進(jìn)行連續(xù)部分睡眠剝奪14d，具體方法如下:①適應(yīng)性飼養(yǎng)，購進(jìn)動物先進(jìn)行3d適應(yīng)性飼養(yǎng)，在中醫(yī)診斷動物研究實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。40W日光燈照射(8∶00－20∶00)，室內(nèi)溫度控制在22．0～24．0℃，保持安靜，大鼠第籠5只。常規(guī)鼠類飼料喂養(yǎng)。②一般訓(xùn)練，實(shí)驗(yàn)前3d，讓大鼠適應(yīng)水槽環(huán)境，即每天18∶00將小鼠置于平臺，訓(xùn)練平臺站立，水面距平臺面約1.0cm，水溫保持在20～22℃，每個(gè)水槽中隨機(jī)分配一組大鼠(10只)，適應(yīng)2h后放回鼠籠。每天訓(xùn)練60min，訓(xùn)練3。第3天結(jié)束時(shí)，剔除不適于游泳運(yùn)動的大鼠。③水環(huán)境小平臺站立，從第4天開始，進(jìn)行部分睡眠剝奪(18∶00－9∶00)，9∶00以后將其從平臺取下放入鼠籠進(jìn)行飼養(yǎng)，連續(xù)處理14d。環(huán)境持續(xù)光照，水槽中水每日更換，保持水溫為22℃左右。

1．1模型制作方法剝奪箱(110cm×60cm×40cm)中放置15個(gè)平臺(直徑6．5cm，高8．0cm)，在平臺周邊注滿水，水溫保持在22℃左右，水面低于平臺表面1．0cm。將10只大鼠放置平臺上，大鼠在平臺上可自行飲食飲水，并可在平臺間活動。當(dāng)大鼠進(jìn)入異相睡眠時(shí)，由于全身肌肉張力降低，節(jié)律性地垂頭觸水或落入水中覺醒，從而使動物始終不能進(jìn)入異相睡眠。

1．2給藥方案自造模第1天始，每天于睡眠剝奪后9∶00，四逆散高劑量組、中劑量、低劑量組，陽性對照藥均按人體用藥量換算成大鼠等效劑量統(tǒng)一作為用藥量，藥物濃度按10mL•kg－1灌胃容量用蒸餾水配制，約為每250g體質(zhì)量2mL，根據(jù)大鼠體質(zhì)量調(diào)整用藥量，連續(xù)給藥14d。空白對照組、模型組均灌服等體積蒸餾水。

2檢測指標(biāo)及方法

2．1曠場實(shí)驗(yàn)?zāi)举|(zhì)曠場箱(100cm×100cm×40cm)為立方形，由北京中醫(yī)藥大學(xué)神經(jīng)免疫實(shí)驗(yàn)室提供。內(nèi)側(cè)壁及底面為灰色，用黑線劃分為25格，每格形制均為20cm×20cm。沿側(cè)壁的格稱為外周格(16個(gè)周邊正方形)，其余為中央格(9個(gè)中心正方形)。正中格正上方安置攝像頭。剝奪14d時(shí)，于安靜、遮光條件下進(jìn)行曠場實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前先置大鼠于測試實(shí)驗(yàn)室內(nèi)適應(yīng)10min。操作者握住大鼠尾根部1/3處，輕輕將大鼠放入曠場箱的正中格內(nèi)，開始同步錄像、計(jì)時(shí)。觀察5min內(nèi)大鼠活動情況。取出大鼠后，用毛巾蘸清水及低濃度乙醇徹底擦拭箱底及箱壁，并等待其揮發(fā)擴(kuò)散，避免留有氣味而干擾下一只大鼠的觀察結(jié)果。

2．2檢測指標(biāo)①穿格次數(shù)(次);②站立次數(shù)(次);③修飾次數(shù)(次)。

3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x珋±s)描述，正態(tài)分布的資料采用單因素方差分析，偏態(tài)分布的資料采用秩和檢驗(yàn)檢驗(yàn)。P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4結(jié)果

各組大鼠曠場垂直活動、水平活動見表1，表2。

5討論

本研究從中醫(yī)發(fā)病機(jī)制出發(fā)，旨在從這一特殊角度揭示和發(fā)展“中醫(yī)病因病機(jī)學(xué)”與“中醫(yī)環(huán)境學(xué)”，并深入探究水環(huán)境小平臺站立法大鼠模型的“勞倦”特性。大鼠在新環(huán)境中情緒變化要經(jīng)歷緊張、興奮、探索、適應(yīng)4個(gè)步驟。因此，大鼠興奮程度常以跨格次數(shù)來反應(yīng)。大鼠在興奮狀態(tài)下多表現(xiàn)為活動頻繁，并留下自身的生物氣息。現(xiàn)代研究認(rèn)為，曠場實(shí)驗(yàn)中動物總運(yùn)動距離和總穿格數(shù)、央?yún)^(qū)域運(yùn)動距離與中央?yún)^(qū)域停留時(shí)間都具有良好相關(guān)性，重復(fù)性好，也證明了他們間的對應(yīng)關(guān)系。然而大鼠總運(yùn)動距離等新指標(biāo)應(yīng)能更直接地反應(yīng)動物的興奮程度，防止人為對實(shí)驗(yàn)動物造成的“二次應(yīng)激”。根據(jù)研究結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，①模型組行為學(xué)指標(biāo)均高于正常組，環(huán)境對照組略高于正常組且與模型組有差異，提示本研究的造模方法已達(dá)到理想的水平，符合造模要求;②陽性對照組各數(shù)值趨近并略高于正常組，由于行為學(xué)檢測的誤差，尚可提示對照組為有效性對照;③四逆散高劑量、中劑量、低劑量組數(shù)值均低于模型組，而趨近于正常組，提示水環(huán)境小平臺站立法大鼠模型存在著心理情緒的異常改變［7］。水環(huán)境小平臺站立法模型大鼠情緒變化較為顯著，與中醫(yī)“倦”的概念相吻合。同時(shí)，模型大鼠也出現(xiàn)進(jìn)食量減少，體質(zhì)量減輕，神情倦怠脾虛證癥狀，證明了“勞倦傷脾”理論［8］。《素問•本病論》曰:“人飲食勞倦即傷脾。”現(xiàn)代學(xué)者認(rèn)為，狹義勞倦不包括飲食失宜，僅指過勞(勞力、勞神、房勞)，作為病因常以“飲食勞倦”形式出現(xiàn)［9］。所以，本研究從中醫(yī)學(xué)“肝主疏泄”出發(fā)，立足于“改善神經(jīng)心理異常”環(huán)節(jié)，完善心理情緒異常的治療理念與方案，利用“疏肝理脾”代表方劑四逆散。四逆散出自《傷寒論》，由柴胡、白芍、枳實(shí)、甘草四味藥組成，是疏肝解郁，調(diào)和肝脾的基礎(chǔ)方。原方組成為柴胡、枳實(shí)、芍藥、炙草各等分。《神農(nóng)本草經(jīng)》記載:柴胡主心腹腸，胃中結(jié)氣，飲食停驟，寒熱邪氣，推陳致新;枳實(shí)除寒熱結(jié)，止利等;芍藥主邪氣，腹痛，除血痹，破堅(jiān)積，止痛，利小便;甘草主五臟六腑寒熱邪氣。方中柴胡，疏泄肝氣。甘草，養(yǎng)肝健脾，有利于柴胡升散肝氣之運(yùn)化。枳實(shí)，降氣、行氣，與柴胡配伍一升一降，共調(diào)肝脾之氣機(jī)。芍藥，可入血分，枳芍配伍可助血行，血行可載陽氣達(dá)四末。四者相合，共奏疏肝理脾、調(diào)和氣血之功。

作者：馬捷 劉晶 劉燕 李峰 宋月晗 韓晨霞 郭思媛 楊茜 單位：北京中醫(yī)藥大學(xué)