蘇武傳教案范文

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第1篇

關鍵詞硫胺素焦磷酸核酶開關； 增強綠色熒光蛋白； 基因表達調控； 熒光生物傳感器； 哺乳細胞

1引 言

核酶開關是近些年出現的一種人工基因調控開關。常見的核酶開關由錘頭狀核酶和適配體組成[1]。作為一種順式作用元件，在特異識別適配體的配體作用下，無需蛋白質輔助，即可通過調節自身裂解反應，調控mRNA的翻譯，已應用于多種細胞的基因調控[2～6]。迄今，隨著指數富集配基系統進化技術（SELEX）[7]技術發展，越來越多的適配體被篩選出來，能特異性地結合小分子、蛋白質、多肽、氨基酸、抗生素和金屬離子等各種配體[8～11]。相比于天然的核酶開關，人工核酶開關具有基因表達可控性、結構可組裝性、靶基因特異性等特點[12]。配體與適配體區的結合引起的構象變化可用來調控下游基因的表達，轉化成相關的化學信號，如報告基因的熒光變化等，可實現對配體在活細胞內的原位、可視化檢測。如今，合成生物學的發展及核開關在邏輯門中的運用，更推動了基于核酶開關的生物傳感器在真核細胞內的廣泛應用[13]。

硫胺素焦磷酸（Thiamine pyrophosphate，TPP） 是維生素B1在細胞內的主要活性形式，也是糖、脂肪酸和氨基酸氧化代謝中重要的輔助因子，對維持細胞正常代謝、細胞生長和增殖等發揮極其重要的作用。TPP 核酶開關是唯一同時存在于原核生物和真核生物中的天然核糖開關，在植物和真菌中較為常見[14～17]。其在真核細胞中主要作用于premRNA的內含子剪切，可實現對基因精確和有效的調控。無論是在真核中，還是原核生物中，TPP核酶開關對TPP都有高的特異性和親和力，而細胞中的其它組分或相似產物與核酶開關適配區結合能力很弱[18～20]，對核酶的活性影響很小。文獻[21～24]報道，將TPP適配體與天然核酶組裝成人工的TPP核酶開關，用于體外、原核細胞或藻類等細胞中調節靶基因的表達。目前，在哺乳細胞中運用的核酶開關適配體結構多限于茶堿、四環素、金屬離子等配體的適配體[25，26]。這些配體為細胞外源物，且常具有一定細胞毒性。而TPP是真核細胞的一種重要的代謝中間物，在細胞體內含量較低，人工建立的核酶開關用于調節哺乳細胞內的基因表達還未見報道。

迄今為止，原核生物中報道的人工TPP核酶開關有正調控和負調控兩種類型[21]，一般置于靶基因5′端。通過配體與適配體的作用，調控核酶剪切與否，釋放或封閉RBS序列以促進或關閉下游基因的表達[27]。真核生物中因無RBS 序列，核酶開關通過抑制mRNA剪切上調靶基因的表達，或激活mRNA剪切來抑制靶基因的表達[28，29]。目前，人工核酶開關的設計一般通過理性設計通信模塊元件序列，再整合到細菌或酵母mRNA中進行功能篩選與優化[30，31]。

2實驗部分

2.1儀器與試劑

Eppendorf mastercycler nexus PCR儀（德國Eppendorf公司）； Nikon ECLIPSE TI倒置熒光顯微鏡（日本Nikon公司）； BD Accuri C6流式細胞儀（美國BD公司）。

焦磷酸硫胺素（>95.0%，美國Sigma公司）； 茶堿（>99.0%，北京百靈威科技有限公司）； DpnI酶（50 U/μL，美國NEB公司）； T4 連接酶（5 U/μL，美國Invitrogen公司）； lipofectamine 2000轉染試劑、DMEM培養基（美國Invitrogen公司）； 小牛血清（美國Gibco公司）。

2.2哺乳細胞中TPP核酶開關質粒的構建

將來源于Schistosoma mansonii錘頭狀核酶 （HHR） 序列插入pEGFPN1載體EGFP基因的3′ UTR 區。 pEGFPN1質粒為模板，5′ 重疊延伸PCR方法構建無TPP適配體區的pEGFPHHR。PCR反應： 94℃預變性2 min，94℃ 30 s， 60℃ 30 s， 72℃ 1 min， 25個循環； 72℃延伸10 min。PCR反應體系： 5 μL 10 × Phusion DNA polymerase buffer， 4 μL 10 mmol/L dNTP， 2 μL 10 μmol/L primer F， 2 μL 10 μmol/L primer R， 1 μL Template， 0.25 μL Phusion DNA polymerase； 加ddH2O至50 μL。PCR產物用乙醇回收，DpnI酶37℃消化PCR產物中過量的質粒模板1 h，用乙醇回收產物，T4 DNA ligase連接轉化至感受態細胞，后涂布至含有相應抗性的LB平板中37℃過夜培養。挑取單克隆培養，提取質粒并送上海生工生物技術公司測序，GenBank中BLAST序列比對。測序成功產物作為模板用于后續帶有TPP適配區on/off型核酶開關的構建，其構建方法同上，其序列與相關引物見表1。所有寡核苷酸及引物由上海生工生物技術公司合成。

2.3哺乳細胞的培養及瞬時轉染

HEK293細胞于添加10% 小牛血清的DMEM中，37℃， 5% CO2培養。轉染前一天，以5×104/孔密度，添加0.5 mL DMEM/孔鋪于24孔板。根據轉染條件，以每孔1 μg pEGFPTPPHHR質粒與2 μL lipofectamine 2000轉染細胞，pEGFPN1與pEGFPHHR分別為陰性與陽性對照，4 h后換新鮮培養基并添加不同梯度濃度（0～150 μmol/L）的TPP或茶堿（Theophylline）。

2.4轉染后細胞內EGFP表達的熒光顯微鏡觀察與流式細胞儀分析

細胞轉染48 h后， PBS洗滌，熒光顯微鏡下以488 nm 激發波長，515～545 nm發射波長觀察EGFP

3結果與討論

3.1pEGFPTPPHHRON/OFF質粒的構建

人工TPP核酶開關有正調控和負調控兩種類型，無論對于原核生物或真核生物，人工核酶開關上調或抑制表達的關鍵取決于連接適配體結構域與核酶結構域的通信模塊，即連接適配體區（Stem Ⅲ）與錘頭狀核酶（HHR）（圖2A）莖環結構（StemⅡ）之間的寡核苷酸序列，故TPP適配區與HHR核酶的接頭序列是決定核酶開關是“Switch on”還是“Switch off”的關鍵。在負調控（Switch off）開關中，無配體時，錘頭狀核酶（HHR）的活性結構得不到維持，從而抑制HHR核酶的剪切。而TPP配體的結合，可引起核酶開關莖環結構Stem Ⅱ與Stem Ⅰ 之間活性結構的穩定，剪切發生。反之，正調控（Switch on）結構具有初始穩定的HHR剪切結構，而TPP的結合反而破壞了HHR的活性結構，從而抑制剪切的發生[21，23]。根據原核生物中優化的連接適配體與核酶的6個寡核苷酸的不同序列，共構建了3種Off（pEGFPTPPHHRoff1，2，3）開關及兩種On（pEGFPTPPHHRon1，2）開關的質粒（圖2B）（后續以TPPHHRon/off簡稱）。

為保證其在真核生物中的調節活性，所有開關設計均插入在目的基因EGFP 3′ UTR區。由于待插入的HHR和TPP適配體片段位于EGFP基因下游，缺少合適的限制性內切酶位點，且序列較短，僅約120～140 bp。傳統的PCR酶切連接方式的回收效率較低， 影響后續重組載體的構建，故本實驗中利用Overlap extension PCR cloning[32]將核酶開關片段插入質粒中的方法更為高效準確。設計兩條5′ 末端磷酸化的上下游引物，引物的一部分為帶插入的序列，另一部分分別和質粒插入位置的下游和上游互補，以模板質粒擴增全長。

3.2不同TPP濃度下HEK293細胞內EGFP基因表達分析

首先通過熒光@微鏡觀察瞬時轉染48 h后HEK293細胞內EGFP報告基因表達，結果表明：相比陰性對照pEGFPN1轉染細胞的EGFP高表達，陽性對照pEGFPHHR質粒轉染的細胞熒光明顯降低，表現出良好的核酶剪切功能，但無TPP濃度依耐性 （圖3A）。而隨著TPP濃度升高TPPHHRon1，2轉染細胞的綠色熒光的強度有著明顯的增強趨勢； 反之，而在構建的3個off型開關轉染細胞中，只有TPPHHRoff1隨著的TPP濃度的升高，EGFP表達明顯下降（圖3B）。

但TPPHHRoff2，3均未見熒光強度的降低，其強度接近于陰性對照， 且無TPP濃度依賴性。這可能是因為接頭序列的不完全配對造成了mRNA二級構象的不匹配[23]，而這種改變在哺乳細胞中會受到更多因素的影響，核酶更難以發揮正確的剪切功能[31]。

為進一步考察不同TPP濃度對EGFP表達的影響，利用流式細胞儀對上述EGFP表達量有改變的轉染細胞株平均熒光強度進行定量分析（圖4）。相比陰性對照，pEGFPHHR轉染細胞株熒光強度降低近80%，表明此構建體系中HHR核酶在哺乳細胞中保持其強勁的剪切作用。在構建的兩個激活型開關中，TPPHHRon1在TPP濃度達50 μmol/L 時熒光表達明顯升高； 150 μmol/L 時，平均熒光強度可增大約3.1倍，接近于報道中作用于原核細胞的Turn on功能[21]，另一TPPHHRon2熒光強度雖有升高，但開關調節功能較微弱，150 μmol/L的TPP調節只增加1.8倍的表達。而在構建的TPPHHRoff1中，TPP濃度為100 μmol/L 時，平均熒光強度降低了2.3倍，之后隨配體濃度繼續增加（150 μmol/L），其對EGFP表達的進一步抑制未有明顯效果。發現3種對TPP有響應的核酶開關，其對TPP敏感濃度約為50～100 μmol/L，實驗中曾將TPP濃度加大到500 μmol/L，但其在各種轉染細胞株中并未見明顯作用效果。相對于以往報道中茶堿在哺乳細胞中調節濃度均為1～10 mmol/L， 所構建的TPP核酶開關對TPP底物作用的敏感性大大提高。但此結果也證實了雖然核酶開關在原核生物或低等真核生物細胞中有良好的調控作用，但其結果并不完全適用于哺乳細胞。在很多報道中， 原核生物系統中的核酶開關可達到1.2～10倍的調節功能[23，30]，雖遠小于體外100～10000倍的調節幅度[22]，但在真核哺乳細胞中的調節效果更低，且調控能力亦會因轉基因或宿主細胞種類的不同而有所改變[31]。相比于原核生物相對簡單的轉錄翻譯機制，其核酶開關在真核細胞中mRNA二級結構的正確形成常會受到更多轉錄翻譯等相關因子的影響，更增加了其調節的難度和不確定性。

為了檢測TPP核酶開關的特異性，在平行樣本中均加入了茶堿。實驗表明，茶堿的添加并不能激活核酶開關發生構象變化，從而影響報告基因綠色熒光蛋白的表達。結果表明，這些原本適用于原核生物的核酶開關對適配體較高的特異性在哺乳細胞內仍能得到較好的保留。

4Y 論

研究了原核生物篩選的基于TPP適配體的兩種類型的核酶開關，通過TPP配體與人工核酶的變構作用，激活或抑制核酶的剪切，實現了在哺乳細胞中調節報告基因綠色熒光蛋白（EGFP）的表達。此方法可用于間接檢測哺乳細胞內微環境中的TPP濃度，這種基于變構活性來調節下游報告基因活性的策略，利于通過熒光檢測用于哺乳活細胞內代謝物或因子的無標記、無損傷、可視、高效的檢測。雖然相對于體外檢測，這種細胞內原位檢測方法所需的本底濃度水平較高（umol/L），但今后隨著合成生物學中基因表達的級聯放大技術的發展和邏輯門等方法的結合運用， 這種基于核酶開關的生物傳感器將在提高哺乳細胞檢測敏感性和運用廣泛性方面具有極大的潛力[33]。

第2篇

被告：四川省民族貿易聯合公司（以下簡稱民貿公司）。

1993年初，四川省政府決定由民貿公司在成都市市區設立“中國西部民族用品批發市場”（以下簡稱“市場”）。設該市場需資金6000萬元。由于資金短缺，民貿公司決定出售“四川民貿大廈”及附屬設施（主樓14層，建筑面積9459平方米），其價值約人民幣6000萬元。隨后，國貿公司表示愿購此樓。同年2月10日，雙方經協商，簽訂了由國貿公司以支援“市場”建設名義向民貿公司捐贈4750萬元的捐贈協議，并約定此款在7月19日前分3次撥付，4月10日之前應撥付民貿公司1325萬元。2月16日，民貿公司與國貿公司簽訂房屋買賣合同，約定民貿公司以1250萬元的價格將“四川民貿大廈”及附屬設施賣給國貿公司。合同簽訂后，民貿公司即將大廈內的3間辦公室交給國貿公司使用，隨后又將大廈產權證交國貿公司保管。4月3日，國貿公司持房屋買賣合同、批復及民貿公司的過戶申請等，到成都市房地產管理部門辦理了大廈的產權過戶手續，并取得了產權證。4月9日，民貿公司為交付房屋作準備，與成都新華飯店簽訂租房協議，并支付租金17.5萬元，花費裝修費42248.02元，電話移機費6267元。5月10日，國貿公司向成都市房地產管理部門交納了手續費、登記費、書證費共250010元，28日又交納了土地增值費1981070元。至6月5日止，國貿公司陸續向民貿公司支付了購房定金100萬元及購房款300萬元。此間，民貿公司與國貿公司為支付捐贈款、購房款以及交接有關“大廈”資料和房屋買賣合同是否繼續履行等問題曾發生爭議。四川省國有資產管理局在得知雙方的大廈轉讓情況后，于7月19日發出文件，指出大廈的買賣非法，要求立即停止。為此，雙方進行協商，因認識不一而未達成一致意見。9月7日，國貿公司訴至成都市中級人民法院稱：雙方簽訂的房屋買賣合同經雙方主管單位認可生效，原告按合同規定向被告交付了100萬元的定金及房款300萬元，同時雙方辦理了大廈產權過戶手續，原告取得大廈的產權證。但被告未按合同規定交付有關資料和騰空房屋，致原告不能實際使用房屋。請求法院督促被告履行合同，承擔騰退房屋的義務。 民貿公司則辯稱：原告根本無意兌現捐贈協議，在無履行能力的情況下，以向“市場”捐贈4750萬元為誘鉺，與被告簽訂“大廈”買賣協議，實為欺詐行為。因此，雙方簽訂的房屋買賣協議無效，不受法律保護。被告愿意退還原告已支付的款項。

「審判

法院審理中還查明，國貿公司在訴訟中強占了“四川民貿大廈”五樓另外5間辦公室。四川民貿大廈建于1991年底，總造價為14905840.23元。 成都市中級人民法院經審理，認為：國貿公司與民貿公司買賣“四川民貿大廈”，雙方雖有房屋買賣合同，并經各自的主管部門批準，但從雙方先后形成的兩個協議和民貿大廈的實際價值看，以1250萬元購買民貿大廈，不是雙方的真實意思表示。實際上，該買賣合同是以捐贈協議為前提的，雙方簽訂以1250萬元買賣民貿大廈房屋買賣合同，其真正目的在于逃避稅費，規避法律，故此買賣房屋的合同無效。民貿公司應退還國貿公司已付的購房款，國貿公司應從“四川民貿大廈”中搬出，并支付占用房屋使用費；國貿公司與民貿公司在買賣房屋過程中均有過錯，因合同無效造成的損失，即國貿公司支付購房款的利息及辦理產權過戶手續交納的有關登記費、增值費；民貿公司另處租房的房租費用，應由雙方共同承擔。據此，依照《中華人民共和國民法通則》第五十八條第一款第（四）項及第二款、第六十一條和《中華人民共和國經濟合同法》第七條第一款第（四）項、第二款，第二十九條第一款之規定，成都市中級人民法院于1994年4月28日判決如下：

一、國貿公司與民貿公司于1993年2月16日簽訂的“四川民貿大廈”房屋買賣合同無效。 二、國貿公司應于本判決生效后一個月內將所占用的8間房屋騰空，完好地退還給民貿公司。 三、在本判決生效后一個月內，民貿公司退還國貿公司購房款400萬元。國貿公司應將占用“四川民貿大廈”8間房屋的使用費給付民貿公司，3間房屋從1993年3月起每月按2400元計算至1993年9月止，8間房屋從1993年10月起每月按6400元計算至歸還之月止。 四、國貿公司給付民貿公司購房款的利息損失，從該款付出之日起至歸還之日止，按建設銀行同期建設貸款利率計算，由國貿公司和民貿公司各承擔一半。 五、國貿公司在辦理產權過戶手續時所交納的手續費、登記費及土地增值費共2231080元，由國貿公司和民貿公司各承擔一半。 六、民貿公司因賣房而在另處租房的費用223515.02元，由國貿公司和民貿公司各承擔一半。 宣判后，雙方當事人表示服判，未提出上訴，并自動執行了該判決。

「評析

正確處理好本案的關鍵，在于認定雙方當事人簽訂的房屋買賣合同是否有效。 從形式上看，國貿公司與民貿公司簽訂的房屋買賣合同，系雙方自愿，并經有關主管部門批準，手續齊備。同時，國貿公司也依法辦理了產權過戶手續，并交納了法律規定應交納的費用，取得了大廈的產權證。房屋買賣合同似乎具備了成立的一切條件，應該認定有效。

第3篇

關鍵詞：平山縣；基地教研；校本教研；課題教研；網絡教研；培訓教研；論文教研

中圖分類號：G622.0 文獻標識碼：A 文章編號：1009-010X（2013）12-0019-04

教不研則淺，研不教則空。作為縣級教研室應該一頭挑起“教”，一頭挑起“研”，兩頭關系均衡了，才能擔負起一縣的教研重任，讓課程改革因我們而深入，讓教學質量因我們而提高，讓平山教育因我們而改觀，不斷向前。

一、走下去――由點到面，搞好基地教研

教研，實際就是“研教”，就是研究教學，改善教學。教研的內容必須從教學中來，只坐在辦公室搞教研必然空洞和浮淺。搞好教研，教研員必須走下去，走進學校，走進課堂，走進教師隊伍。

“走下去”的關鍵，是怎么走，走向哪里。

（一）研校情

教學講究關注學情，教研則應關注“校情”。平山縣作為一個貧困山區縣，教學點多，分布廣而散，路程較遠，交通極為不便，邊遠山區的教師要參加一次全縣教研會十分困難；加之隨著計劃生育政策的持續實施，農村學校生源逐年遞減，再加上我縣城鎮化建設進程的加速，導致了一些農村學校學生流失，與此同時，學生數量不足也帶來教師人數的減少，部分學校尤其是小學科，一所學校一個年級往往只有一名教師，許多學科單人獨崗，專業引領、同伴互助相對困難，很難有效進行集體備課和校本教研。

（二）劃基地

針對這種情況，我們根據全縣學校的地域分布，劃分出了城關、南甸、崗南、回舍、古月、小覺六個中、小學教研基地；每個教研基地都以本基地的縣直屬中學或中心小學作為基地校，向周圍學校輻射，形成協同備課、合作教學的教研基地；每個教研基地都分包給教研員，并由縣直屬中學或小學中心學校主抓教學的副校長擔任基地負責人，負責基地教研課題的選定、參研學校的聯絡、專業指導的選定等工作。基地教研輪流在基地各個學校開展，并規定每個學校每學期必須承擔一次基地活動，基地各學校的同學科教師必須參與。這樣，就有效地促進了學校之間、校長之間、教師之間的層層交流和互動，各個教學點上的教師也有機會參與集體備課和校際教研活動了；而且每次基地教研活動都要求教研員深入學校，參與教研，一年來，教研員幾乎走遍了全縣各個學校。

通過“走下去”和由點到面的基地教研，各個學校信息多了，活動多了，大家有共同的關注點了。大家在合作中尋找差異，在差異中發展特色，相互借鑒，相互補充，相互啟發，激活了學校的教研工作，促進了教師的專業成長，形成了平山基地教研新生態。

二、領進去――由同到異，搞好校本教研

“走下去”的目的是“領進來”，即發揮教研室和教研員的引領作用，對各個學校的教研活動和教學改革進行專業指導。

（一）同課異構

同課異構，即同一進度，同一課題，由教研室和基地學校根據基地的具體教學進度選定課題，由兩所學校的教師提出不同的教學構思，展示不同的教學過程。大家在比較中互相學習，揚長避短，共同提高。有了比較，就有了壓力，為了上好課，壓力就變成了動力，從而在一定程度上緩解了教師的職業倦怠感，激發了上進心，調動了積極性，促使教師逐步從“要我教研”轉軌到了“我要教研”，突破了一些學校小學科教師單兵作戰的教研困境，為他們提供了合作互助和交流展示的平臺，他們參與集體備課和投身教研的熱情空前高漲。

（二）一課多上

一課多上，即同一個教師在不同班級上同一節課。大家先聽該教師一節課，然后進行集體研討，指出不足，幫助做課教師找到可提高、完善的空間，做課教師通過修改后，再上課；或集體備課之后按新設計上課，二次復聽；之后，再由同一學校的不同教師根據聽課結果，對集體備課方案進行再次修改，三次上課。這樣，從一課兩上到一課三上到一課多上，讓教學設計在集體備課的探討中逐步完善，也讓大家切實感受到了集體教研的力量。

（三）主題式教研

主題式教研，即把教研選題自放給各個學校，各學期開學伊始，由各學校根據上學年教研中發現的問題，總結歸納，找出一個適合本學期本年度的教研主題，上報教研室；教研室根據各學校的主題，在聽課、評課中有側重地進行指導；最后和大家一起把這些主題提煉成課題。

這樣，由同到異，促使教師們在備課、上課、評課、改課中逐漸成長。

三、鉆進去――由淺入深，搞好課題教研

教研員“走下去”，“領進去”，促使、激勵教師們扎實地“鉆進去”，讓教研上一個臺階，學校和教師就必須有自己的課題。課題研究，能夠促使教研活動由淺入深，變被動為主動。

（一）問題變課題

我們在教研活動中，鼓勵教師變問題為課題：從教學面臨的突出問題中選題，從日常的教學中選題，從成功的教學經驗中選題，從教師自身課堂實踐的矛盾沖突中選題；選擇有價值、有針對性、有可操作性的教學問題作為課題來進行研究，并讓教師體悟課題研究與日常教學密不可分，研究無處不在、無時不在，“工作即研究”。在課題研究過程中，教師既要重視“方案”和“報告”的撰寫，又不能忽視實施過程的歷練；既要重視開題時的“轟動場面”，更要重視實施進程的厚積薄發；既要重視課題的結題驗收，也要關注研究過程中材料的搜集、整理與分析。

（二）人人有課題

2011年，在教研室的號召和推動下，全縣上報課題50多個，其中，被省教科所批準立項20多個，被省教育學會批準立項30多個，居全市前列。為了利用課題搞好教研，教研室全體教研員做到了人人有課題，教研室還多次請來省、市課題專家指導課題研究工作。

（三）推廣課題研究成果

功夫不負有心人。因為勤于鉆研，我們教研室語文組對課題《頭腦風暴作文教學法在農村寄宿制中學的運用》的研究，引起了河北師大國培中心的關注和重視。這一課題由教研室語文組牽頭，參與實驗的有崗南、回舍、外國語、里莊、小覺等多所學校，2013年4月25日，教研員郭素青和課題骨干教師任增霞，被國培教育中心邀請，為農村骨干教師上了課題研討課，得到了廣大參培教師的好評。課題研究的相關論文陸續發表在《語言文字報》和《教育實踐與研究》等報刊雜志，給教師們提供了以課題促教研的很好范例。

四、拉起來――由上到下，搞好網絡教研

（一）建立平山教研網

為了更好地促進全縣教研工作的展開，在縣教育局的支持下，我們建立了平山教研網，給全縣教師提供了一個合作教研的平臺。各教研員都是本學科的網絡管理員，每次同課異構的教學設計、課件和教學反思，都在第一時間上傳教研網，以便于同學科同進度的教師們參考之用。隨著縣域網絡的進一步完善，平山教研網對全縣教研工作的不斷普及和深入發展顯示了越來越強大的功能。

（二）教研博客互動、交流

除了建立教研網，教研員還利用教育博客和同學科教師展開互動。有些平時不方便說的話，通過博客或留評發紙條等形式，進行心與心的交流，一些平時的教學問題就在博客交流中得到了解決。因為跟教師們交流語文到底是什么，我們寫出了《語文就是一種愛》發表在了《語文學習》上；為了回答山區教師發來的紙條“巴東三峽，瞿塘峽最短，西陵峽最長，巫峽長度居中，可酈道元在《三峽》里卻說‘巴東三峽巫峽長，猿鳴三聲淚沾裳’，這是為什么？”我們寫出了《巴東三峽巫峽長？》發表在了《中學語文參考上》；為了跟教師們探討語文課到底應該怎么上，我們寫出了《語文課要上出書卷味》；為參與《中國教師報》關于“買師資和買生源”的網絡討論，我們寫出了《愈演愈烈“兩買風”》，發表在了《中國教師報》上……這類簡評留言條等形式，進行了心與心的交流，一些平時的教學難題在博客交流中得到了解決。

（三）探索教研新路徑

在全縣中小學教育事業的發展中，是網絡教研由上到下、由此及彼地促成了教研員和教師們的手拉手，心交心；是網絡促成了我們的思想積累和教研論文及成果的形成；是網絡把“要我教研”在不知不覺中變成了“我要教研”。網絡教研給全縣的教學探討注入了新活力，讓教師們感到了教研的快樂和幸福，看到了提高教學質量的契機；為全縣教師的個人成長提供了一條新路徑。

五、站起來――由內到外，搞好培訓教研

要想促進教師的專業成長，僅憑聽課評課、教學探討還遠遠不夠。集中培訓，是提高教師專業素質的有效途徑。

（一）崗前培訓

為了以培訓促教研，我們首先搞好新教師和特崗教師的崗前培訓。每年的特崗培訓中，縣教育局局長、主抓教學副局長、教研室主任等都親自備課，制作課件，給即將走上工作崗位的教師講授教研之道，培養新教師的教研意識。

（二）假期培訓

每年的寒暑假，我們每位教研員都有自己的培訓任務。他們匯總平時聽課積累的各種問題，利用集體培訓的時間展開全縣集體大討論。因為這些問題都來自平時“走下去”所了解的教學實際，教師們研討起來非常有興趣。這就避免了空洞的理論培訓，讓培訓從實踐中來，再回到實踐中去。

（三）山區扶貧培訓

平山是國家級貧困縣，是石家莊市教育局“山區教育扶貧工程”的對象之一。我們很重視通過扶貧過程的同課異構，與市屬學校的教師同上一節課，很快發現了自己教學中的不足，極大調動了教師們的教研興趣，大家學優點，評缺點，嘆不足，找差距，夯實基礎，提高課堂效率成了共同的渴望和追求；通過一課兩上，大家積極研討，一同改進，共同成長，讓教研促進教師成長成為一項看得見、摸得著、能見效的活動。

（四）邀請專家培訓

我們邀請北京海淀區教師進修學校的校長和教師，利用假期為我們進行專業培訓。我們還邀請了特級教師余映朝為全縣語文教師現場做課，并作備課指導。他們把最好的方法，最有效的課堂，最先進的理念帶給了教師，讓大家耳目為之一新，眼界因之開闊，讓專業成長成為教師們一種發自內心的渴望。

（五）走出去培訓

除了請進來，我們還想方設法創造條件讓教師和校長走出去，去看看外邊的世界。我們帶領校長和教師到山東杜郎口、江蘇武進進行考察學習。通過學習，一些學校還和當地學校結成了對子，進行一對一幫扶。有些教師還到當地學校跟進學習，或邀請當地教師到我們這里給本地學生上課，讓大家觀摩、體驗其教學方法。

幫和扶都是為了促進教師們“站”起來自己走。通過由內到外的培訓和學習，教師們的內心有了變化，教學形式起了變化，教研氣氛有了變化，課堂效率顯著提高，學生的學習成績有了很大的提升。

六、編出來――由分到總，搞好論文教研

教研，教研，要到“教“中去，還要回到“研”中來，最后還要用“研”來為“教”服務。“研”要成為果，最常態的形式就是撰寫教研論文。教研室根據日常活動，進行了以論文促教研的最后編輯和匯編工作。編輯工作主要分四個環節進行。

（一）校本課程開發

平山縣地域廣闊，自然資源和人文資源都很豐富。各個基地根據自己的地域特點和歷史文化特色編寫了自己的校本課程：溫塘的溫泉，北冶的天桂山、水，三汲的古中山國，西柏坡的紅色傳統，合河口的駝梁等，都為當地校本課程的開發提供了特色，校本課程的開發和編寫，促進了各基地對地域文化的研究，成為了我們教研的鮮明特色。

（二）課題研究集錦

今年3月，已結題的課題有三十多個；還有二十多個課題即將結題。為了更好地發揮以課題促教研的作用，教研室將已批準結題的課題結題報告的精華部分和一些優秀教研論文，摘錄匯編，集印成冊，下發給各學校，以指導教學和以后的課題研究。

（三）基地教研薈萃

一學期結束時，教研室都要對基地教研的同課異構教學設計、課件，一課多上的教案的屢次修改稿，以及主題教研的優秀教研方案進行匯總，并評選出優秀教案和教研成果，匯集成《基地教研薈萃》，下發各學校交流，并據此評選出優秀教研基地，在全縣教學工作大會上予以表彰。

（四）西柏坡教研論文匯編

教研室將全縣近兩年公開發表的400多篇教學論文匯編成冊，由每位教研員擔任本學科的編審，對論文歸類，共印制出2011年（上、下），2012年（上、下）四本論文集，方便了各學科教師之間的交流，促進了教師的專業發展，推動了全縣教育、教研的深入開展。