何首烏栽培范文
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何首烏為傳統(tǒng)補(bǔ)益類中藥，為蓼科植物何首烏PolygonummultiflorumThunb.的塊根[1]，在我國黃河以南均有分布，主要含有二苯乙烯苷類、蒽醌類化合物等[2]。
二苯乙烯苷具有抗衰老、降低膽固醇、提高免疫功能、防治動(dòng)脈硬化及保肝等作用[3]，何首烏中的最重要的二苯乙烯類化合物是2,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒眨?2010版《中國藥典》將其作為何首烏藥材質(zhì)量控制的指標(biāo)。蒽醌類化合物具有調(diào)血脂、強(qiáng)心、抗菌、抗癌、提高免疫功能等作用，何首烏所含蒽醌類化合物以大黃素、大黃素甲醚、大黃酚等為主[3]。臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)何首烏質(zhì)量參差不齊，在我們的前期研究中也證實(shí)了不同產(chǎn)區(qū)何首烏藥材活性成分存在較大差異[4-5]。故為了保證用藥的安全有效，極有必要進(jìn)行品種選育。我們將9個(gè)不同居群何首烏移栽于一處，以主要活性成分2,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒鍘⒋蠡撲亍⒋蠡撲丶酌鹽?測定指標(biāo)，考察異地栽培前后其含量的變化，探討環(huán)境因素對藥材品質(zhì)形成的影響，為篩選優(yōu)良品種、提高何首烏藥材質(zhì)量提供依據(jù)。
1儀器與試藥
1.1試藥
2004年7月～8月間在全國采集了9個(gè)居群的何首烏藥材(塊根)和種苗，2004年～2005年將種苗異地栽培于廣東藥學(xué)院(赤崗校區(qū))，按常規(guī)方法進(jìn)行田間作物管理，2005年4月移栽于廣東藥學(xué)院中山校區(qū)，以居群為單位，間距30mm分隔種植，2008年5月收獲移栽2年的何首烏藥材。所有藥材經(jīng)廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院嚴(yán)寒靜副教授鑒定均為蓼科植物何首烏PolygonummultiflorumThunb.。
大黃素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號110756220110);大黃素甲醚對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號1107582200307);2,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒斬哉掌?(中國藥品生物制品檢定所，批號110844??200404);甲醇、乙腈(Dikma公司)為色譜純;其余試劑均為分析純;水為重蒸水。
1.2儀器
Waters2695SeparationModule高效液相色譜儀,Waters2996二極管陣列檢測器，EMpower色譜工作站。
2方法與結(jié)果
2.12,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒盞牟舛?
按照2010版藥典方法進(jìn)行[1]。
2.2大黃素、大黃素甲醚的測定
采用文獻(xiàn)[4]所報(bào)道的高效液相色譜法進(jìn)行測定。
2.3統(tǒng)計(jì)方法
數(shù)據(jù)處理采用SPSS11.5分析完成。采用t檢驗(yàn)對生長在原產(chǎn)地和中山的何首烏質(zhì)量指標(biāo)平均數(shù)差異的顯著性進(jìn)行檢測。結(jié)果見表1。表1不同居群何首烏異地栽培前后活性成分比較結(jié)果注：TG為2,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒?;EM為大黃素;PH為大黃素甲醚。*P<0.05,**P<0.01表1列出了不同居群何首烏在原產(chǎn)地生長和異地栽培的活性成分含量的比較結(jié)果。從t檢驗(yàn)的結(jié)果得知，異地栽培2年采收的何首烏藥材中大黃素的含量與原產(chǎn)地采收者差異有顯著性(P<0.01)，2,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒盞暮?量與原產(chǎn)地相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而大黃素甲醚的含量栽培前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
環(huán)境反應(yīng)指數(shù)表示供試品種源種植在中山與原產(chǎn)地相應(yīng)檢測指標(biāo)的相對比值。相對比值在0%～100%范圍內(nèi)，反應(yīng)指數(shù)越大，意味著該指標(biāo)對環(huán)境反應(yīng)越遲鈍。而在相對比值大于100%的情況下，反應(yīng)指數(shù)越大，意味著該指標(biāo)對環(huán)境反應(yīng)越敏感。
從反應(yīng)指數(shù)看，大黃素含量受環(huán)境影響最大，反應(yīng)指數(shù)變幅為5.107%～53.37%，均值為21.19%，其次為2,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒眨?反應(yīng)指數(shù)變幅為88.84%～203.3%，均值為134.0%，而大黃素甲醚含量受環(huán)境影響則較小。從變異系數(shù)看，大黃素對環(huán)境反應(yīng)的敏感性在居群間的差異最大，RSD為78.84%，2,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒盞牟鉅熳钚。?為27.98%。
由表1可知，同一居群何首烏的不同活性成分對環(huán)境反應(yīng)的敏感性也存在較大的差異，有的成分對環(huán)境反應(yīng)較敏感，有的成分則較為遲鈍。如德慶居群何首烏的2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒斬曰肪撤從ψ畛俁郟?反應(yīng)指數(shù)為96.91%，而大黃素對環(huán)境反應(yīng)卻極為敏感，反應(yīng)指數(shù)為7.299%。由此可知，不同居群的同一活性成分或同一居群的不同活性成分可表現(xiàn)出不同的環(huán)境反應(yīng)。
3討論
3.1二苯乙烯苷類化合物是中藥何首烏發(fā)揮降血脂、促智、抗衰老等作用的主要成分[3];蒽醌類化合物則是何首烏發(fā)揮潤腸、通便作用的主要成分[3]。本實(shí)驗(yàn)以此2類成分作為指標(biāo)性成分，可以較好的反應(yīng)藥材的品質(zhì)。
3.2藥材中化學(xué)成分的種類和含量受到遺傳因素和環(huán)境的雙重影響[6]。植物體受不同的生態(tài)或地理環(huán)境長期選擇作用塑造而形成的地方性特化基因型(localspecializedgenotype)是導(dǎo)致不同居群藥材品質(zhì)差異的內(nèi)在因素;氣候、土壤等環(huán)境因子是對藥材的品質(zhì)差異產(chǎn)生影響的外在因素。新晨
陳萬生等人[7]認(rèn)為何首烏化學(xué)成分的差異主要源于種質(zhì)差異，而環(huán)境因素的影響不大。他們測定了9個(gè)產(chǎn)區(qū)的10個(gè)何首烏樣品異地移栽2年前后化學(xué)成分的含量，發(fā)現(xiàn)除山東產(chǎn)何首烏在移栽后化學(xué)成分的含量發(fā)生較大變異外，其余各樣品化學(xué)成分含量基本保持了原來的特性。但本研究結(jié)果顯示：異地栽培后何首烏主要活性成分的變化并不一致，大黃素甲醚不因生長環(huán)境變化而發(fā)生明顯變化，而大黃素和2,3,5,4′?菜聶腔?二苯乙烯??2??O?撥陋?D?財(cái)咸煙擒趙蚍⑸?了變化，但沒有表現(xiàn)出因環(huán)境變化的趨同性。因此尚不能得出“何首烏化學(xué)成分的差異主要來源于種質(zhì)差異”的結(jié)論。結(jié)合本研究前期對ITS序列的分析[8-9]可知，不同地區(qū)何首烏在長期地理環(huán)境選擇作用下，形成了特異的基因型。對于藥材來說，決定藥材療效的物質(zhì)基礎(chǔ)是其活性成分，其種類和含量的高低(表型)是基因型與環(huán)境之間相互作用的產(chǎn)物,可用公式表示為：表型=基因型+環(huán)境飾變[6]。表型具有可塑性，說明了為什么不同產(chǎn)地的同一種藥材質(zhì)量和療效有著差別。因此在篩選何首烏優(yōu)良種質(zhì)資源的過程中，應(yīng)從遺傳和環(huán)境兩方面綜合考慮，可使育成的品種在生產(chǎn)應(yīng)用過程中品質(zhì)不易受栽培環(huán)境的變化而改變。
【參考文獻(xiàn)】
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[2]中國中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草：6卷[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1999:671-674.
[3]廖海民,胡正海.何首烏的生物學(xué)及化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].中草藥,2006,36(2):311-314.
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[5]傅軍,嚴(yán)寒靜,梁從慶,等.不同采集地何首烏的質(zhì)量評價(jià)[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào),2006(3):253-264.
[6]黃璐琦,張瑞賢.“道地藥材”的生物學(xué)探討[J].中國中藥雜志,1997,32(9):563-566.